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水稻强分蘖基因MT1和MT2启动子区的克隆及其顺式作用元件信号分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一章 前言第12-31页
   ·研究背景第12-13页
   ·启动子的研究第13-27页
     ·基因表达的调控第13-15页
       ·原核生物的基因表达调控第13-14页
       ·真核生物的基因表达调控第14-15页
     ·启动子第15-27页
       ·真核生物的启动子第16-21页
       ·植物基因启动子的分类第21-27页
         ·组成型启动子第22-24页
         ·组织或器官特异性启动子第24-25页
         ·诱导型启动子第25-27页
   ·报告基因第27-29页
   ·顺式作用元件和转录因子第29-31页
第二章 水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 启动子区的克隆及其顺式作用元件信号分析第31-63页
   ·前言第31-32页
   ·材料与方法第32-41页
     ·材料第32-33页
       ·植物材料第32页
       ·质粒与菌种第32页
       ·生化试剂及试剂盒第32页
       ·其他试剂第32页
       ·引物的合成第32-33页
       ·测序第33页
     ·实验方法第33-41页
       ·启动子区的 PLACE 分析第33-34页
       ·MT1 和MT2 基因启动子区的克隆第34页
       ·水稻强分蘖基因 MT1 和MT2全长启动子区与GUS基因融合表达载体的构建第34-36页
       ·水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 5’端缺失启动子区与GUS 基因表达载体的构建第36-37页
       ·根癌农杆菌介导培育转基因水稻第37-38页
         ·水稻的组织培养第37-38页
         ·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻转化第38页
         ·抗性愈伤组织的分化及转基因植株的再生第38页
       ·转基因水稻植株总 DNA 的 PCR 分析第38-39页
       ·转基因水稻植株中 GUS 活性检测第39-40页
         ·组织化学染色第39页
         ·荧光定量分析第39-40页
       ·水稻总RNA 的提取及半定量RT-PCR 分析第40-41页
   ·结果与分析第41-56页
     ·启动子区的PLACE 分析第41-43页
     ·水稻强分蘖基因 MT1 和 MT2 启动子的克隆第43-45页
     ·水稻强分蘖基因MT1 和MT2 启动子与GUS 融合基因的构建第45-48页
     ·水稻强分蘖基因MT1 和 MT2 5’端缺失启动子与GUS 融合基因的构建第48-50页
     ·水稻转基因植株的获得及其鉴定第50-51页
     ·转基因水稻植株中GUS 活性检测第51-56页
       ·组织化学染色第51-53页
       ·荧光定量分析第53-56页
     ·RT-PCR 半定量分析第56页
   ·小结和讨论第56-63页
     ·MT1 基因结果分析第56-60页
     ·MT2 基因结果分析第60-61页
     ·MT1 和MT2 基因结果比较分析第61-63页
参考文献第63-71页
附录A:水稻叶片总DNA 的小量抽提第71-72页
附录B:大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第72-73页
附录C:根癌农杆菌 EHA105 感受态细胞的制备第73-74页
附录D:MT1 和MT2 基因AA clustalw 比对结果第74-75页
附录E:本实验中所用培养基第75-76页
致谢第76页

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