| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-27页 |
| ·家畜遗传多样性 | 第9-10页 |
| ·家畜遗传多样性概述 | 第9-10页 |
| ·家畜遗传多样性的意义 | 第10页 |
| ·遗传多样性的研究方法 | 第10-17页 |
| ·形态学水平 | 第10-11页 |
| ·染色体水平 | 第11页 |
| ·生理生化水平 | 第11-12页 |
| ·分子水平 | 第12-17页 |
| ·基于传统的Southern杂交技术的分子标记 | 第13页 |
| ·基于PCR(Polymerase Chain Reaction)的分子标记 | 第13-15页 |
| ·重复顺序标记 | 第15-17页 |
| ·中国牛亚科家畜遗传资源 | 第17-18页 |
| ·牛的分类 | 第17页 |
| ·中国牛亚科家畜遗传资源及面临的威胁 | 第17-18页 |
| ·我国不同种属牛遗传多样性的研究进展 | 第18-23页 |
| ·黄牛遗传多样性研究 | 第18-19页 |
| ·我国地方黄牛遗传资源 | 第18页 |
| ·我国地方黄牛的遗传多样性研究进展 | 第18-19页 |
| ·水牛遗传多样性研究 | 第19-21页 |
| ·我国水牛的类型和特征 | 第19页 |
| ·我国水牛遗传特性的研究进展 | 第19-21页 |
| ·牦牛遗传多样性研究 | 第21-23页 |
| ·我国的牦牛资源及价值 | 第21页 |
| ·我国牦牛的遗传多样性研究进展 | 第21-23页 |
| ·动物乳腺生物反应器 | 第23-25页 |
| ·乳腺生物反应器 | 第23页 |
| ·影响外源基因在乳腺中高效表达的因素 | 第23-24页 |
| ·α-乳清蛋白的研究现状 | 第24-25页 |
| ·本实验室的研究方法及前期研究 | 第25-27页 |
| ·本实验研究方法的确立 | 第25-26页 |
| ·本实验室前期研究 | 第26-27页 |
| 第二章 材料和方法 | 第27-36页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·肌肉组织样品的采集 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·菌株及酶类 | 第27-28页 |
| ·培养基的配置 | 第28页 |
| ·主要缓冲液及试剂的配置 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·水牛基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·牛α-乳清蛋白基因的PCR扩增 | 第29-31页 |
| ·特异性引物的设计 | 第29-30页 |
| ·PCR反应体系 | 第30页 |
| ·PCR循环程序 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·目的片段的回收 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的连接、转化和筛选 | 第32-34页 |
| ·克隆用载体——pMD18-T Vector | 第32-33页 |
| ·PCR纯化回收和载体的连接 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第34页 |
| ·重组质粒的快速鉴定——Cracking法 | 第34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第34-35页 |
| ·质粒DNA的电泳及酶切鉴定 | 第35页 |
| ·DNA的序列测定 | 第35-36页 |
| 第三章 结果和分析 | 第36-41页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第36页 |
| ·PCR扩增结果 | 第36-37页 |
| ·质粒提取结果 | 第37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·水牛α-LA基因核苷酸序列及预测的氨基酸序列 | 第38-40页 |
| ·水牛α-LA基因5′侧翼区序列 | 第40-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-46页 |
| ·关于基因组DNA的完整性与PCR扩增结果 | 第41页 |
| ·关于引物的设计 | 第41-43页 |
| ·关于重组质粒的筛选 | 第43-44页 |
| ·关于Nde Ⅰ位点的突变 | 第44页 |
| ·不同种属牛α-LA基因核苷酸序列同源性 | 第44-45页 |
| ·关于水牛和奶牛α-LA基因5′侧翼区序列的比较 | 第45-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者在读期间发表的相关论文 | 第53-56页 |
| 附图 | 第56页 |