符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-29页 |
·发病历史与现状 | 第14页 |
·病原学研究 | 第14-15页 |
·DFV 的理化特性 | 第14-15页 |
·DFV 的培养特性 | 第15页 |
·分子生物学研究及遗传进化 | 第15-17页 |
·流行病学的研究 | 第17-18页 |
·临床症状及病理特征 | 第18-19页 |
·临床症状 | 第18页 |
·病理特征 | 第18-19页 |
·诊断 | 第19-23页 |
·病毒分离 | 第19-20页 |
·电镜检测 | 第20页 |
·实验室诊断方法 | 第20-23页 |
·预防与治疗 | 第23-24页 |
·预防 | 第23-24页 |
·治疗 | 第24页 |
·实时荧光定量 RT-PCR 的研究进展 | 第24-29页 |
·实时荧光定量 PCR 的原理 | 第24-25页 |
·实时荧光定量 PCR 的分类 | 第25-26页 |
·TagMan 探针法 | 第25页 |
·SYBR Green I 荧光染料法 | 第25页 |
·TagMan MGB 探针 | 第25页 |
·分子信标 | 第25-26页 |
·双杂交探针 | 第26页 |
·实时荧光定量 PCR 的定量方法 | 第26页 |
·实时荧光定量 PCR 的应用 | 第26-29页 |
·本研究的目的及意义 | 第29页 |
2. 材料与方法 | 第29-45页 |
·DFV BZ 株的分离及鉴定 | 第29-37页 |
·载体与毒(菌)株 | 第29-30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·溶液配制 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·病毒的分离 | 第31页 |
·细菌分离 | 第31页 |
·血凝试验 | 第31-32页 |
·电镜观察 | 第32页 |
·细胞血清单向中和试验 | 第32页 |
·ELD50的测定 | 第32页 |
·动物回归试验 | 第32页 |
·病毒的核酸鉴定 | 第32-37页 |
·DFV BZ 株的生物学特性研究 | 第37-39页 |
·毒株与鸡胚、鸭胚 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·血凝特性分析 | 第37页 |
·鸭胚成纤维细胞(DEF)的制备 | 第37-38页 |
·DFV-BZ 毒株病毒滴度 TCID50的测定 | 第38页 |
·病毒核酸类型鉴定 | 第38页 |
·氯仿敏感性试验 | 第38页 |
·去氧胆酸钠敏感性试验 | 第38页 |
·耐热试验 | 第38-39页 |
·耐酸试验 | 第39页 |
·阳离子稳定试验 | 第39页 |
·对不同宿主适应性 | 第39页 |
·鸡胚不同部位含毒量比较 | 第39页 |
·DFV 荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立及应用 | 第39-42页 |
·毒株、质粒标准品 | 第39页 |
·实验动物 | 第39页 |
·主要试剂及仪器 | 第39-40页 |
·引物和探针的设计 | 第40页 |
·阳性质粒标准品的制备 | 第40页 |
·循环参数及反应体系的优化 | 第40-41页 |
·标准曲线的制作 | 第41页 |
·特异性试验 | 第41页 |
·敏感性试验 | 第41页 |
·人工感染鸭样品检测 | 第41-42页 |
·不同途径人工感染雏鸭 DFV 的比较研究及组织学定位 | 第42-45页 |
·实验动物与毒株 | 第42页 |
·主要试剂和仪器 | 第42页 |
·溶液配制 | 第42页 |
·雏鸭脑内接种试验 | 第42-43页 |
·雏鸭颈部皮下接种试验 | 第43页 |
·雏鸭滴鼻、点眼、口服接种试验 | 第43页 |
·不同攻毒途径的雏鸭解剖观察及组织器官的采集处理 | 第43页 |
·核酸自动提取仪样品提取步骤 | 第43-44页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法组织学定位 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-73页 |
·DFV BZ 株的分离及鉴定 | 第45-49页 |
·病毒的分离 | 第45页 |
·细菌分离 | 第45页 |
·血凝试验 | 第45页 |
·电镜观察 | 第45-46页 |
·细胞血清单向中和试验 | 第46页 |
·ELD50的测定 | 第46页 |
·动物回归试验 | 第46-47页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第47页 |
·序列分析 | 第47-49页 |
·DFV BZ 株的生物学特性研究 | 第49-63页 |
·血凝特性分析 | 第49页 |
·DFV-BZ 毒株病毒滴度 TCID_(50)的测定 | 第49页 |
·病毒核酸类型鉴定 | 第49-50页 |
·氯仿敏感性试验 | 第50页 |
·去氧胆酸钠(SDC)敏感性试验 | 第50页 |
·耐热试验 | 第50-51页 |
·耐酸试验 | 第51页 |
·阳离子稳定试验 | 第51页 |
·对不同宿主适应性 | 第51-52页 |
·鸡胚不同部位含毒量比较 | 第52-63页 |
·鸭黄病毒荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立及应用 | 第63-66页 |
·常规 PCR 验证引物特异性和反应条件的试验 | 第63-64页 |
·循环参数及反应体系的优化 | 第64页 |
·标准曲线 | 第64页 |
·特异性试验 | 第64-65页 |
·敏感性试验结果 | 第65-66页 |
·人工感染样品检测 | 第66页 |
·不同途径人工感染雏鸭 DFV 的比较研究及组织学定位 | 第66-73页 |
·雏鸭脑内接种试验 | 第66-67页 |
·雏鸭颈部皮下接种试验 | 第67页 |
·雏鸭颈部皮下接种试验 | 第67页 |
·DFV 不同攻毒途径的结果比较 | 第67-69页 |
·荧光定量 RT-PCR 方法组织学定位 | 第69-73页 |
4 讨论 | 第73-78页 |
5 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第84页 |