海水弧菌耐药性调查及整合子—基因盒系统检测
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-26页 |
| 1. 细菌耐药性概述 | 第11-14页 |
| ·细菌耐药性的产生及其发展概况 | 第11页 |
| ·我国水产养殖中细菌耐药性发展及现状 | 第11-14页 |
| ·鱼类病原菌耐药性的来源 | 第12-13页 |
| ·养殖水域—潜在耐药细菌以及抗性因子的来源 | 第13页 |
| ·海水养殖环境细菌耐药性研究 | 第13-14页 |
| 2. 细菌耐药性的形成机制 | 第14-16页 |
| ·细菌产生灭活酶或钝化酶 | 第14页 |
| ·抗生素作用靶位的改变 | 第14-15页 |
| ·细菌主动药物外排机制 | 第15页 |
| ·细菌细胞膜通透性改变 | 第15-16页 |
| ·细菌形成生物被膜 | 第16页 |
| 3. 整合子相关的耐药机制研究 | 第16-21页 |
| ·整合子---基因盒系统的概念及结构 | 第16-17页 |
| ·整合子---基因盒系统的类型与分布 | 第17-18页 |
| ·基因盒结构、种类及来源 | 第18-20页 |
| ·整合子对基因盒的捕获及基因盒的表达 | 第20-21页 |
| ·整合子---基因盒系统的检测方法 | 第21页 |
| 4. 弧菌及弧菌病 | 第21-24页 |
| ·弧菌属细菌及主要菌种 | 第21-22页 |
| ·水产致病性弧菌及其所致疾病 | 第22-24页 |
| 5. 本论文的研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 第一章 ：海水弧菌对常用抗生素的耐药性调查 | 第26-45页 |
| 1. 材料与方法 | 第26-29页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·试验菌株 | 第26页 |
| ·药敏纸片 | 第26页 |
| ·细菌生化鉴定管、主要培养基及试剂的配置 | 第26-27页 |
| ·主要仪器与设备 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·样品采集与处理 | 第27-28页 |
| ·菌株分离与鉴定 | 第28页 |
| ·弧菌菌株对 15 种抗菌药物体外敏感性测定 | 第28-29页 |
| 2. 结果 | 第29-41页 |
| ·三地分离纯化所得弧菌生化鉴定结果 | 第29-35页 |
| ·上海崇明地区菌株生化鉴定结果 | 第30-31页 |
| ·江苏启东地区菌株生化鉴定结果 | 第31-33页 |
| ·海南琼海地区菌株生化鉴定结果 | 第33-35页 |
| ·耐药性检测结果 | 第35-41页 |
| ·不同地区药敏试验结果 | 第35-38页 |
| ·上海崇明地区药敏试验结果 | 第35-36页 |
| ·江苏启东地区药敏试验结果 | 第36-37页 |
| ·海南琼海地区药敏试验结果 | 第37页 |
| ·不同地区药敏试验结果比较 | 第37-38页 |
| ·不同地区多重耐药结果 | 第38-41页 |
| ·上海崇明地区多重耐药结果 | 第38-39页 |
| ·江苏启动地区多重耐药结果 | 第39-40页 |
| ·海南琼海地区多重耐药结果 | 第40-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-45页 |
| ·不同地区的耐药水平分析 | 第41页 |
| ·不同地区的多重耐药结果分析 | 第41-42页 |
| ·水产养殖中细菌耐药现状分析 | 第42-43页 |
| ·水产养殖中细菌耐药性的防治对策 | 第43-45页 |
| ·合理使用抗菌药 | 第43页 |
| ·加强养殖管理和辅助治疗 | 第43-44页 |
| ·用微生态制剂，开展生物防病 | 第44-45页 |
| 第二章 ：海水弧菌整合子-基因盒检测 | 第45-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第45-51页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·试验菌株 | 第45页 |
| ·主要分子生物学试剂盒及生化试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器与设备 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·样品采集、菌株分离与鉴定 | 第46页 |
| ·菌株对 15 种抗菌药物体外敏感性测定 | 第46页 |
| ·Ⅰ类整合子的 PCR 检测 | 第46-48页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第48-50页 |
| ·可变区 PCR 产物的酶切分析 | 第50页 |
| ·PCR 产物的序列分析 | 第50-51页 |
| 2. 结果 | 第51-55页 |
| ·整合子 PCR、电泳检测结果 | 第51-54页 |
| ·I 类整合酶的 PCR 扩增 | 第51页 |
| ·I 类整合子可变区的 PCR 扩增 | 第51-53页 |
| ·I 类整合子 3’—保守端的 PCR 扩增 | 第53-54页 |
| ·整合子可变区 PCR 产物的酶切分析 | 第54-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-58页 |
| ·l 类整合子的 PCR 检测 | 第55页 |
| ·耐药表型与 l 类整合子耐药基因盒相关性分析 | 第55-57页 |
| ·l 类整合子与细菌多重耐药水平 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
