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β2受体的表达、纯化及在快速检测中的应用

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 绪论第14-31页
   ·β_2肾上腺素能受体激动剂的分子结构特征与危害第14-16页
     ·β_2肾上腺素能受体激动剂的分子结构第14页
     ·β_2肾上腺素能受体激动剂的应用与毒性特征第14-16页
   ·β_2激动剂的快速检测方法研究进展第16-18页
     ·放射免疫技术(RIA)第16-17页
     ·酶免疫分析技术(EIA)第17页
     ·抗体芯片技术第17-18页
   ·β_2肾上腺素能受体研究进展第18-29页
     ·β_2肾上腺素能受体蛋白结构及功能特征第18-21页
     ·G 蛋白偶联受体表达研究进展第21-26页
     ·表达产物的提纯及活性鉴定第26-27页
     ·融合蛋白表达的标签应用第27-28页
     ·提高GPCRs 表达的策略第28-29页
   ·研究目的与意义第29-30页
   ·研究技术路线第30-31页
第二章 β_2肾上腺素能受体蛋白体外表达研究第31-73页
   ·研究目的第31页
   ·β_2肾上腺素能受体在原核细胞蛋白表达研究第31-49页
     ·试剂及仪器第31-34页
     ·研究方法第34-42页
     ·结果与分析第42-49页
   ·真核表达载体的构建及蛋白表达第49-61页
     ·试剂及仪器第49-50页
     ·研究方法第50-53页
     ·结果与分析第53-61页
   ·大仓鼠β_2肾上腺素能受体基因的套叠PCR 法多点突变研究第61-68页
     ·试剂及仪器第61页
     ·研究方法第61-64页
     ·结果与分析第64-68页
   ·讨论第68-73页
     ·表达系统的选择第68-69页
     ·表达载体的选择第69页
     ·提高蛋白表达的策略第69-70页
     ·蛋白的表达及膜蛋白检测第70页
     ·受体蛋白活性测定第70-71页
     ·受体蛋白突变研究第71页
     ·套叠PCR 法在基因突变中的应用第71-73页
第三章 β_2肾上腺素能受体蛋白的纯化研究第73-86页
   ·研究目的第73页
   ·试剂及仪器第73-74页
     ·试剂第73页
     ·溶液配制第73-74页
     ·试验设备第74页
   ·研究方法第74-77页
     ·粗膜制备第74-75页
     ·受体蛋白的纯化第75-76页
     ·蛋白的斑点酶联免疫反应法分析第76页
     ·蛋白的SDS-PAGE 分析及Western blotting 检测第76-77页
     ·斑点酶联配基反应法(Dot- Enzyme Linked Ligand)测定蛋白活性第77页
     ·蛋白浓度测定第77页
   ·结果与分析第77-83页
     ·斑点酶联免疫反应法检测蛋白第77-78页
     ·SDS-PAGE 及Western blotting 检测蛋白第78-81页
     ·斑点酶联配基法测定蛋白活性第81-82页
     ·纯化蛋白浓度测定第82-83页
   ·讨论第83-86页
第四章 β_2受体-酶检测试剂盒的初步构建第86-94页
   ·研究目的第86页
   ·试剂及仪器第86-87页
     ·溶液配制第86页
     ·仪器设备第86-87页
   ·研究方法第87-88页
     ·受体的包被第87页
     ·酶标克仑特罗的制备第87-88页
     ·受体对不同β_2激动剂特异性竞争实验第88页
     ·基于受体的β_2激动剂多残留检测方法在尿液检测中的应用第88页
   ·结果与分析第88-92页
     ·受体-酶多残留检测技术的初步研究第88-91页
     ·受体-酶多残留检测技术的尿样添加回收第91-92页
   ·讨论第92-94页
     ·以受体为检测试剂的快速筛选方法研究第92页
     ·以受体-酶为基础的β_2激动剂快速检测试剂盒的构建第92-94页
第五章 全文结论第94-97页
 1 β_2AR 原核表达系统的建立第94页
 2 β_2AR 哺乳动物细胞表达系统的建立第94-95页
 3 β_2受体基因的突变及表达研究第95页
 4 受体蛋白的纯化第95页
 5 受体-酶检测β_2激动剂的残留方法的初步应用第95-97页
参考文献第97-108页
致谢第108-109页
作者简历第109-110页

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