| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-23页 |
| ·外来生物入侵机制研究进展 | 第15-18页 |
| ·外来生物入侵机制的探询:从宏观到微观 | 第15-16页 |
| ·入侵生物抗逆适应机制的研究现状 | 第16-17页 |
| ·紫茎泽兰入侵机制 | 第17-18页 |
| ·转录因子CBF在植物抗寒适应性研究中的重要意义 | 第18-21页 |
| ·植物低温胁迫应答基因 | 第18页 |
| ·CRT作用元件的发现以及CBF编码基因的克隆 | 第18-19页 |
| ·ICE-CBF调控途径及其在植物低温驯化中的作用 | 第19-20页 |
| ·多种环境胁迫信号转导的串话现象 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 低温应答转录因子的克隆 | 第23-36页 |
| ·供试材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-30页 |
| ·CTAB法提取紫茎泽兰基因组DNA(小量) | 第24-25页 |
| ·设计简并引物PCR获得CBFs核心区 | 第25页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·转化测序 | 第25-26页 |
| ·RACE原理 | 第26页 |
| ·总RNA提取 | 第26-27页 |
| ·3’端RACE | 第27页 |
| ·5’端RACE | 第27-30页 |
| ·基因全长的拼接和测通 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-35页 |
| ·紫茎泽兰EaCBF1基因核心区克隆 | 第30-31页 |
| ·紫茎泽兰CBFs基因核心区序列分析 | 第31-33页 |
| ·片段CBFd的全长克隆 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 紫茎泽兰家族成员数检测 | 第36-41页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·CTAB法提紫茎泽兰基因组DNA(大量) | 第36-37页 |
| ·酶切、电泳 | 第37页 |
| ·DNA的印迹转移 | 第37-38页 |
| ·预杂交 | 第38页 |
| ·探针DNA的放射性标记 | 第38页 |
| ·杂交 | 第38-39页 |
| ·洗膜 | 第39页 |
| ·显影原理 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 紫茎泽兰EACBF1表达及功能分析 | 第41-51页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·供试材料 | 第41-42页 |
| ·供试菌株和植物 | 第42页 |
| ·仪器设备 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·内参基因actin的克隆 | 第42页 |
| ·模板定量 | 第42页 |
| ·P2301-T-4A重组载体的构建 | 第42-43页 |
| ·P2301-T-4A-CBF植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·电击转化农杆菌LBA4404 | 第44页 |
| ·盘法转化野生型烟草 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·不同环境胁迫对EaCBF1表达量的影响 | 第45-46页 |
| ·表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·植物表达载体的鉴定 | 第48页 |
| ·重组载体的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·转基因植株的筛选及生理检测 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 不同地理种群单核苷酸多态性分析 | 第51-56页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·样品采集信息 | 第51-52页 |
| ·等位基因单核苷酸多态性的获得 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第六章 结论与展望 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第56页 |
| ·本研究的创新点 | 第56-57页 |
| ·展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 1 培养基配方 | 第65-66页 |
| 2 缓冲液 | 第66页 |
| 3 SOUTHERN杂交所用试剂 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简介 | 第70页 |