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斜卧青霉高效基因打靶系统的构建与转录调控因子CreA功能的研究

中文摘要第1-17页
ABSTRACT第17-25页
符号说明第25-27页
第一章 绪论第27-57页
   ·DNA双链断裂的修复第27-36页
     ·双链断裂的原因与频率第28-29页
     ·NHEJ核心因子对DNA双链断裂的反映第29-33页
     ·NHEJ途径中蛋白质聚结新模型第33-35页
     ·真菌NHEJ途径损伤增强基因打靶的效率第35-36页
   ·真核细胞转化第36-38页
   ·基因打靶第38-39页
   ·纤维素酶和半纤维素酶研究进展第39-43页
     ·木聚糖酶和纤维素酶的调控因子第39-40页
     ·XlnR功能域第40-41页
     ·瑞氏木霉中的木聚糖酶表达第41-42页
     ·在瑞氏木霉中Xyr1的诱导调控第42-43页
   ·青霉产生木聚糖酶的特点第43-47页
     ·内切木聚糖酶第44-45页
     ·β-木糖苷酶第45页
     ·呋喃阿拉伯糖苷酶第45-46页
     ·α-D葡萄糖醛酸苷酶第46页
     ·乙酰木聚糖酯酶第46页
     ·阿魏酸酯酶第46-47页
   ·青霉中编码木聚糖酶的基因第47-51页
     ·内切木聚糖酶基因第48-49页
     ·β-木糖苷酶基因第49-50页
     ·α-呋喃阿拉伯糖苷酶第50页
     ·乙酰木聚糖酯酶第50页
     ·阿魏酸酯酶第50-51页
   ·青霉木聚糖降解基因的基因组构第51页
   ·青霉木聚糖酶表达的调控第51-57页
     ·葡萄糖阻遏第52-53页
     ·木聚糖酶基因的诱导表达第53-54页
     ·木聚糖酶表达受pH的调控第54-57页
第二章 斜卧青霉高效基因打靶系统的构建第57-107页
   ·引言第57-58页
   ·材料和方法第58-76页
     ·菌株第58页
     ·PCR引物第58-62页
     ·培养基和培养条件第62-63页
     ·常用储备液及缓冲液第63页
     ·主要实验试剂第63-64页
     ·仪器第64页
     ·菌种保藏技术第64页
     ·实验方法第64-76页
   ·结果和分析第76-102页
     ·pku70基因的克隆与分析第76-78页
     ·斜卧青霉△pku70突变株的构建第78-82页
     ·斜卧青霉△pku70突变株的表型特征第82-84页
     ·斜卧青霉△pku70突变株基因打靶效率的验证分析第84-98页
     ·斜卧青霉转化片段整合类型的分析第98-100页
     ·斜卧青霉△pku70突变株筛选标记的置换第100-101页
     ·斜卧青霉共转化的初步研究第101-102页
   ·讨论第102-107页
第三章 斜卧青霉纤维素酶表达调控的研究第107-135页
   ·引言第107-108页
   ·材料和方法第108-112页
     ·菌株第108页
     ·培养基和培养条件第108-109页
     ·溶液的配制第109-110页
     ·标准曲线的绘制第110页
     ·酶活的测定第110-111页
     ·斜卧青霉creA纠错盒的构建第111-112页
     ·平板检测第112页
     ·pH值测定第112页
     ·生物量测定第112页
     ·蛋白质含量测定第112页
   ·结果和分析第112-133页
     ·斜卧青霉114-2 creA回补盒的构建第112-113页
     ·斜卧青霉114-2 creA回补转化子的筛选第113-114页
     ·斜卧青霉114-2 △creA突变株的平板检测分析第114-117页
     ·斜卧青霉114-2 △creA突变株生物量的测定第117-118页
     ·斜卧青霉114-2 △creA突变株pH值的测定第118-119页
     ·斜卧青霉114-2 △creA突变株酶活的测定第119-123页
     ·斜卧青霉A10 △creA突变株的构建第123-124页
     ·斜卧青霉A10 creA纠错转化子的构建第124-126页
     ·斜卧青霉A10、creA纠错转化子和敲除突变子的平板分析第126-129页
     ·斜卧青霉A10系列菌株pH值的测定第129-130页
     ·斜卧青霉A10、creA纠错转化子及敲除突变子的酶活测定第130-133页
   ·小结第133-135页
全文总结第135-137页
参考文献第137-149页
致谢第149-151页
攻读学位期间发表的学术论文第151-153页
学位论文评阅及答辩情况表第153-155页
附录1第155-157页
外文论文第157-179页
 Ⅰ. Development of a highly efficient gene targeting system allowing rapid genetic manipulations in Penicillium decumbens第157-169页
 Ⅱ. Transcriptional regulation of creA, encoding a catabolite repression element, in Penicillium decumbens第169-179页

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