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羊胃肠线虫对常用驱虫药抗药性的初步研究

摘要第1-5页
Abstract第5-16页
1 引言第16-51页
   ·驱虫药抗药性流行概况第18-21页
   ·驱虫药抗药性的选择第21-27页
   ·驱虫药抗药性的药理学和遗传学机制第27-36页
   ·抗药性的逆转第36-38页
   ·驱虫药抗药性的检测(表3)第38-46页
   ·驱虫药抗药性的管理第46-48页
   ·我国羊线虫抗药性的研究现状及开展本项研究的目的和意义第48-51页
2 研究一 羊胃肠线虫对常用驱虫药抗药性流行状况的调查第51-59页
   ·材料和方法第51-53页
     ·羊场饲养管理情况第51-52页
     ·试验药物第52页
     ·试验动物第52页
     ·分组和样品采集第52页
     ·投药和粪便虫卵计数第52-53页
     ·数据处理和结果判定第53页
   ·结果第53-55页
     ·丙硫苯咪唑抗药性调查结果第53-55页
     ·阿维菌素抗药性调查结果(见表5)第55页
   ·讨论第55-57页
   ·小结第57-59页
3 研究二 丙硫苯咪唑体外孵化试验检测羊线虫抗药性的研究第59-71页
   ·材料和方法第59-61页
     ·试验药物第59页
     ·受检羊群及样品采集第59-60页
     ·受检虫卵收集第60页
     ·丙硫苯咪唑溶液稳定性试验第60页
     ·0~4℃粪样保存对虫卵孵化的影响试验第60页
     ·丙硫苯咪唑和噻苯咪唑测定田间受检样品的对比试验第60页
     ·虫卵孵化试验与减卵试验的比较第60页
     ·统计分析第60-61页
   ·结果第61-67页
     ·粪便样品在0~4℃保存对虫卵孵化的影响第61页
     ·丙硫苯咪唑溶液稳定性试验结果(图9、表7)第61-63页
     ·丙硫苯咪唑和噻苯咪唑对田间样品LD50 值之比较及与减卵试验的关系(图10、表8)第63-67页
   ·讨论第67-69页
   ·小结第69-71页
4 研究三 苯并咪唑抗药虫株的人工选择及幼虫发育试验对羊线虫抗药性的检测第71-80页
   ·材料和方法第71-73页
     ·试验动物第71页
     ·样品来源及采集第71页
     ·主要药品试剂及配制第71-72页
     ·虫卵收集与纯化方法见3.1第72页
     ·虫卵孵化试验方法见3.1第72页
     ·苯并咪唑抗药虫株的人工选择第72页
     ·幼虫发育试验第72-73页
     ·幼虫发育半数抑制量的计算第73页
   ·结果第73-77页
     ·苯并咪唑抗药虫株的人工选择结果第73-74页
     ·幼虫发育试验结果第74-77页
   ·讨论第77-79页
   ·小结第79-80页
5 研究四 捻转血矛线虫苯并咪唑抗药性虫株的分离鉴定及某些生物学特性的研究第80-89页
   ·材料和方法第80-81页
     ·敏感虫株的建立第80页
     ·分离株的来源和建立第80-81页
     ·分离株和敏感株的人工传代试验第81页
     ·虫种鉴定第81页
     ·分离虫株的抗药性及其它特性测定第81页
     ·数据处理第81页
   ·结果第81-86页
     ·敏感株和分离株分离前虫卵孵化试验状态及分离结果第81-83页
     ·分离株和敏感株传代后的抗药性鉴定第83页
     ·分离株接种后虫卵在不同时期内LD50 值的测定结果第83-86页
   ·讨论第86-88页
   ·小结第88-89页
6 研究五 PCR-SSCP 对捻转血矛线虫Β-微管蛋白基因的多态性分析第89-103页
   ·材料和方法第89-96页
     ·试验虫体样品(表14)第89-90页
     ·主要试剂及来源第90页
     ·常用溶液的配制第90-92页
     ·主要仪器设备第92页
     ·单条虫体DNA 提取对比试验和DNA 检测第92-94页
     ·PCR 扩增第94-95页
     ·羊捻转血矛线虫β-微管蛋白基因片段的PCR-SSCP 分析第95-96页
     ·数据处理第96页
   ·结果第96-98页
     ·基因组DNA 的提取与检测(图19)第96-97页
     ·PCR 扩增结果第97页
     ·PCR-SSCP 分析结果第97-98页
   ·讨论第98-102页
     ·基因组DNA 的提取第98-99页
     ·PCR 扩增第99页
     ·PCR-SSCP 实验技术第99-100页
     ·PCR-SSCP 结果分析第100-101页
     ·PCR-SSCP 方法在驱虫药抗药性检测中的应用第101-102页
   ·小结第102-103页
7 研究六 PCR-RFLP 检测捻转血矛线虫Β-微管蛋白苯并咪唑类抗药性等位基因第103-111页
   ·材料和方法第103-105页
     ·寄生虫样品第103-104页
     ·主要实验试剂和设备第104页
     ·基因组DNA 提取方法第104页
     ·β-微管蛋白同种型Ⅰ基因扩增第104页
     ·PCR 产物纯化回收第104页
     ·限制性内切酶消化反应体系第104页
     ·酶切产物的检测第104页
     ·序列测定第104-105页
     ·数据统计和处理第105页
   ·结果第105-107页
     ·捻转血矛线虫雄虫β-微管蛋白同种型Ⅰ基因片段酶切产物电泳结果第105页
     ·不同地区捻转血矛线虫苯并咪唑抗药性基因型及频率第105-106页
     ·不同地区的捻转血矛线虫苯并咪唑抗药性等位基因频率第106-107页
     ·rr 基因型的纯合子序列测定第107页
   ·讨论第107-109页
   ·小结第109-111页
8 研究七 捻转血矛线虫群体中Β-微管蛋白基因与苯并咪唑抗药性相关遗传多样性初探第111-119页
   ·材料和方法第112-113页
     ·寄生虫样品第112页
     ·主要实验试剂和设备第112页
     ·捻转血矛线虫基因组DNA 的提取同6.1.5 方法4第112页
     ·捻转血矛线虫β-微管蛋白同种型Ⅰ基因的PCR 扩增第112-113页
     ·PCR 产物的检测:同6.1.5第113页
     ·PCR 产物的纯化与回收:同7.1.5第113页
     ·序列测定第113页
     ·数据分析第113页
   ·结果第113-114页
     ·捻转血矛线虫β-微管蛋白基因的扩增结果第113页
     ·不同来源捻转血矛线虫β-微管蛋白基因部分片段核苷酸变异的分析和对 比第113-114页
   ·讨论第114-117页
   ·小结第117-119页
9 研究八 不同养羊模式中胃肠线虫感染状况及抗药性相关的寄生虫控制策略之探讨第119-128页
   ·材料和方法第119-121页
     ·羊场饲养管理调查第119-120页
     ·试验动物和样品采集第120-121页
     ·试验方法第121页
     ·数据处理第121页
   ·结果第121-122页
   ·讨论第122-127页
     ·饲养方式和环境与羊寄生虫感染的关系第122-123页
     ·抗药性的管理与寄生虫控制策略第123-124页
     ·抗药性管理措施建议第124-127页
   ·小结第127-128页
10 结论与展望第128-129页
本课题的创新点第129-130页
致谢第130-131页
参考文献第131-151页
作者简介第151页

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