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云斑天牛纤维素酶Ⅱ转基因家蚕的制作及其相关特性研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 文献综述第15-31页
   ·概述第15-16页
   ·纤维素第16-17页
     ·纤维素的结构第16-17页
     ·纤维素微纤维结构第17页
   ·纤维素酶微生物第17-19页
     ·有氧降解第18页
     ·厌氧降解第18-19页
     ·可以完全分解纤维素的微生物第19页
   ·纤维素酶家族第19-20页
   ·纤维素酶的生化特性第20-25页
     ·催化结构域第20-23页
     ·纤维素酶结合结构域第23-25页
   ·真菌纤维素酶的作用机制第25页
   ·维素酶的研究进展第25-26页
   ·转基因研究进展第26-27页
   ·昆虫转座子的研究第27-29页
   ·家蚕基因转移方法第29-30页
   ·转基因家蚕的研究进展第30-31页
第二章 引言第31-35页
   ·研究背景第31-32页
   ·研究目的意义第32-33页
   ·主要研究内容第33-34页
   ·实验技术路线第34-35页
第三章 云斑天牛内源性纤维素酶Ⅱ的CDNA克隆、表达和酶活性分析第35-63页
   ·材料与方法第36-51页
     ·实验材料第36页
     ·主要仪器与试剂第36-40页
     ·实验方法第40-51页
   ·结果与分析第51-60页
     ·Bh-EGase Ⅱ cDNA克隆及基因组序列的测定第51-54页
     ·Bh-EGase Ⅲ的多重比对及系统发育分析第54-55页
     ·构建Bh-EGase Ⅱ的重组杆状病毒第55页
     ·家蚕BmN细胞及幼虫表达Bh-EGase Ⅱ蛋白第55-56页
     ·家蚕血液中表达的蛋白Bh-EGase Ⅱ的SDS-PAGE检测第56-57页
     ·Western blot分析重组Bh-EGase Ⅱ蛋白的表达第57页
     ·重组Bh-EGase Ⅱ的酶性质分析第57-60页
   ·结论与讨论第60-63页
第四章 转BH-EGase Ⅱ基因载体的构建及在BmN细胞中的检验第63-71页
   ·材料与方法第63-66页
     ·材料及主要试剂第63页
     ·主要仪器和设备第63-64页
     ·试剂配方第64-65页
     ·方法第65-66页
   ·结果与分析第66-70页
     ·构建Bh-EGase Ⅱ基因的转基因载体第66-69页
     ·转基因载体在BmN细胞中的表达第69页
     ·Bh-EGase Ⅱ酶的平板活力检测第69-70页
   ·结论与讨论第70-71页
第五章 利用外源BH-EGaseⅡ基因提高家蚕纤维素利用率的研究初探第71-83页
   ·材料与方法第71-77页
     ·材料及实验仪器试剂第71-73页
     ·方法第73-77页
   ·结果与分析第77-81页
     ·显微注射及转基因后代筛选第77-78页
     ·PCR检测第78-79页
     ·转基因插入位点分析第79页
     ·家蚕肠腔中Bh-EGase Ⅱ酶活力检测第79页
     ·转基因家蚕肠腔中食物的还原糖测定第79-80页
     ·中肠BmPFK基因相对表达量的定量分析第80-81页
     ·转基因家蚕的茧质成绩调查第81页
   ·结论与讨论第81-83页
     ·利用显微注射方法成功将外源Bh-GaseⅡ导入到家蚕基因组第82页
     ·转入Bh-GHase Ⅱ基因对蚕的糖代谢、茧质成绩的影响第82-83页
第六章 结论第83-85页
   ·云斑天牛纤维素酶Ⅱ基因的克隆及序列分析第83页
   ·云斑天牛纤维素酶Ⅱ基因的表达及酶活性分析第83页
   ·转基因载体的构建及在BmN细胞中的检验第83-84页
   ·利用外源BH-EGase Ⅱ基因提高家蚕纤维素利用率的研究初探第84-85页
论文的创新点第85-87页
参考文献第87-103页
附录第103-105页
致谢第105-107页
在读期间发表文章及参研课题情况第107页

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