目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-32页 |
第一章 猪圆环病毒的研究进展 | 第10-24页 |
1 猪圆环病毒的分子生物学研究进展 | 第10-13页 |
·病毒的病原学特点 | 第10-11页 |
·PCV的基因组结构 | 第11-12页 |
·PCV病毒基因组编码的主要蛋白 | 第12-13页 |
2 PCV2疫苗的研究进展 | 第13-18页 |
·目前已商品化的PCV2疫苗及其免疫效力 | 第13-14页 |
·灭活疫苗 | 第14页 |
·PCV2弱毒疫苗 | 第14-16页 |
·PCV2基因工程疫苗 | 第16-18页 |
参考文献 | 第18-24页 |
第二章 杆状病毒/昆虫细胞表达系统研究进展 | 第24-32页 |
1 杆状病毒简介 | 第24-25页 |
2 杆状病毒表达系统的特点 | 第25-26页 |
3 杆状病毒表达系统的应用 | 第26-29页 |
·杆状病毒作为表面展示系统 | 第26页 |
·杆状病毒作为哺乳动物细胞表达载体 | 第26-27页 |
·杆状病毒作为基因工程疫苗载体 | 第27-29页 |
参考文献 | 第29-32页 |
第二篇 试验研究 | 第32-72页 |
第一章 猪圆环病毒2型ORF2基因的原核表达纯化及其抗体的制备 | 第32-50页 |
摘要 | 第32-33页 |
1 材料与方法 | 第33-41页 |
·材料 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-41页 |
2 结果与分析 | 第41-44页 |
·人工合成密码子优化的OptiORF2基因 | 第41-42页 |
·重组质粒OptiORF2-PET-32a的PCR鉴定 | 第42页 |
·重组质粒OptiORF2-pET-32a在宿主菌中的诱导表达 | 第42页 |
·重组菌表达蛋白溶解状态的鉴定 | 第42-43页 |
·重组融合蛋白的纯化及Western blot分析 | 第43-44页 |
·Cap融合蛋白的定量与抗血清的制备 | 第44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
·表达序列与表达菌的选择 | 第44-45页 |
·目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第45-46页 |
ABSTRACT | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
第二章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在杆状病毒中的分泌表达及其免疫原性研究 | 第50-72页 |
摘要 | 第50-51页 |
1 材料与方法 | 第51-61页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-61页 |
2 结果与分析 | 第61-67页 |
·PCV2 ORF2基因的扩增结果 | 第61页 |
·重组杆状病毒转移载体Mels-pFastBac Ⅰ-ORF2的鉴定结果 | 第61-62页 |
·重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-Cap的鉴定结果 | 第62-63页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第63页 |
·SDS-PAGE和Western-blot检测重组蛋白的表达 | 第63-64页 |
·重组蛋白分泌表达的时相 | 第64-66页 |
·间接ELISA检测免疫小鼠后抗体水平 | 第66-67页 |
3 讨论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
ABSTRACT | 第70-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |