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春石斛品种(系)亲缘关系的AFLP分析与转基因研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
引言第14-18页
 1 研究思路第15-17页
 2 技术路线第17-18页
第一部分 文献综述第18-44页
 第一章 AFLP分子标记技术及其在观赏植物研究中的应用第18-30页
  摘要第18-19页
  1 AFLP技术简介第19-23页
   ·AFLP技术原理第19-20页
   ·AFLP的操作流程第20-21页
   ·AFLP的技术关键第21-22页
   ·AFLP技术的改良进展第22-23页
  2 AFLP技术在观赏植物品种研究上的应用第23-25页
  3 AFLP技术在观赏植物辅助育种上的应用第25-26页
   ·基于AFLP技术的观赏植物遗传图谱构建第25页
   ·基于AFLP技术的观赏植物的相关基因定位第25-26页
  4 兰科植物分子标记技术研究进展第26-30页
 第二章 植物乙烯生物合成调控和花色改良的基因工程研究进展第30-44页
  摘要第30页
  1 乙烯生物合成相关基因第30-33页
   ·ACC合成酶基因第30-32页
   ·ACC氧化酶基因第32-33页
   ·其它乙烯生物合成相关基因的研究第33页
  2 植物花色及CHS基因第33-38页
   ·植物花色的形成机理第33-34页
   ·类黄酮生物合成第34-36页
   ·CHS基因家族及CHSA基因第36-38页
  3 兰花植物遗传转化研究进展第38-42页
   ·兰花植物遗传转化研究的必要性第38-39页
   ·遗传转化研究进展第39-42页
  4 超声波在农杆菌介导遗传转化上的应用第42页
  5 荧光定量RT-PCR技术在转基因鉴定中的应用第42-44页
第二部分 试验研究第44-102页
 第一章 基于AFLP的春石斛品种(系)间亲缘关系分析第44-68页
  第一节 春石斛基因组DNA的提取技术研究第44-53页
   摘要第44-45页
   1 材料与方法第45-48页
   ·试材与取样第45页
   ·仪器与试剂、缓冲液第45-46页
   ·DNA提取方法第46-47页
   ·提取基因组DNA的鉴定第47-48页
   2 结果与分析第48-50页
   ·基因组DNA的提取质量和得率第48-50页
   ·荧光AFLP检验第50页
   3 讨论第50-53页
   ·多糖及其他杂质的去除第50-52页
   ·提取方法对DNA质量和浓度的影响第52-53页
  第二节 春石斛品种(系)亲缘关系的AFLP分析第53-68页
   摘要:第53-54页
   1 材料与方法第54-58页
   ·植物材料第54页
   ·研究方法第54-58页
   2 结果与分析第58-64页
   ·引物筛选第58-59页
   ·遗传多样性分析第59-60页
   ·30个春石斛品种(系)的亲缘关系分析第60-64页
   3 讨论第64-68页
   ·遗传距离与品种(系)形态的关系分析第64-65页
   ·品种(系)亲缘关系分析对育种的启示第65页
   ·采用荧光AFLP技术的优点与不足第65-68页
 第二章 春石斛的类原球茎(PLBs)再生与遗传转化研究第68-102页
  第一节 超声波辅助诱导的春石斛类原球茎再生第68-78页
   摘要第68-69页
   1 材料与方法第69-71页
   ·植物材料第69-70页
   ·试验步骤与研究方法第70-71页
   2 结果与分析第71-75页
   ·春石斛类原球茎的诱导第71-73页
   ·类原球茎和芽的增殖效率第73-75页
   3 讨论第75-78页
  第二节 超声波辅助农杆菌介导的CHS基因转化春石斛品种‘Sanya’的研究第78-90页
   摘要第78-80页
   1 材料与方法第80-82页
   ·材料第80页
   ·CHS基因的表达载体第80-81页
   ·农杆菌介导的类原球茎转化第81页
   ·PCR检测第81-82页
   ·Southern blot分析第82页
   ·Real-time RT-PCR鉴定第82页
   2 结果与分析第82-87页
   ·转基因植株的获得第82-84页
   ·PCR检测第84页
   ·Southern blot检测第84-85页
   ·荧光定量RT-PCR鉴定第85-87页
   3 讨论第87-90页
  第三节 超声波辅助农杆菌介导ASACC基因转化春石斛‘Sanya’的研究第90-102页
   摘要第90-91页
   1 材料与方法第91-93页
   ·材料第91页
   ·ASACC基因的表达载体第91-92页
   ·农杆菌介导的类原球茎转化第92页
   ·GUS组织化学检测第92-93页
   ·PCR检测第93页
   ·Southern blot分析第93页
   ·荧光定量RT-PCR鉴定第93页
   2 结果与分析第93-99页
   ·转基因植株的获得第93-94页
   ·GUS基因的组织化学检测第94-96页
   ·PCR检测第96页
   ·Southern blot检测第96-97页
   ·荧光定量RT-PCR鉴定第97-99页
   3 讨论第99-102页
全文结论第102-104页
创新点第104-106页
参考文献第106-122页
攻读博士期间发表的文章第122-124页
致谢第124页

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