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膀胱癌DNA甲基化标志物筛查和PA-MSHA及普鲁卡因诱导肿瘤凋亡机制的研究

前言第1-5页
中文摘要第5-9页
ABSTRACT第9-13页
英文缩写词表第13-18页
第1章 绪论第18-51页
 1 研究背景第18页
 2 文献综述第18-38页
   ·膀胱癌第18-22页
     ·概述第18-20页
     ·致病因素第20页
     ·膀胱癌的病理类型第20-22页
     ·目前膀胱癌的治疗手段第22页
   ·表观遗传学第22-38页
     ·概述第22-24页
     ·抑癌基因的甲基化第24-25页
     ·甲基化研究方法第25-33页
     ·膀胱癌抑癌基因甲基化的研究进展第33-36页
     ·表观遗传学制剂的研究进展第36页
     ·表观遗传学在线分析工具第36-38页
 3 技术方法和手段第38-51页
   ·主要材料第38-42页
     ·MSP 引物第38-39页
     ·细胞和细胞株第39-40页
     ·组织标本的保存第40页
     ·试剂及试剂盒第40-41页
     ·主要实验仪器第41-42页
   ·主要方法和手段第42-51页
     ·MSP 甲基化阳性对照的获得第42页
     ·膀胱癌组织 DNA 的提取第42-43页
     ·CCK-8 法检测肿瘤细胞的增生第43页
     ·酚氯仿抽提血浆循环 DNA 的方法第43-44页
     ·尿沉渣 DNA 的提取方法第44页
     ·ZR Genomic DNA II Kit 提取血浆循环 DNA 的方法第44-45页
     ·RNA 的提取和 RT-PCR第45-46页
     ·DNA 的亚硫酸盐处理第46-48页
     ·细胞凋亡形态学检测第48页
     ·甲基化指数的计算第48页
     ·Caspase-2 和 Caspase-9 的检测第48-49页
     ·BCA 法蛋白浓度的测定第49-50页
     ·统计学分析第50-51页
第2章 论文主体第51-76页
   ·膀胱癌肿瘤组织的抑癌基因甲基化状态分析第51-60页
     ·研究对象的基本资料第51-52页
     ·膀胱癌肿瘤组织的抑癌基因甲基化状态分析第52-54页
     ·膀胱癌肿瘤组织的抑癌基因甲基化状态与患者性别关系分析第54-55页
     ·膀胱癌肿瘤组织的抑癌基因甲基化状态与患者年龄关系分析第55-57页
     ·膀胱癌肿瘤组织的抑癌基因甲基化状态与患者病理分级关系分析第57-58页
     ·抑癌基因甲基化与浸润程度关联分析第58页
     ·不同抑癌基因在不同级别 BTCC 中的同时甲基化比率分析第58-60页
     ·MSP 实验的敏感性研究第60页
   ·膀胱癌尿沉渣细胞的抑癌基因甲基化状态分析第60-63页
     ·尿沉渣细胞 DNA 提取方法的建立第60-61页
     ·膀胱癌患者尿沉渣细胞抑癌基因的甲基化状态分析第61-63页
   ·膀胱癌血浆循环 DNA 的抑癌基因甲基化状态分析第63-65页
     ·正常人与膀胱癌患者的外周血循环 DNA 含量的比较第63-64页
     ·几种血浆循环 DNA 提取方法的比较第64页
     ·膀胱癌患者外周血循环 DNA 抑癌基因的甲基化状态分析第64-65页
   ·铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)和普鲁卡因(PROCAINE)对T24 和 5637 膀胱癌细胞的抑制增生机制研究第65-76页
     ·PA-MSHA 和 Procaine 对 T24 和 5637 细胞增生的抑制作用第65-69页
     ·PA-MSHA 和 Procaine 诱导 T24 和 5637 膀胱癌细胞凋亡第69页
     ·5637 和 T24 细胞的抑癌基因甲基化状态鉴定第69-70页
     ·Procaine 对 T24 或 5637 细胞抑癌基因甲基化状态的作用分析第70-73页
     ·PA-MSHA 对 T24 和 5637 细胞抑癌基因甲基化状态的作用分析第73页
     ·PA-MSHA 与 Procaine 诱导的 T24 和 5637 膀胱癌细胞凋亡与 Caspase -3/9的表达关系第73-74页
     ·T24 和 5637 膀胱癌细胞的 EGFR/MMP-9/sFASL mRNA 表达鉴定第74-76页
第3章 讨论第76-86页
   ·良好的生物样本保存是本研究顺利开展的基础第76页
   ·MSP 实验的影响因素及方法学优化第76-77页
   ·建立抑癌基因甲基化标志物的必要性第77-81页
   ·尿沉渣细胞和血浆循环 DNA 甲基化变异的研究第81-83页
   ·PA-MSHA 抗肿瘤作用机制探讨第83-84页
   ·PROCAINE 抗肿瘤的作用机制探讨第84-86页
第4章 结论第86-88页
参考文献第88-100页
创新点第100-101页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第101-102页
致谢第102页

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