摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一章 前言 | 第12-31页 |
·研究背景 | 第12-13页 |
·启动子的研究 | 第13-27页 |
·基因表达的调控 | 第13-15页 |
·原核生物的基因表达调控 | 第13-14页 |
·真核生物的基因表达调控 | 第14-15页 |
·启动子 | 第15-27页 |
·真核生物的启动子 | 第16-21页 |
·植物基因启动子的分类 | 第21-27页 |
·组成型启动子 | 第22-24页 |
·组织或器官特异性启动子 | 第24-25页 |
·诱导型启动子 | 第25-27页 |
·报告基因 | 第27-29页 |
·顺式作用元件和转录因子 | 第29-31页 |
第二章 水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 启动子区的克隆及其顺式作用元件信号分析 | 第31-63页 |
·前言 | 第31-32页 |
·材料与方法 | 第32-41页 |
·材料 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第32页 |
·质粒与菌种 | 第32页 |
·生化试剂及试剂盒 | 第32页 |
·其他试剂 | 第32页 |
·引物的合成 | 第32-33页 |
·测序 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-41页 |
·启动子区的 PLACE 分析 | 第33-34页 |
·MT1 和MT2 基因启动子区的克隆 | 第34页 |
·水稻强分蘖基因 MT1 和MT2全长启动子区与GUS基因融合表达载体的构建 | 第34-36页 |
·水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 5’端缺失启动子区与GUS 基因表达载体的构建 | 第36-37页 |
·根癌农杆菌介导培育转基因水稻 | 第37-38页 |
·水稻的组织培养 | 第37-38页 |
·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻转化 | 第38页 |
·抗性愈伤组织的分化及转基因植株的再生 | 第38页 |
·转基因水稻植株总 DNA 的 PCR 分析 | 第38-39页 |
·转基因水稻植株中 GUS 活性检测 | 第39-40页 |
·组织化学染色 | 第39页 |
·荧光定量分析 | 第39-40页 |
·水稻总RNA 的提取及半定量RT-PCR 分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-56页 |
·启动子区的PLACE 分析 | 第41-43页 |
·水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 启动子的克隆 | 第43-45页 |
·水稻强分蘖基因MT1 和MT2 启动子与GUS 融合基因的构建 | 第45-48页 |
·水稻强分蘖基因MT1 和 MT2 5’端缺失启动子与GUS 融合基因的构建 | 第48-50页 |
·水稻转基因植株的获得及其鉴定 | 第50-51页 |
·转基因水稻植株中GUS 活性检测 | 第51-56页 |
·组织化学染色 | 第51-53页 |
·荧光定量分析 | 第53-56页 |
·RT-PCR 半定量分析 | 第56页 |
·小结和讨论 | 第56-63页 |
·MT1 基因结果分析 | 第56-60页 |
·MT2 基因结果分析 | 第60-61页 |
·MT1 和MT2 基因结果比较分析 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
附录A:水稻叶片总DNA 的小量抽提 | 第71-72页 |
附录B:大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第72-73页 |
附录C:根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备 | 第73-74页 |
附录D:MT1 和MT2 基因AA clustalw 比对结果 | 第74-75页 |
附录E:本实验中所用培养基 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |