| 目录 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-15页 |
| ABSTRACT | 第15-20页 |
| 缩略语表 | 第20-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-47页 |
| 第一节 蚂蟥、水蛭研究概述 | 第21-34页 |
| 1 历史文献考证 | 第21页 |
| 2 现代研究 | 第21-22页 |
| 3 资源分布及分类 | 第22-23页 |
| 4 药理研究 | 第23-28页 |
| ·抗凝血作用 | 第23-24页 |
| ·抗血栓作用 | 第24页 |
| ·对心、脑血管系统的改善作用 | 第24-25页 |
| ·对血液流变学及造血功能的的影响 | 第25-26页 |
| ·抗炎作用 | 第26页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第26页 |
| ·降血脂作用 | 第26-27页 |
| ·抗早孕作用 | 第27页 |
| ·保肾作用 | 第27页 |
| ·抗增殖作用 | 第27-28页 |
| ·对眼科疾病的治疗作用 | 第28页 |
| 5 毒副作用 | 第28页 |
| 6 临床应用 | 第28-31页 |
| ·治疗心、脑血管疾病 | 第28-29页 |
| ·治疗呼吸系统疾病 | 第29页 |
| ·治疗肾病 | 第29-30页 |
| ·骨伤科临床中的应用 | 第30页 |
| ·治疗妇科及男性泌尿系统疾病 | 第30-31页 |
| 7 炮制研究 | 第31-34页 |
| ·古代炮制历史文献考证 | 第31-32页 |
| ·现代炮制方法 | 第32-34页 |
| 第二节 DNA分子标记在水生动物遗传研究中的应用 | 第34-40页 |
| 1 分子遗传标记技术概述 | 第34-35页 |
| 2 分子遗传标记技术在水产动物遗传研究中的应用 | 第35-40页 |
| ·RFLP标记技术 | 第35页 |
| ·RAPD标记技术 | 第35-36页 |
| ·AFLP标记技术 | 第36页 |
| ·微卫星(SSR)分子标记 | 第36-38页 |
| ·ISSR分子标记 | 第38页 |
| ·SRAP分子标记 | 第38页 |
| ·DNA测序技术 | 第38-40页 |
| 第三节 微卫星及其开发策略 | 第40-47页 |
| 1 微卫星概况 | 第40-41页 |
| ·微卫星的分类与命名 | 第40页 |
| ·微卫星的丰度 | 第40页 |
| ·微卫星引物及保守性 | 第40-41页 |
| 2 SSR开发研究进展 | 第41-47页 |
| ·从数据库或有关文章直接查询本物种引物 | 第41页 |
| ·从相近物种获得微卫星引物 | 第41-42页 |
| ·采取富集步骤的SSR标记开发策略 | 第42-44页 |
| ·省略筛库法 | 第44-45页 |
| ·从EST中发展SSR标记 | 第45-47页 |
| 第二章 蚂蟥生长繁殖习性及药材质量评价研究 | 第47-81页 |
| 第一节 蚂蟥内脏器官和皮肤的组织结构观察 | 第47-51页 |
| 1 材料与方法 | 第47-48页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-49页 |
| ·消化系统 | 第48页 |
| ·生殖系统 | 第48-49页 |
| ·蚂蟥皮肤中黏液细胞的类型 | 第49页 |
| ·不同黏液细胞的分布 | 第49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| ·制片过程总结 | 第49页 |
| ·对组织结构的讨论 | 第49页 |
| ·皮肤的作用 | 第49-50页 |
| ·蚂蟥皮肤及结构的形态 | 第50页 |
| ·蛭类与鱼类黏液细胞的比较 | 第50-51页 |
| 第二节 蚂蟥耗氧率与窒息点研究 | 第51-57页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-55页 |
| ·不同水温条件蚂蟥的耗氧率和耗氧量 | 第53页 |
| ·不同体重的蚂蟥的耗氧率和耗氧量 | 第53-54页 |
| ·25℃条件下蚂蟥昼夜耗氧率的变化 | 第54页 |
| ·不同水温条件蚂蟥的窒息点 | 第54页 |
| ·不同体重条件蚂蟥的窒息点 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| ·不同水温对蚂蟥耗氧率的影响 | 第55页 |
| ·25℃条件下蚂蟥耗氧率的昼夜变化 | 第55-56页 |
| ·20℃条件下体重对蚂蟥耗氧率及耗氧量的影响 | 第56页 |
| ·蚂蟥临界窒息点与水温、体重的关系 | 第56-57页 |
| 第三节 温度对蚂蟥生长及摄食规律影响的研究 | 第57-61页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·蚂蟥摄食规律的研究 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-59页 |
| ·温度对蚂蟥生长的影响 | 第58页 |
| ·蚂蟥饱食量及摄食率的研究 | 第58-59页 |
| ·蚂蟥摄食规律的研究 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| ·温度对蚂蟥摄食的影响 | 第59页 |
| ·体重大小对饱食量和摄食率的影响 | 第59-60页 |
| ·体重大小对饱食量和摄食率的影响 | 第60页 |
| ·蚂蟥摄食时间和饱食量在生产中的意义 | 第60-61页 |
| 第四节 温度和体重对蚂蟥人工繁殖影响的研究 | 第61-65页 |
| 1 材料与方法 | 第61-62页 |
| ·实验材料 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-64页 |
| ·温度对蚂蟥产卵及产卵后体重变化的影响 | 第62页 |
| ·体重对蚂蟥产卵及产卵后体重变化的影响 | 第62-63页 |
| ·卵重与孵化的关系 | 第63页 |
| ·温度对孵化的影响 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-65页 |
| ·温度对产卵量的影响 | 第64页 |
| ·体重对产卵量的影响 | 第64页 |
| ·温度对孵化的影响 | 第64页 |
| ·卵重与孵化的关系 | 第64页 |
| ·温度与体重对蚂蟥产卵后体重的影响 | 第64-65页 |
| 第五节 蚂蟥及其养殖基地农药与重金属残留分析 | 第65-69页 |
| 1 材料与方法 | 第65-66页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-68页 |
| ·农药残留含量比较 | 第66-67页 |
| ·重金属残留量比较 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| ·基地环境和药材的安全性 | 第68页 |
| ·土壤、养殖用水的有机氯对药材农药残留的影响 | 第68页 |
| ·土壤、灌溉用水的重金属残留对药材污染情况 | 第68-69页 |
| 第六节 野生和人工养殖蚂蟥不同炮制品内在质量的比较研究 | 第69-75页 |
| 1 材料和方法 | 第69-71页 |
| ·材料 | 第69-70页 |
| ·方法 | 第70-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-73页 |
| ·野生和人工养殖蚂蟥不同炮制品中水分、灰分、浸出物含量和抗凝血酶活性的比较 | 第71-73页 |
| ·炮制方法对野生、养殖蚂蟥无机元素含量的影响 | 第73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| ·野生和人工养殖蚂蟥内在质量的比较 | 第73页 |
| ·不同炮制方法对野生和人工养殖蚂蟥内在质量影响的比较 | 第73-75页 |
| 第七节 不同种群蚂蟥内在质量的比较 | 第75-81页 |
| 1 材料与方法 | 第75-77页 |
| ·材料 | 第75页 |
| ·方法 | 第75-77页 |
| 2 结果 | 第77-79页 |
| ·不同种群蚂蟥水分、醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、抗凝血酶活性比较 | 第77-78页 |
| ·黄嘌呤、次黄嘌呤线性范围考察 | 第78页 |
| ·精密度实验 | 第78-79页 |
| ·黄嘌呤、次黄嘌呤含量的测定 | 第79页 |
| 3 分析与讨论 | 第79-81页 |
| ·醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分含量及抗凝血酶活性分析 | 第79-80页 |
| ·黄嘌呤、次黄嘌呤分析 | 第80-81页 |
| 第三章 蚂蟥遗传多样性分子标记 | 第81-127页 |
| 第一节 基于RAPD分子标记的蚂蟥遗传多样性分析 | 第81-93页 |
| 1 材料和方法 | 第81-86页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·方法 | 第82-85页 |
| ·数据统计分析 | 第85-86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-91页 |
| ·总DNA电泳结果 | 第86页 |
| ·RAPD反应体系及引物确立 | 第86-87页 |
| ·种群和物种水平遗传多样性 | 第87-88页 |
| ·种群和物种水平遗传多样性 | 第88页 |
| ·聚类分析 | 第88页 |
| ·主坐标分析 | 第88-91页 |
| 3 讨论 | 第91-93页 |
| ·种群和物种水平遗传多样性 | 第91-92页 |
| ·种群遗传分化 | 第92页 |
| ·主坐标分析 | 第92-93页 |
| 第二节 基于ISSR分子标记的蚂蟥遗传多样性分析 | 第93-101页 |
| 1 材料与方法 | 第93-94页 |
| ·材料 | 第93页 |
| ·方法 | 第93-94页 |
| ·数据统计分析 | 第94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-98页 |
| ·ISSR反应体系及引物确立 | 第94页 |
| ·种群和物种水平遗传多样性 | 第94-96页 |
| ·种群间遗传分化程度比较分析 | 第96页 |
| ·聚类分析 | 第96-98页 |
| ·主坐标分析 | 第98页 |
| 3 讨论 | 第98-101页 |
| ·蚂蟥的遗传多样性 | 第98-99页 |
| ·蚂蟥种群遗传分化 | 第99页 |
| ·蚂蟥种群聚类分析 | 第99-101页 |
| 第三节 基于SRAP分子标记的蚂蟥遗传多样性分析 | 第101-109页 |
| 1 材料与方法 | 第101-103页 |
| ·材料 | 第101-102页 |
| ·方法 | 第102-103页 |
| ·数据统计分析 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-108页 |
| ·SRAP反应体系及引物确立 | 第103-104页 |
| ·种群和物种水平遗传多样性 | 第104-105页 |
| ·种群间遗传分化程度比较分析 | 第105-106页 |
| ·聚类分析 | 第106-107页 |
| ·主坐标分析 | 第107-108页 |
| 3 讨论 | 第108-109页 |
| ·蚂蟥种群遗传结构及遗传变异分析 | 第108页 |
| ·蚂蟥种群遗传分化 | 第108页 |
| ·蚂蟥种群聚类分析 | 第108-109页 |
| 第四节 RAPD、ISSR与SRAP数据综合分析 | 第109-115页 |
| 1 材料和方法 | 第109-110页 |
| ·数据来源 | 第109-110页 |
| ·数据处理及分析方法 | 第110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-113页 |
| ·RAPD标记、TSSR标记和SRAP标记相关性分析 | 第110-111页 |
| ·RAPD标记、ISSR标记和SRAP标记比较分析 | 第111-112页 |
| ·聚类分析 | 第112-113页 |
| 3 讨论 | 第113-115页 |
| ·RAPD、ISSR和SRAP标记效率 | 第113页 |
| ·种群聚类分析 | 第113-115页 |
| 第五节 蚂蟥ITS测序分析 | 第115-127页 |
| 1 材料和方法 | 第115-116页 |
| ·材料 | 第115-116页 |
| ·方法 | 第116页 |
| 2 结果与分析 | 第116-124页 |
| ·序列测定结果 | 第116-122页 |
| ·蚂蟥ITS长度和碱基频率分析 | 第122-123页 |
| ·ITS碱基序列的差异分析 | 第123-124页 |
| ·重建系统树 | 第124页 |
| ·ITS序列变异与地理分布关系 | 第124页 |
| 3 讨论 | 第124-127页 |
| ·ITS序列鉴别蚂蟥 | 第124-125页 |
| ·蚂蟥ITS序列变异与同步进化 | 第125页 |
| ·蚂蟥资源保护利用策略 | 第125-127页 |
| 第四章 蚂蟥微卫星序列的开发 | 第127-149页 |
| 第一节 磁珠富集法开发蚂蟥微卫星序列 | 第127-137页 |
| 1 材料与方法 | 第128-132页 |
| ·材料 | 第128页 |
| ·方法 | 第128-132页 |
| 2 结果 | 第132-136页 |
| ·蚂蟥总DNA提取结果 | 第132页 |
| ·SSR序列的获得 | 第132-135页 |
| ·克隆测序结果分析 | 第135-136页 |
| 3 分析与讨论 | 第136-137页 |
| 第二节 SAM改良法开发蚂蟥微卫星序列 | 第137-143页 |
| 1 材料与方法 | 第137-139页 |
| ·材料 | 第137-138页 |
| ·方法 | 第138-139页 |
| 2 结果 | 第139-142页 |
| ·SAM抑制性扩增 | 第139页 |
| ·PCR产物克隆转化 | 第139页 |
| ·菌液PCR扩增检测 | 第139-140页 |
| ·克隆测序结果分析 | 第140-142页 |
| 3 分析与讨论 | 第142-143页 |
| ·限制性内切酶的选择与接头引物设计 | 第142页 |
| ·改进SAM法开发SSR原理 | 第142页 |
| ·改进SAM法开发SSR的效率 | 第142-143页 |
| 第三节 蚂蟥微卫星序列信息分析及引物设计与验证 | 第143-149页 |
| 1 材料与方法 | 第143-144页 |
| ·序列来源 | 第143页 |
| ·方法 | 第143-144页 |
| 2 结果与分析 | 第144-147页 |
| ·SSR发生的特点 | 第144页 |
| ·蚂蟥SSR引物设计 | 第144页 |
| ·蚂蟥SSR引物多态性检测 | 第144-147页 |
| 3 讨论 | 第147-149页 |
| 全文结论 | 第149-151页 |
| 论文创新点及不足之处 | 第151-153页 |
| 参考文献 | 第153-173页 |
| 附录 | 第173-175页 |
| 登录Genebank的部分序列 | 第173-175页 |
| (1) ITS序列EU622928 | 第173-174页 |
| (2) 微卫星序列EU547725 | 第174-175页 |
| 图版说明 | 第175-176页 |
| Plate Description | 第176-177页 |
| 图版 | 第177-181页 |
| 发表论文 | 第181-183页 |
| 致谢 | 第183页 |
