中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-27页 |
1 C_4光合作用 | 第11-13页 |
2 C_4光合作用的进化 | 第13-16页 |
·环境因素 | 第13-14页 |
·C_4基因的进化 | 第14-16页 |
3 C_4光合作用的研究进展 | 第16-17页 |
4 启动子 | 第17-18页 |
5 C_4基因的细胞特异性 | 第18-22页 |
·PEPC 的细胞特异性 | 第18-19页 |
·PPDK 的细胞特异性 | 第19-20页 |
·PCK 的细胞特异性 | 第20-22页 |
6 C_4模式植物——狗尾草 | 第22-23页 |
7 狗尾草突变体的初步筛选 | 第23-26页 |
·狗尾草突变体的初步筛选 | 第24-25页 |
·狗尾草细胞特异性表达抗除草剂植株的获取 | 第25-26页 |
8 研究目的及意义 | 第26-27页 |
第二部分 实验论文 | 第27-43页 |
一、 狗尾草突变体的初步筛选 | 第27-29页 |
1 .实验材料 | 第27页 |
2 .种子繁殖 | 第27页 |
3 .诱变处理狗尾草种子 | 第27-28页 |
·EMS 诱变处理狗尾草种子 | 第27-28页 |
·γ-射线诱变 | 第28页 |
4 .田间种植狗尾草 M2 代 | 第28页 |
5 .狗尾草突变体筛选方法 | 第28-29页 |
二、 狗尾草细胞特异性表达启动子的研究 | 第29-43页 |
1 实验材料 | 第29-33页 |
·植物材料 | 第29页 |
·质粒载体及菌种 | 第29页 |
·酶及化学试剂 | 第29-30页 |
·仪器 | 第30页 |
·配制常用试剂 | 第30-31页 |
·配制培养基(激素和抗生素) | 第31-32页 |
·分析软件 | 第32-33页 |
2 . 分子生物学实验方法 | 第33-36页 |
·CTAB 法提取狗尾草 DNA | 第33页 |
·GeneClean 法回收狗尾草 DNA | 第33-34页 |
·制备 E.coli 感受态细胞 | 第34页 |
·转化 E.coli 感受态细胞 | 第34页 |
·制备农杆菌 LBA4404 感受态细胞 | 第34-35页 |
·转化农杆菌感受态细胞 | 第35页 |
·提取质粒 | 第35-36页 |
·鉴定 | 第36页 |
·活化菌种 | 第36页 |
3 设计狗尾草细胞特异性启动子引物 | 第36-37页 |
4 聚合酶链式反应 | 第37-38页 |
5 酶切体系 | 第38-39页 |
6 目的基因和载体的连接体系(10 μl) | 第39-40页 |
7 获得狗尾草抗性植株 | 第40-43页 |
·狗尾草愈伤转化体系 | 第40-41页 |
·狗尾草丛生芽遗传转化体系 | 第41-43页 |
第三部分 实验结果与讨论 | 第43-62页 |
一、 狗尾草突变体的初步筛选 | 第43-50页 |
1 狗尾草种子繁殖及诱变 | 第43页 |
2 狗尾草突变体的初步筛选 | 第43-50页 |
·2011 年筛选狗尾草突变体 | 第43-45页 |
·2012 年筛选狗尾草突变体 | 第45-50页 |
二、 狗尾草细胞特异性表达启动子的获取 | 第50-62页 |
1 狗尾草 DNA 提取 | 第50页 |
2 pCAMBIA3301- pPPDK::GUS 表达载体的构建 | 第50-54页 |
3 pCAMBIA3301- pPCK::GUS 表达载体的构建 | 第54-57页 |
4 pCAMBIA3301- pPEPC::GUS 表达载体的构建 | 第57-60页 |
5 狗尾草细胞特异性表达抗性植株的获取 | 第60-62页 |
·狗尾草愈伤遗传转化获得抗性植株 | 第60-61页 |
·狗尾草丛生芽转化遗传获得抗性植株 | 第61-62页 |
第四部分 总结及后续工作 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
附录 | 第71页 |