| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·污水回用的意义及健康风险 | 第10-13页 |
| ·国内外水资源现状 | 第10页 |
| ·污水回用利用的必要性 | 第10-11页 |
| ·城市污水再生利用健康风险 | 第11-13页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌的研究进展 | 第13-17页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌的生物学特性 | 第13页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌的血清型特性 | 第13-14页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌流行病学 | 第14-17页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌的毒力机理及 PCR 检测方法的必要性 | 第17-20页 |
| ·毒力基因 eaeA | 第17-18页 |
| ·毒力基因 rfbE | 第18-19页 |
| ·毒力基因 EAgg | 第19页 |
| ·病原性大肠埃希氏细菌 PCR 检测方法的必要性 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| ·研究背景 | 第20页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 2 城市污水中病原性大肠埃希氏菌毒力基因 PCR 检测方法的建立 | 第22-30页 |
| ·定性 PCR 技术原理及反应体系的影响因素 | 第22-24页 |
| ·定性 PCR 技术原理 | 第22-23页 |
| ·定性 PCR 反应体系的影响因素 | 第23-24页 |
| ·试验材料 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要设备 | 第24页 |
| ·试剂制备 | 第24页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌毒力基因 eaeA PCR 检测方法的建立 | 第24-26页 |
| ·毒力基因 eaeA 引物性质 | 第24-25页 |
| ·毒力基因 eaeA PCR 的特异性 | 第25页 |
| ·水样的浓缩 | 第25-26页 |
| ·DNA 的提取 | 第26页 |
| ·毒力基因 eaeA 定性 PCR 检测方法 | 第26页 |
| ·肠出血性大肠埃希氏菌毒力基因 rfbE 的 PCR 检测方法的建立 | 第26-28页 |
| ·毒力基因 rfbE 引物的性质 | 第26-27页 |
| ·毒力基因 rfbE PCR 的特异性 | 第27页 |
| ·水样的浓缩和 DNA 提取 | 第27页 |
| ·毒力基因 rfbE 定性 PCR 检测方法 | 第27-28页 |
| ·肠聚集性大肠埃希氏菌毒力基因 EAgg PCR 检测方法的建立 | 第28-30页 |
| ·毒力基因 EAgg 引物的性质 | 第28页 |
| ·毒力基因 EAgg PCR 的特异性 | 第28页 |
| ·水样的浓缩的 DNA 提取 | 第28页 |
| ·毒力基因 EAgg 定性 PCR 检测方法 | 第28-30页 |
| 3 病原性大肠埃希氏菌毒力基因实时荧光定量 PCR 检测方法的建立 | 第30-45页 |
| ·实时定量 PCR 原理及反应体系的影响因素 | 第30-32页 |
| ·实时定量 PCR 技术原理 | 第30-31页 |
| ·实时定量 PCR 数学原理 | 第31页 |
| ·反应体系的影响因素 | 第31-32页 |
| ·试验材料 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要设备 | 第32页 |
| ·相关试剂的制备 | 第32-33页 |
| ·实时荧光定量 PCR 标准品的构建 | 第33-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·PCR 扩增产物的纯化回收 | 第34页 |
| ·病原性大肠埃希氏毒力基因重组质粒的制备和蓝白斑的筛选 | 第34-36页 |
| ·毒力基因 eaeA 实时荧光定量 PCR 方法的建立 | 第36-38页 |
| ·毒力基因 eaeA 实时荧光定量 PCR 的反应体系 | 第36页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的反应条件 | 第36-37页 |
| ·eaeA 标准曲线的测定 | 第37-38页 |
| ·毒力基因 rfbE 实时荧光定量 PCR 方法的建立 | 第38-40页 |
| ·毒力基因 rfbE 实时荧光定量 PCR 的反应体系 | 第38页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的反应条件 | 第38-39页 |
| ·rfbE 标准曲线的测定 | 第39-40页 |
| ·毒力基因 EAgg 实时荧光定量 PCR 方法的建立 | 第40-42页 |
| ·毒力基因 EAgg 实时荧光定量 PCR 的反应体系 | 第40-41页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的反应条件 | 第41页 |
| ·EAgg 标准曲线的测定 | 第41-42页 |
| ·城市污水中病原性大肠埃希氏菌毒力基因的 QPCR 的应用 | 第42-45页 |
| 4 城市污水中病原性大肠埃希氏菌毒力基因的污染源追踪 | 第45-53页 |
| ·城市污水中总大肠杆菌和粪大肠杆菌的检测方法 | 第45-46页 |
| ·病原性大肠埃希氏菌污染源追踪法的研究现状 | 第46-47页 |
| ·试验材料 | 第47-49页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要设备 | 第47页 |
| ·试验采样及前处理及提取 DNA | 第47-49页 |
| ·城市污水中总大肠杆菌和粪大肠杆菌的检测 | 第49页 |
| ·毒力基因 eaeA、rfbE 和 EAgg 污染源追踪 | 第49-51页 |
| ·毒力基因 eaeA、rfbE 和 EAgg 污染源实时实时荧光定量检测 | 第51-53页 |
| 5 结论与建议 | 第53-55页 |
| ·结论 | 第53页 |
| ·建议 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60页 |
