中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 高活性蓝色犁头霉和新月弯孢霉菌株的筛选 | 第14-30页 |
1 实验材料 | 第15-16页 |
·菌种 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·药品与试剂 | 第15-16页 |
·甾体 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-18页 |
·菌种活化 | 第16页 |
·高产菌株筛选 | 第16页 |
·甾体底物制备 | 第16-17页 |
·蓝色犁头霉转化反应底物 | 第16-17页 |
·新月弯孢霉转化反应底物 | 第17页 |
·甾体转化过程中的分析检测 | 第17-18页 |
·醋酐浓硫酸反应(Heberman-Burchard反应) | 第17页 |
·氯仿—浓硫酸反应(Salkouski反应) | 第17页 |
·硅胶薄层层析分析(TLC) | 第17-18页 |
·产物的提取分离及精制 | 第18页 |
·转化产物的鉴定 | 第18页 |
·红外光谱分析(JR) | 第18页 |
·质谱分析(MS) | 第18页 |
·核磁共振分析(NMR) | 第18页 |
3 结果与讨论 | 第18-28页 |
·菌种的分离活化 | 第18-19页 |
·高活性菌株的筛选 | 第19-22页 |
·薄层层次分析 | 第22页 |
·转化产物的提取精制 | 第22页 |
·转化产物的结构分析 | 第22-28页 |
·ESI质谱分析 | 第22页 |
·红外光谱分析 | 第22-23页 |
·核磁共振光谱分析 | 第23-28页 |
4 小结 | 第28页 |
参考文献 | 第28-30页 |
第二章 新月弯孢霉转化RS生成氢化可的松发酵条件的优化 | 第30-39页 |
1 材料和方法 | 第30-32页 |
·菌种 | 第30-31页 |
·培养基 | 第31页 |
·药品与试剂 | 第31页 |
·实验仪器 | 第31页 |
·甾体底物的制备 | 第31页 |
·培养及转化条件 | 第31页 |
·转化率的测定 | 第31-32页 |
·薄层层析法(TLC) | 第31-32页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第32页 |
·提取分离精制 | 第32页 |
2 结果与讨论 | 第32-36页 |
·培养基中碳源对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第32-33页 |
·培养基中氮源对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第33-34页 |
·底物浓度对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第34页 |
·接种量对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第34-35页 |
·环境条件对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第35-36页 |
·初始pH值对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第35页 |
·通气量对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第35-36页 |
·培养及转化时间对C_(11)β-羟基化转化率的影响 | 第36页 |
3 小结 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-39页 |
第三章 新月弯孢霉转化RS生成氢化可的松新工艺的研究——双轮序列生物转化 | 第39-48页 |
1 材料和方法 | 第40-41页 |
·菌种 | 第40页 |
·培养基 | 第40页 |
·药品与试剂 | 第40页 |
·甾体底物的制备 | 第40页 |
·培养及转化条件 | 第40-41页 |
·摇床实验 | 第40页 |
·2L发酵罐实验 | 第40-41页 |
·转化率的测定 | 第41页 |
·薄层层析法(TLC) | 第41页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第41页 |
·提取分离及精制 | 第41页 |
2 结果与讨论 | 第41-45页 |
·静息细胞转化工艺 | 第41-42页 |
·首批次转化投料时间的确立 | 第42页 |
·首批次转化时间对转化率的影响 | 第42-43页 |
·首批次投料时间对转化率的影响 | 第43页 |
·第二批次转化时间对转化率的影响 | 第43页 |
·第二批次转化投料浓度对转化率的影响 | 第43-44页 |
·菌丝对甾体物质的吸附问题 | 第44页 |
·2L发酵罐制备实验 | 第44-45页 |
3 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
第四章 β-环糊精在氢化可的松发酵生产中的应用研究 | 第48-56页 |
1 材料和方法 | 第48-49页 |
·菌种 | 第48页 |
·培养基 | 第48-49页 |
·仪器与试药 | 第49页 |
·反应底物RS-β-CD包合物的制备 | 第49页 |
·摇瓶培养及转化条件 | 第49页 |
·转化率的测定 | 第49页 |
·薄层层析法(TLC) | 第49页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第49页 |
2 结果与讨论 | 第49-53页 |
·反应介质体系对转化率的影响 | 第49-50页 |
·RS-β-CD包合物溶液的制备 | 第50页 |
·β-CD与RS的浓度配比 | 第50-51页 |
·β-CD与其他投料方式的比较 | 第51页 |
·投料浓度的提高 | 第51-52页 |
·菌丝对甾体物质的吸附问题 | 第52页 |
·β-CD添加底物RS工艺的确定 | 第52-53页 |
·2L发酵罐放大制备实验 | 第53页 |
3 小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
文献综述 甾体微生物转化:C_(11)β-羟基化的研究进展 | 第56-75页 |
1 甾体C_(11)β-羟基化生物化学反应的机理 | 第57页 |
2 具有对甾体进行C_(11)β-羟基化能力的菌种选择 | 第57-59页 |
3 甾体C_(11)β-羟基化生物转化过程涉及的部分生理生化问题 | 第59-66页 |
·培养基组成的选择 | 第59-61页 |
·收获生物催化剂最佳时机的确定 | 第61页 |
·新月弯孢霉对甾体底物C_(11)β-羟基化过程中的部分生理生化特征 | 第61-63页 |
·新月弯孢霉对甾体底物C_(11)β-羟基化生物转化过程特征—吸附现象 | 第63-65页 |
·新月弯孢霉和蓝色犁头霉对RS和RSA等底物C_(11)β-羟基化的部分性质及特征 | 第65-66页 |
4 甾体C_(11)β-羟基化微生物转化介质体系的选择 | 第66-68页 |
5 微生物甾体C_(11)β-羟基化过程中的副产物问题 | 第68-69页 |
6 研究开发展望 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
在读期间科研成果简介 | 第76-77页 |