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番茄MBF1转录辅激活因子基因的克隆表达分析及遗传转化

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
缩略词表第9-11页
1 绪论第11-21页
   ·引言第11页
   ·植物逆境反应的生理基础第11-12页
     ·植物的抗逆性第11-12页
     ·植物在一般逆境下的生理变化第12页
   ·植物逆境应答的分子机制第12-14页
     ·植物对逆境的应答第12-13页
     ·植物逆境的信号转导与调控因子第13页
     ·顺式调控原件第13-14页
     ·转录因子(反式作用因子)第14页
   ·核受体转录辅激活因子第14-18页
     ·核受体第14-15页
     ·转录辅激活因子的结构第15页
     ·转录辅激活因子的作用机制第15-17页
     ·核受体辅调节因子促进基因表达第17页
     ·MBF1(Multiprotein Bridging Factor 1)基因的研究进展第17-18页
   ·研究的目的及意义第18-19页
   ·研究的主要内容第19页
   ·技术路线第19-20页
     ·番茄LeMBF1 基因的克隆及表达模式的研究第19页
     ·LeMBF1 超表达载体的构建第19-20页
     ·番茄的转化第20页
   ·本论文的创新点第20-21页
2 番茄MBF1 基因的克隆第21-36页
   ·材料与试剂第21-23页
     ·植物材料、质粒、菌株、试剂第21页
     ·主要仪器设备第21页
     ·常用试剂配制第21-23页
   ·实验方法第23-28页
     ·番茄总RNA 的提取第23页
     ·核酸质量及浓度测定第23页
     ·克隆番茄LeMBF1 基因全长第23-28页
   ·结果与分析第28-34页
     ·普通番茄总RNA 的提取第28-29页
     ·MBF1 基因的克隆第29-34页
   ·讨论第34-36页
3 番茄 LeMBF1 基因的表达模式研究第36-43页
   ·材料与试剂第36-37页
     ·植物材料第36页
     ·主要仪器设备第36页
     ·主要化学试剂和试剂盒第36页
     ·试剂的配置第36-37页
   ·实验方法第37-39页
     ·番茄果实的采集第37页
     ·环境胁迫和乙烯处理番茄植株第37-38页
     ·总RNA 的制备第38页
     ·Northern 杂交第38-39页
   ·结果与分析第39-41页
     ·不同温度对番茄LeMBF1 基因表达的影响第39-40页
     ·干旱、复水对番茄LeMBF1 基因表达的影响第40页
     ·伤害对WT、Nr 和rin 番茄叶中MBF1 基因表达的影响第40-41页
     ·乙烯对番茄MBF1 基因表达的影响第41页
   ·讨论第41-43页
4 番茄 LeMBF1 超表达载体的构建、转化与鉴定第43-58页
   ·材料与试剂第43-45页
     ·植物材料、质粒、菌株第43页
     ·主要仪器设备第43页
     ·主要化学试剂和试剂盒第43页
     ·实验所用试剂的配制第43-45页
   ·实验方法第45-50页
     ·质粒 DNA 的制备第45-46页
     ·MBF1 基因重组到过渡载体pDH51第46-47页
     ·植物表达载体的构建第47-48页
     ·番茄的遗传转化第48-49页
     ·农杆菌介导的番茄转化第49-50页
   ·结果与分析第50-57页
     ·LeMBF1 基因构建到过渡载体pDH51 上的PCR 鉴定及酶切鉴定第52-53页
     ·植物表达载体的构建与鉴定第53-54页
     ·番茄的遗传转化第54-57页
   ·讨论第57-58页
5 结论与展望第58-59页
   ·主要结论第58页
   ·后续研究工作的展望第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-64页
附录第64页

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