| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| 犬瘟热及其诊断方法研究现状 | 第12-25页 |
| 1 犬瘟热概述 | 第12-18页 |
| ·犬瘟热简介 | 第12页 |
| ·宿主范围 | 第12页 |
| ·流行病学 | 第12-13页 |
| ·CDV及其基因组结构 | 第13-14页 |
| ·主要蛋白 | 第14-16页 |
| ·临床症状 | 第16-17页 |
| ·致病机制 | 第17页 |
| ·抗原变异性 | 第17-18页 |
| 2 CDV诊断方法发展现状 | 第18-25页 |
| ·病毒的分离培养 | 第18-19页 |
| ·电镜诊断 | 第19页 |
| ·包涵体检查 | 第19-20页 |
| ·脑脊液的检查 | 第20页 |
| ·抗原检测 | 第20-21页 |
| ·抗体检测 | 第21-22页 |
| ·分子诊断学技术 | 第22-24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 鉴别犬瘟热病毒强毒株和弱毒株的复合RT-nPCR方法的建立及初步应用 | 第25-44页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第25页 |
| ·病毒 | 第25页 |
| ·待检病料 | 第25页 |
| ·细胞与SPF鸡胚 | 第25-26页 |
| ·质粒和菌株 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-32页 |
| ·鉴别CDV强、弱毒株的复合RT-nPCR诊断方法的建立 | 第26-29页 |
| ·强、弱毒鉴别诊断引物的选择 | 第26页 |
| ·Onderstepoort株增殖和现地分离株的分离、增殖 | 第26-27页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第27页 |
| ·反转录 | 第27-28页 |
| ·PCR | 第28页 |
| ·特异性试验 | 第28页 |
| ·敏感性试验 | 第28页 |
| ·重复性试验 | 第28-29页 |
| ·H基因种系发生分析 | 第29-32页 |
| ·H基因扩增引物的选择 | 第29页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第29页 |
| ·反转录 | 第29页 |
| ·PCR | 第29页 |
| ·PCR产物的回收 | 第29-30页 |
| ·目的基因DNA产物的连接与转化 | 第30页 |
| ·阳性重组质粒的筛选 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的PCR鉴定和纯化 | 第31页 |
| ·质粒DNA的测序 | 第31页 |
| ·H基因的序列比对分析 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-42页 |
| ·复合RT-nPCR方法的建立 | 第32-37页 |
| ·第一步反应条件的确定 | 第32页 |
| ·第二步反应条件的确定 | 第32-34页 |
| ·特异性 | 第34-35页 |
| ·敏感性 | 第35页 |
| ·重复性 | 第35页 |
| ·疑似CD病料的检测 | 第35-37页 |
| ·H基因的序列分析 | 第37-41页 |
| ·病毒RNA的RT-PCR产物电泳鉴定结果 | 第37页 |
| ·质粒DNA的PCR鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·H基因序列比较分析 | 第38-41页 |
| ·现地病料的RT-nPCR检测 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·鉴别诊断方法的建立 | 第42-43页 |
| ·H基因进化分析 | 第43-44页 |
| 第三章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 附录 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
