锯缘青蟹性别分化和性腺发育的EST及基因芯片初步分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-17页 |
| ·锯缘青蟹形态特征、自然分布和生活习性 | 第10页 |
| ·本研究的目的意义 | 第10-11页 |
| ·性别决定和分化暨性腺发育基因研究进展 | 第11-13页 |
| ·cDNA 文库在功能基因筛选上的应用 | 第13-14页 |
| ·表达序列标签应用概述 | 第14-15页 |
| ·基因芯片在筛选差异表达基因上的应用 | 第15页 |
| ·主要研究内容和技术路线 | 第15-17页 |
| ·主要研究内容 | 第15-16页 |
| ·本研究技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-34页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·试剂和仪器 | 第17-18页 |
| ·主要应用软件与生物信息学网站 | 第18页 |
| ·主要引物序列 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-34页 |
| ·精巢卵巢总RNA 抽提及mRNA 分离 | 第18-20页 |
| ·线性化 cDNA 文库构建 | 第20-26页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第26-27页 |
| ·ESTs 大规模测序 | 第27-29页 |
| ·芯片印制与杂交 | 第29-34页 |
| 第三章 结果 | 第34-48页 |
| ·线性化文库构建 | 第34-39页 |
| ·总RNA 抽提的结果 | 第34页 |
| ·mRNA 分离 | 第34-35页 |
| ·长距离PCR 合成双链cDNA | 第35页 |
| ·DSN 活性检测 | 第35-36页 |
| ·最佳循环数确定 | 第36页 |
| ·线性化处理双链cDNA | 第36-37页 |
| ·Sfi I 酶切双链cDNA | 第37页 |
| ·文库滴度测定 | 第37页 |
| ·文库重组率计算 | 第37-39页 |
| ·EST 测序及序列比对 | 第39-46页 |
| ·克隆筛选 | 第39-40页 |
| ·EST 测序结果 | 第40-45页 |
| ·EST 电子数据库构建 | 第45-46页 |
| ·基因芯片分析 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-59页 |
| ·RNA 质量 | 第48页 |
| ·文库讨论 | 第48-50页 |
| ·EST 测序结果分析 | 第50-56页 |
| ·sry 与sox 基因功能 | 第51-52页 |
| ·细胞周期相关基因 | 第52-53页 |
| ·卵黄蛋白原和卵黄蛋白原受体基因 | 第53页 |
| ·热休克蛋白家族 | 第53-54页 |
| ·泛素系统 | 第54-55页 |
| ·抗氧化防御系统 | 第55-56页 |
| ·抗病相关基因 | 第56页 |
| ·其他基因 | 第56页 |
| ·EST 数据库构建 | 第56-57页 |
| ·基因芯片分析 | 第57-59页 |
| 第五章 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-73页 |
| 在学期间发表的学术论文和研究成果 | 第73页 |
