| 英文缩略词表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1. 引言 | 第13-26页 |
| ·发病历史回顾 | 第13-14页 |
| ·病原学 | 第14-15页 |
| ·病原类属 | 第14页 |
| ·病毒结构特点和生物学活性 | 第14-15页 |
| ·病毒的增殖特性 | 第15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·致病机制及临床表现 | 第16-19页 |
| ·致病机制 | 第16-17页 |
| ·临床症状 | 第17-18页 |
| ·剖检病变 | 第18页 |
| ·显微病变 | 第18-19页 |
| ·分子生物学 | 第19-21页 |
| ·病毒基因组结构 | 第19页 |
| ·结构蛋白 | 第19-20页 |
| ·病毒的异质性 | 第20页 |
| ·病毒的致弱 | 第20-21页 |
| ·病毒的变异 | 第21页 |
| ·免疫学 | 第21-25页 |
| ·免疫机理 | 第21-22页 |
| ·免疫抑制 | 第22-23页 |
| ·抗体依赖性增强作用 | 第23-24页 |
| ·疫苗免疫 | 第24-25页 |
| ·免疫网络学说 | 第25-26页 |
| 2. 材料与方法 | 第26-45页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·试验所用溶液及配制 | 第27-30页 |
| ·细胞培养用溶液及配制 | 第27页 |
| ·基因克隆与表达用溶液及配制 | 第27-28页 |
| ·镍柱蛋白纯化所用溶液及配制 | 第28-29页 |
| ·I-ELISA 用溶液及配制 | 第29页 |
| ·IFA 用溶液及配制 | 第29-30页 |
| ·腹水制备所用溶液及配制 | 第30页 |
| ·蛋白复性所用溶液及配制 | 第30页 |
| ·主要设备及仪器 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-45页 |
| ·细胞的传代及培养 | 第31页 |
| ·抗独特型抗体轻重链可变区基因的克隆测序 | 第31-36页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·引物的设计与合成 | 第32页 |
| ·抗体轻、重链可变区基因的RT-PCR 扩增 | 第32-34页 |
| ·抗体轻、重链可变区基因的PCR 产物的胶回收与纯化 | 第34页 |
| ·抗体轻、重链可变区基因PCR产物与T载体的连接 | 第34页 |
| ·氯化钙法制备新鲜的 E.coli 感受态细胞(Top10/ Rosetta) | 第34-35页 |
| ·PMD-VL、PMD-VH 转化 Top10 感受态细胞 | 第35页 |
| ·PMD-VL、PMD-VH 质粒的提取 | 第35-36页 |
| ·PMD-VL、PMD-VH 质粒的PCR 鉴定及测序分析 | 第36页 |
| ·抗独特型单链抗体原核表达质粒的构建及表达 | 第36-40页 |
| ·引物的设计与合成 | 第36页 |
| ·抗独特型单链抗体片段的扩增 | 第36-37页 |
| ·抗独特型单链抗体 PCR 产物的连接转化 | 第37-38页 |
| ·抗独特型单链抗体重组质粒的提取 | 第38页 |
| ·抗独特型单链抗体重组质粒的鉴定及测序 | 第38页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白 SDS-PAGE 蛋白质电泳分析 | 第39-40页 |
| ·抗独特型单链抗体的纯化、复性及鉴定 | 第40-42页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的复性 | 第41-42页 |
| ·抗独特型单链抗体的鉴定 | 第42-43页 |
| ·IFA 鉴定复性scFv 蛋白的活性 | 第42页 |
| ·Western-blot 鉴定复性scFv 的活性 | 第42-43页 |
| ·兔源 Mab2-5G2、Mab-HEV 抗体的制备 | 第43-45页 |
| ·Mab2-5G2 和Mab-HEV 腹水的制备 | 第43页 |
| ·Mab2-5G2 和Mab-HEV 腹水的纯化 | 第43-44页 |
| ·纯化后 Mab2-5G2 和 Mab-HEV 抗体的鉴定 | 第44页 |
| ·兔子的免疫 | 第44-45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·VH和VL基因的克隆测序 | 第45-47页 |
| ·PCR 扩增可变区基因 | 第45-46页 |
| ·VH 和VL 基因的胶回收 | 第46页 |
| ·VH 和VL 重组质粒鉴定 | 第46-47页 |
| ·scFv 重叠PCR 扩增及其原核重组表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·PCR 扩增可变区基因 | 第47页 |
| ·原核重组质粒pEasy-scFv 的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| ·原核重组质粒pEasy-scFv 的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的纯化、复性及鉴定 | 第49-51页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的纯化 | 第49-50页 |
| ·抗独特型单链抗体重组蛋白的复性及鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白scFv 的 Western-blot 分析 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白scFv 的 IFA 鉴定 | 第51页 |
| ·兔源 Mab2-5G2、Mab-HEV 抗体的制备 | 第51-53页 |
| ·纯化后Mab2-5G2 和Mab-HEV 抗体的SDS-PAGE 鉴定 | 第51-52页 |
| ·纯化后Mab2-5G2 和Mab-HEV 抗体的IFA 鉴定 | 第52页 |
| ·兔源 Mab2-5G2、scFv 抗体的制备多克隆血清的检测 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-54页 |
| 5. 结论 | 第54-55页 |
| 创新之处 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附件 | 第73页 |
