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甘蓝型油菜木质素单体合成基因COMT和F5H的克隆及表达调控

第一章 前言第1-28页
 1.1 作物抗倒伏研究及其与木质素的关系第12-13页
  1.1.1 作物抗倒伏研究第12-13页
  1.1.2 作物抗倒性与木质素的关系第13页
 1.2 植物抗病性机制及其与木质素的关系第13-16页
  1.2.1 植物的抗病性机制第13-14页
  1.2.2 核盘菌的致病机制第14-15页
  1.2.3 木质素与植物抗病性的关系第15-16页
 1.3 木质素生物合成及其基因工程研究进展第16-27页
  1.3.1 木质素的分布及组成第16-18页
  1.3.2 木质素的生物合成与调控第18-26页
  1.3.3 木质素生物调控的问题与展望第26-27页
 1.4 研究目的与意义第27-28页
第二章 甘蓝型油菜COMT和F5H基因的克隆第28-40页
 2.1 材料与方法第28-32页
  2.1.1 实验材料第28页
  2.1.2 植物总RNA的抽提第28-29页
  2.1.3 反转录cDNA第一链第29页
  2.1.4 在Genbank中检索COMT和F5H的同源基因第29页
  2.1.5 RT-PCR分离克隆COMT和F5H基因片段第29-32页
 2.2 结果与分析第32-40页
  2.2.1 COMT基因片段的比对与分析第32-38页
  2.2.2 F5H基因片段的比对与分析第38-40页
第三章 甘蓝型油菜COMT和F5H基因的原核表达第40-47页
 3.1 材料与方法第40-44页
  3.1.1 实验材料第40页
  3.1.2 原核表达载体的构建第40-42页
  3.1.3 基因的诱导表达第42页
  3.1.4 杂种蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳第42-44页
 3.2 结果与分析第44-47页
  3.2.1 COMT基因的原核表达第44-45页
  3.2.2 F5H基因的原核表达第45-47页
第四章 反义F5H在烟草中的表达第47-55页
 4.1 材料与方法第47-50页
  4.1.1 实验材料第47页
  4.1.2 植物表达载体的构建第47页
  4.1.3 阳性重组质粒转化农杆菌第47-48页
  4.1.4 农杆菌叶盘法转化烟草第48-49页
  4.1.5 转基因烟草的PCR鉴定第49-50页
  4.1.6 转基因烟草的性状分析第50页
 4.2 结果与分析第50-55页
  4.2.1 植物表达载体的构建第50-51页
  4.2.2 转基因烟草的获得第51-52页
  4.2.3 转反义F5H基因烟草的生长发育及性状分析第52-55页
第五章 反义F5H在甘蓝型油菜中的转化第55-59页
 5.1 材料与方法第55-57页
  5.1.1 实验材料第55页
  5.1.2 农杆菌介导甘蓝型油菜子叶柄的遗传转化第55-57页
  5.1.3 转基因油菜的PCR鉴定第57页
 5.2 结果与分析第57-59页
  5.2.1 Kan抗性油菜的获得及繁育第57页
  5.2.2 转反义F5H基因油菜的分子鉴定第57-59页
第六章 讨论与总结第59-64页
 6.1 讨论第59-62页
  6.1.1 关于同源序列法克隆基因第59-60页
  6.1.2 关于反义RNA抑制基因表达第60-61页
  6.1.3 关于油菜的遗传转化第61-62页
 6.2 总结第62-64页
参考文献第64-72页
致谢第72-73页
作者简历第73页

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