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基于转基因工程的家蚕核型多角体病毒(BmNPV)抗性素材创新及抗性机制研究

摘要第1-14页
ABSTRACT第14-21页
第一章 文献综述第21-37页
   ·概述第21页
   ·家蚕的主要病原第21-24页
     ·细菌病原第21-22页
     ·真菌病原第22页
     ·病毒病原第22-24页
   ·BmNPV侵染及家蚕防御第24-31页
     ·BmNPV侵染过程第24-27页
     ·家蚕免疫应答第27-28页
     ·内源抗性基因第28-30页
     ·外源抗性基因第30-31页
   ·转基因与RNAi第31-34页
     ·转基因第31-32页
     ·RNAi第32-34页
     ·转基因干涉第34页
   ·转基因抗病策略第34-37页
     ·增量表达抗性基因第34页
     ·干涉病原基因第34-35页
     ·调控免疫通路第35-37页
第二章 引言第37-41页
   ·研究背景第37-38页
   ·研究内容第38-40页
   ·研究路线第40-41页
第三章 增量表达Bmlipase-1在感染初始阶段抑制BmNPV提高家蚕抗性第41-61页
   ·材料和方法第41-45页
     ·实验材料第41页
     ·主要仪器试剂及溶液的配置第41-43页
     ·主要实验方法第43-45页
   ·结果与分析第45-57页
     ·家蚕抗性检测平台的建立第45-48页
     ·增量表达Bmlipase-1的转基因家蚕分子检测第48-52页
     ·增量表达Bmlipase-1的转基因家蚕抗性检测第52-56页
     ·增量表达Bmlipase-1的转基因家蚕主要经济性状调查第56-57页
   ·讨论第57-61页
第四章 干涉BmNPV基因在mRNA转录阶段抑制病毒提高转基因家蚕抗性第61-85页
   ·材料和方法第61-65页
     ·实验材料第61页
     ·主要试剂和仪器第61页
     ·实验方法第61-65页
   ·结果与分析第65-82页
     ·家蚕转基因干涉系统的制备第65-67页
     ·转基因干涉系统的插入位点检测第67-69页
     ·比较基因片段和间区的连接模式第69-70页
     ·比较不同启动子第70-74页
     ·比较不同时期靶标基因第74-76页
     ·比较必需与非必需基因第76-81页
     ·转基因干涉系统的经济性状调查第81-82页
   ·讨论第82-85页
第五章 增量表达hycu-ep32在蛋白合成阶段抑制BmNPV提高转基因家蚕抗性第85-99页
   ·材料和方法第85-87页
     ·实验材料第85-86页
     ·主要试剂和仪器第86页
     ·实验方法第86-87页
   ·结果与分析第87-96页
     ·增量表达hycu-ep32的转基因家蚕制备第87-89页
     ·转基因家蚕的插入位点检测第89-90页
     ·转基因家蚕的hycu-ep32表达量检测第90页
     ·转基因系统的抗性检测第90-93页
     ·转基因家蚕感染BmNPV后的hycu-ep32表达量检测第93-94页
     ·转基因系统攻毒后的病毒DNA拷贝数检测第94页
     ·转基因系统的经济性状调查第94-96页
   ·讨论第96-99页
第六章 干涉BmPGRP2激活宿主先天免疫反应抑制BmNPV提高转基因家蚕抗性第99-113页
   ·材料和方法第99-100页
     ·实验材料第99页
     ·主要试剂和仪器第99-100页
     ·实验方法第100页
   ·结果与分析第100-111页
     ·BmPGRP2的克隆和序列分析第100-102页
     ·BmPGRP2的进化分析第102-103页
     ·BmPGRP2的亚细胞定位第103页
     ·BmPGRP2的时空表达谱检测第103-104页
     ·BmPGRP2在不同抗性蚕品系中的检测第104-105页
     ·干涉BmPGRP2的转基因家蚕制备第105-106页
     ·转基因干涉家蚕的BmPGRP2表达量检测第106-107页
     ·转基因干涉家蚕的抗病毒能力分析第107-109页
     ·转基因干涉家蚕的经济性状调查第109页
     ·转基因干涉家蚕的免疫通路基因检测第109-111页
   ·讨论第111-113页
第七章 不同抗病毒策略的优化和整合第113-125页
   ·材料和方法第113-115页
     ·实验材料第113页
     ·主要试剂和仪器第113页
     ·实验方法第113-115页
   ·结果与分析第115-122页
     ·转基因杂交系统的制备和抗性检测第115-117页
     ·改进型转基因抗病毒家蚕的制备和检测第117-122页
     ·整合四种抗性策略的转基因载体pb-KNT的构建第122页
   ·讨论第122-125页
第八章 蚕业生产现行实用品种的转基因改良及安全思考第125-139页
   ·材料和方法第125页
     ·实验材料第125页
     ·主要试剂和仪器第125页
     ·实验方法第125页
   ·结果与分析第125-136页
     ·家蚕实用品种非滞育胚胎的制备第125-127页
     ·家蚕实用品种的第一次大规模转基因改良第127-128页
     ·高抗BmNPV的转基因家蚕的制备第128页
     ·转基因家蚕的安全思考第128-136页
     ·家蚕转基因抗性品系的安全检测中间试验第136页
   ·讨论第136-139页
第九章 综合与结论第139-141页
论文的创新点第141-143页
参考文献第143-157页
博士期间发表的文章第157-159页
申请及授权专利目录第159-161页
会议报告第161-163页
参研课题第163-165页
致谢第165-168页

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