中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-61页 |
1.植物耐盐研究现状 | 第18-51页 |
·盐胁迫对植物的影响 | 第19-22页 |
·植物对盐胁迫的适应机理 | 第22-51页 |
2.基因芯片技术及其在植物耐逆研究方面的应用 | 第51-58页 |
·基因芯片种类 | 第52页 |
·基因芯片技术:芯片制备、样品制备、杂交反应和信号检测和结果分析 | 第52-53页 |
·基因芯片技术在植物耐盐研究中的应用 | 第53-58页 |
3.立题依据与研究内容 | 第58-61页 |
·本论文立题依据 | 第58-60页 |
·研究内容 | 第60-61页 |
第二章 利用Affymetrix小麦基因芯片分析小麦盐胁迫诱导的基因表达谱 | 第61-106页 |
1.实验材料 | 第62-63页 |
·植物材料 | 第62页 |
·材料种植 | 第62页 |
·取样方法 | 第62-63页 |
2.实验方法 | 第63-70页 |
·RNA提取和纯化 | 第63-65页 |
·cDNA的合成和纯化 | 第65-66页 |
·cRNA的合成和纯化 | 第66-68页 |
·cRNA的片段化及杂交液的配制 | 第68页 |
·芯片杂交、洗脱、染色及扫描 | 第68-69页 |
·芯片杂交的数据分析 | 第69-70页 |
3.结果与讨论 | 第70-104页 |
·盐处理下的表型差异 | 第70-71页 |
·芯片质量监控和杂交结果初步分析 | 第71-74页 |
·山融3号和济南177差异表达探针的分析 | 第74-78页 |
·差异表达探针的功能注释以及分类 | 第78-100页 |
·部分探针的染色体定位 | 第100-104页 |
4.小结 | 第104-106页 |
第三章 小麦耐盐体细胞杂种渐渗系山融3号耐盐相关基因研究 | 第106-170页 |
一 材料和方法 | 第106-129页 |
1.植物材料 | 第106页 |
2.实验方法 | 第106-129页 |
·植物总RNA的提取 | 第106页 |
·逆转录合成cDNA | 第106页 |
·差异cDNA片段的克隆和序列测定 | 第106-111页 |
·末端快速扩增(RACE)和全长cDNA的获得 | 第111-114页 |
·开放阅读框的克隆和序列测定 | 第114页 |
·基因组序列的扩增 | 第114-115页 |
·基因表达分析(RT-PCR和real-time2PCR) | 第115-117页 |
·原核表达分析 | 第117-121页 |
·组织原位杂交 | 第121页 |
·酵母功能互补试验 | 第121-125页 |
·植物表达载体构建(Ubi/35S启动子) | 第125-126页 |
·农杆菌感受态的制备与转化 | 第126-127页 |
·转基因功能验证—拟南芥转化及筛选 | 第127-128页 |
·生长点转化小麦山融3号及转基因植株分析 | 第128-129页 |
二 结果与分析 | 第129-170页 |
(一)小麦耐盐相关基因TaCHP的全长cDNA克隆及初步的功能分析 | 第129-145页 |
·基因芯片中TaCHP信息的分析和表达验证 | 第129-132页 |
·小麦TaCHP基因的cDNA克隆与序列分析 | 第132-135页 |
·TaCHP基因表达分析 | 第135-137页 |
·原核表达 | 第137-139页 |
·植物表达载体构建 | 第139-140页 |
·拟南芥转化及表型分析 | 第140-142页 |
·小麦的遗传转化和转基因株系的初步鉴定 | 第142-143页 |
·讨论 | 第143-145页 |
(二)小麦中耐盐相关的蛋白酶抑制剂基因TaWRSI5的表达分析 | 第145-155页 |
·基因芯片中TaWRSI5探针杂交信息的分析 | 第145-147页 |
·TaWSRI5基因的cDNA克隆与序列分析 | 第147-150页 |
·小麦中WRSI5基因的表达分析 | 第150-152页 |
·TaWRSI5的体外蛋白酶抑制活性检测 | 第152页 |
·TaWRSI5转基因拟南芥株系的表型分析 | 第152-153页 |
·讨论 | 第153-155页 |
(三)小麦耐盐相关基因TaSKC1的克隆及初步功能分析 | 第155-170页 |
·小麦TaSKC1基因的cDNA全长克隆及序列分析 | 第156-161页 |
·TaSKC1基因表达分析 | 第161-162页 |
·酵母突变菌株的互补试验 | 第162-167页 |
·植物表达载体pUN330/TaSKC1的构建及小麦转化 | 第167-168页 |
·讨论 | 第168-170页 |
总结 | 第170-172页 |
附表 | 第172-175页 |
参考文献 | 第175-187页 |
博士研究生在读期间发表论文情况 | 第187页 |
博士研究生在读期间荣获奖励情况 | 第187页 |
研究生在读期间参与科研项目情况 | 第187-188页 |
致谢 | 第188-189页 |
发表论文 | 第189-206页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第206页 |