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CRAd.pEgrl-Trail联合放疗对人乳腺癌细胞杀伤效应的实验研究

内容提要第1-5页
中文摘要第5-9页
Abstract第9-19页
第1章 绪论第19-39页
   ·肿瘤基因治疗第19-23页
     ·免疫基因治疗第19-20页
     ·抑癌基因治疗第20-21页
     ·自杀基因治疗第21-22页
     ·反义基因治疗第22页
     ·肿瘤多药耐药基因疗法第22页
     ·肿瘤基因治疗的展望第22-23页
   ·肿瘤基因-放射治疗第23-29页
     ·肿瘤基因-放射治疗的种类第23-26页
     ·Egr-1 介导的肿瘤基因-放射治疗第26-29页
   ·溶瘤病毒与肿瘤治疗第29-34页
     ·腺病毒的基本特性第29-30页
     ·腺病毒载体的发展过程第30-31页
     ·条件复制型腺病毒载体第31-33页
     ·条件复制型腺病毒与肿瘤治疗第33-34页
   ·Trail 基因与肿瘤治疗第34-37页
     ·Trail 基因的结构与特性第34-35页
     ·Trail 基因与细胞凋亡第35-36页
     ·Trail 基因与肿瘤治疗第36-37页
   ·立题依据第37-39页
第2章 材料与方法第39-63页
   ·主要试剂及器材第39-41页
     ·试剂第39-41页
     ·器材第41页
   ·主要仪器第41-42页
   ·质粒、菌株及细胞株第42-43页
     ·质粒及菌株第42-43页
     ·细胞株第43页
   ·照射条件第43页
   ·细胞生物学实验方法第43-46页
     ·培养液配制第43-44页
     ·FBS 制备第44页
     ·D-Hanks 液的配制第44页
     ·胰酶的配制第44页
     ·细胞培养第44页
     ·细胞冻存第44-45页
     ·细胞复苏第45页
     ·细胞增殖检测第45页
     ·细胞凋亡检测第45页
     ·细胞周期检测第45-46页
   ·分子生物学实验方法第46-61页
     ·细菌培养技术第46-48页
     ·重组穿梭载体的构建第48-53页
     ·重组腺病毒的包装与鉴定第53-56页
     ·目的基因蛋白水平表达检测第56-61页
   ·统计学方法第61-63页
第3章 实验结果第63-97页
   ·重组质粒的构建及鉴定第63-68页
     ·目的基因的获得第63-64页
     ·重组质粒 pShuttle-Egr1-Trail-hTert-E1A-E1Bp-E1B55K 的构建及鉴定第64-68页
   ·重组腺病毒的包装及鉴定第68-73页
     ·重组腺病毒质粒构建第68-70页
     ·重组腺病毒包装第70页
     ·重组腺病毒扩增第70-71页
     ·重组腺病毒滴度测定第71-72页
     ·重组腺病毒鉴定第72-73页
   ·重组腺病毒和辐射敏感肿瘤细胞株的筛选第73-74页
   ·重组腺病毒联合辐射对 MDA-MB-231 细胞的杀伤作用第74-84页
     ·重组腺病毒对 MDA-MB-231 细胞生长抑制的影响第74-76页
     ·重组腺病毒联合辐射对 MDA-MB-231 细胞生长抑制的影响第76-79页
     ·重组腺病毒联合 2.0 Gy X 射线照射对 MDA-MB-231 细胞凋亡的影响第79-81页
     ·重组腺病毒联合 2.0 Gy X 射线照射对 MDA-MB-231 细胞周期进程的 影响第81-84页
   ·重组腺病毒 CRAd.pEgr1-Trail 在 MDA-MB-231 细胞中的辐射诱导表达规 律第84-88页
     ·2 Gy X 射线照射后重组腺病毒感染的 MDA-MB-231 细胞中 Trail 基因mRNA表达的变化第84-88页
   ·重组腺病毒 CRAd.pEgr1-Trail 在 MDA-MB-231 细胞凋亡死亡受体通路中相关基因的表达规律第88-97页
     ·2 Gy X 射线照射后重组腺病毒感染的 MDA-MB-231 细胞中 DR5、caspase-8 和 -3 基因 mRNA 表达变化第88-93页
     ·2 Gy X 射线照射后重组腺病毒感染的 MDA-MB-231 细胞中 DR5、caspase-8 和 -3 基因蛋白表达的变化第93-97页
第4章 讨论第97-105页
   ·选择条件复制型腺病毒载体的策略第97-98页
   ·条件复制型腺病毒载体构建及病毒包装第98-99页
   ·敏感细胞株筛选第99-100页
   ·Trail 的死亡受体通路与细胞凋亡第100-103页
     ·重组腺病毒联合照射对 MDA-MB-231 细胞的生长抑制作用第100页
     ·重组腺病毒联合照射对 MDA-MB-231 细胞凋亡及其周期的影响第100-101页
     ·重组腺病毒联合照射对 MDA-MB-231 细胞死亡受体通路相关基因表达的影响第101-103页
   ·展望第103-105页
结论第105-107页
参考文献第107-119页
攻读学位期间发表的学术论文及其他成果第119-123页
致谢第123-122页

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