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丹参叶遗传转化体系的建立及HMGR基因3片段的克隆

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-14页
缩写词表第14-16页
第一章 文献综述第16-28页
 前言第16页
   ·发根农杆菌在药用植物中的研究方向和应用第16-20页
     ·发根农杆菌中的Ri T-DNA基因第16-17页
     ·发根的离体培养和次生代谢物的产生第17-19页
     ·发根农杆菌介导的植株再生第19-20页
   ·丹参的研究现状第20-26页
     ·丹参的主要药用成分和应用价值第20页
     ·丹参的离体培养第20-22页
       ·丹参的植株再生第20-21页
       ·人工诱导多倍体第21页
       ·丹参的细胞培养第21-22页
     ·丹参毛状根的离体培养第22-23页
     ·丹参的基因工程第23-26页
       ·丹参二萜类成分的生物合成第23-26页
       ·农杆菌介导的丹参遗传转化第26页
   ·展望第26-27页
   ·本项研究的目的和意义第27-28页
第二章 材料与方法第28-39页
   ·实验材料第28-30页
     ·植物材料第28页
     ·菌种第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·购买的试剂、酶及药品第29页
     ·常用试剂第29-30页
   ·实验方法第30-39页
     ·无菌苗的获得第30页
     ·丹参叶再生体系的建立第30页
       ·培养基和培养条件第30页
       ·方法第30页
     ·丹参毛状根的诱导与鉴定第30-32页
       ·培养基和培养条件第30-31页
       ·方法第31-32页
     ·丹参毛状根离体培养条件的优化及其药用活性成分的测定第32-33页
       ·培养基和培养条件第32页
       ·方法第32-33页
     ·发根农杆菌介导的丹参植株再生第33页
       ·培养基和培养条件第33页
       ·方法第33页
     ·丹参RNA的提取及检测第33-35页
       ·准备工作第33页
       ·RNA的提取第33-34页
       ·RNA质量检测分析第34-35页
     ·HMGR 3’端基因的克隆及序列的生物信息学分析第35-39页
       ·丹参3’cDNA的合成第35页
       ·HMGR 3’端基因的克隆第35-36页
       ·凝胶电泳条带的柱层析纯化回收第36页
       ·DNA回收片段与pMD18-T vector 载体的连接第36-37页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaC12法)第37页
       ·DNA与pMD18-Tvector的连接产物转化DH5α感受态细胞.第37-38页
       ·阳性克隆的筛选及测序鉴定第38页
       ·HMGR 3’端序列的生物信息学分析第38-39页
第三章 实验结果与分析第39-59页
   ·无菌苗的获得第39页
   ·丹参叶再生体系的建立第39-42页
     ·叶的不同部位对丹参愈伤诱导率的影响第39页
     ·不同类型的愈伤对丹参愈伤分化的影响第39-40页
     ·丹参芽的生根第40-41页
       ·植物生长调节物质对丹参芽生根的影响第40-41页
       ·不同的培养基对丹参芽生根的影响第41页
     ·小结与讨论第41-42页
   ·丹参毛状根的诱导与鉴定第42-47页
     ·不同的发根农杆菌菌株对丹参毛状根诱导率的影响第42-43页
     ·不同的外植体对丹参毛状根诱导率的影响第43页
     ·菌液浓度对丹参毛状根诱导率的影响第43-44页
     ·共培养时间对丹参毛状根诱导率的影响第44-45页
     ·乙酰丁香酮(As) 对丹参毛状根诱导率的影响第45-46页
     ·毛状根的PCR鉴定第46页
     ·小结与讨论第46-47页
   ·丹参毛状根离体培养条件的优化及其药用活性成分的测定第47-52页
     ·不同的培养基对毛状根生长的影响第47-48页
     ·不同的碳源和氮源对毛状根生长的影响第48-49页
     ·植物生长调节物质对丹参毛状根生长的影响第49页
     ·稀土元素对丹参毛状根药用活性成分含量的影响第49-52页
     ·研究小结与讨论第52页
   ·发根农杆菌介导丹参的植株再生第52-54页
     ·不同的培养基对丹参毛状根芽分化的影响第52-53页
     ·丹参毛状根再生植株的分子鉴定第53页
     ·小结与讨论第53-54页
   ·丹参RNA的提取及检测第54页
   ·丹参HMGR 3’端基因的克隆及序列的生物信息学分析第54-59页
     ·基因克隆及序列分析第54-58页
     ·小结与讨论第58-59页
第四章 总结与展望第59-61页
   ·研究结论第59-60页
   ·本研究的主要创新点第60页
   ·后续的研究工作第60-61页
附录图第61-62页
参考文献第62-70页
致谢第70-72页
攻读硕士学位期间的研究成果第72页

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