| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·国内外水资源现状 | 第9-12页 |
| ·城市污水回用面临的病原微生物污染问题 | 第12页 |
| ·水体中典型肠道病原菌：志贺氏菌及其危害 | 第12-14页 |
| ·水体中志贺氏菌的传统检测方法及其局限性 | 第14-15页 |
| ·PCR 技术原理及其应用 | 第15-17页 |
| ·常规 PCR 的原理及应用 | 第15-16页 |
| ·定量 PCR 的原理及应用 | 第16-17页 |
| ·研究目的与内容 | 第17-19页 |
| ·问题的提出 | 第17-18页 |
| ·研究目的 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 城市生活污水中志贺菌定性 PCR 检测方法的建立 | 第19-28页 |
| ·试验材料 | 第19-21页 |
| ·实验菌株 | 第19页 |
| ·分子生物学试剂及其配制 | 第19-20页 |
| ·主要设备 | 第20-21页 |
| ·水样采集 | 第21页 |
| ·采样点 | 第21页 |
| ·采样时间及采样方法 | 第21页 |
| ·水样的浓缩 | 第21页 |
| ·志贺氏菌 PCR 检测方法的建立 | 第21-25页 |
| ·志贺氏菌引物的筛选 | 第21-22页 |
| ·志贺氏菌引物 ipaH8 和 ipaH10 的特异性验证 | 第22-23页 |
| ·PCR 反应体系退火温度的选择 | 第23-24页 |
| ·退火温度的选择 | 第24页 |
| ·PCR 反应体系和条件 | 第24-25页 |
| ·PCR 结果分析 | 第25-27页 |
| ·琼脂糖凝胶的制备 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 3 志贺氏菌 ipaH 基因定量 PCR 检测方法的建立 | 第28-39页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·参考菌株和主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要设备 | 第29页 |
| ·实时荧光定量 PCR 标准品的构建 | 第29-34页 |
| ·相关试剂的制备 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·PCR 扩增产物的纯化回收 | 第32页 |
| ·克隆的筛选和重组质粒标准品的制备 | 第32-34页 |
| ·ipaH 基因定量 PCR 的反应体系和反应条件 | 第34-35页 |
| ·读板温度的确定 | 第34-35页 |
| ·ipaH 基因定量 PCR 的反应体系 | 第35页 |
| ·ipaH 基因定量 PCR 的反应条件 | 第35页 |
| ·标准曲线的测定及评价 | 第35-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 4 西安地区志贺氏菌 ipaH 基因的多拷贝分析 | 第39-44页 |
| ·志贺氏菌流行特点 | 第39-40页 |
| ·志贺氏菌在国内外的流行特点 | 第39-40页 |
| ·志贺氏菌在西安的流行特点 | 第40页 |
| ·多角度考察 ipaH 基因拷贝数 | 第40-42页 |
| ·志贺氏菌 ipaH 基因 Blast 结果 | 第40-42页 |
| ·平板计数辅助定量检测 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 5 城市污水中志贺氏菌的分布规律 | 第44-50页 |
| ·志贺氏菌的自然影响因素 | 第44-47页 |
| ·采样点及其水体概况 | 第44页 |
| ·采样方法和水样前处理方法 | 第44页 |
| ·定量 PCR 检测 | 第44-46页 |
| ·常规理化指标的测定 | 第46-47页 |
| ·志贺氏菌的自然影响因素分析 | 第47页 |
| ·城市污水系统对志贺氏菌去除效果的研究 | 第47-48页 |
| ·取样点及其水体概况 | 第47-48页 |
| ·志贺氏菌定量 PCR 检测 | 第48页 |
| ·志贺氏菌在污水处理系统中的分布规律分析 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-50页 |
| 6 结论与建议 | 第50-52页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| ·建议 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录 | 第56页 |
