| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·乳酸概述 | 第10页 |
| ·乳酸的结构及性质 | 第10页 |
| ·木质纤维素 | 第10-13页 |
| ·木质纤维素的预处理以及脱毒 | 第11-12页 |
| ·木质纤维素的糖化以及发酵 | 第12页 |
| ·利用木质纤维素生产乳酸 | 第12-13页 |
| ·乳酸菌概述 | 第13-16页 |
| ·乳酸菌分类 | 第13-14页 |
| ·乳酸菌的生理功能 | 第14-15页 |
| ·乳酸菌的应用-细菌素的生产 | 第15页 |
| ·乳酸菌的应用-作为外源蛋白的表达宿主 | 第15-16页 |
| ·乳酸菌的应用-活细胞疫苗 | 第16页 |
| ·乳酸菌表达系统 | 第16-18页 |
| ·组成型表达系统 | 第16-17页 |
| ·诱导型表达系统 | 第17-18页 |
| ·乳酸菌基因敲除系统 | 第18-20页 |
| ·基于自杀质粒的敲除系统 | 第18-19页 |
| ·热敏型敲除系统 | 第19-20页 |
| ·课题的研究意义以及内容 | 第20-22页 |
| 第2章 P. acidilactici DQ2中外源功能基因的表达 | 第22-37页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·菌株与载体 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·培养基,主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-32页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因bglA以及L-乳酸脱氢酶基因启动子P_(ldhL)的克隆 | 第26-28页 |
| ·重组表达载体pMG36e-bglA的构建、pMG36e的改造以及pTY36e-bglA的构建 | 第28-30页 |
| ·重组菌荧光检测 | 第30页 |
| ·重组乳酸片球菌PT3 SDS-PAGE电泳及分析 | 第30-31页 |
| ·重组菌PT3β-葡萄糖苷酶酶活力测定 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·表达载体pTY36e的构建与gfp的表达 | 第32-35页 |
| ·表达载体pTY36e-bglA的构建以及β-葡萄糖苷酶的表达 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 P.acidilactici DQ2 D-乳酸脱氢酶基因ldhD的敲除 | 第37-60页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·菌株与载体 | 第37页 |
| ·实验试剂、仪器 | 第37页 |
| ·培养基,主要溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-46页 |
| ·热敏型载体pSET4S的改造 | 第38-39页 |
| ·敲除质粒pSET4E-AldhD的构建 | 第39-40页 |
| ·ldhD敲除单交换菌株的筛选 | 第40-42页 |
| ·ldhD敲除双交换菌株的筛选 | 第42页 |
| ·乳酸构型的测定 | 第42-43页 |
| ·乳酸脱氢酶酶活的测定 | 第43-44页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第44-45页 |
| ·P. acidilactici DQ2以及P. acidilactici ΔldhD 112对万古霉素抗性实验 | 第45页 |
| ·P. acidilactici DQ2以及P. acidilactici ΔldhD 112的生长状况实验 | 第45-46页 |
| ·野生菌株及突变株对抑制物耐受实验 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-59页 |
| ·敲除载体pSET4S的改造 | 第46-47页 |
| ·敲除质粒pSET4E-ΔldhD的构建 | 第47-48页 |
| ·ldhD敲除单交换菌株的筛选 | 第48-49页 |
| ·ldhD敲除双交换菌株的筛选 | 第49-51页 |
| ·D-乳酸脱氢酶基因敲除菌株乳酸构型的测定 | 第51-52页 |
| ·乳酸脱氢酶活力的测定 | 第52-53页 |
| ·野生菌株以及敲除菌株对万古霉素抗性实验 | 第53-54页 |
| ·P. acidilactici ΔldhD 112生长状况研究 | 第54-55页 |
| ·突变株对抑制物耐受性研究 | 第55-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
