第一章 前言 | 第1-28页 |
1.1 作物抗倒伏研究及其与木质素的关系 | 第12-13页 |
1.1.1 作物抗倒伏研究 | 第12-13页 |
1.1.2 作物抗倒性与木质素的关系 | 第13页 |
1.2 植物抗病性机制及其与木质素的关系 | 第13-16页 |
1.2.1 植物的抗病性机制 | 第13-14页 |
1.2.2 核盘菌的致病机制 | 第14-15页 |
1.2.3 木质素与植物抗病性的关系 | 第15-16页 |
1.3 木质素生物合成及其基因工程研究进展 | 第16-27页 |
1.3.1 木质素的分布及组成 | 第16-18页 |
1.3.2 木质素的生物合成与调控 | 第18-26页 |
1.3.3 木质素生物调控的问题与展望 | 第26-27页 |
1.4 研究目的与意义 | 第27-28页 |
第二章 甘蓝型油菜COMT和F5H基因的克隆 | 第28-40页 |
2.1 材料与方法 | 第28-32页 |
2.1.1 实验材料 | 第28页 |
2.1.2 植物总RNA的抽提 | 第28-29页 |
2.1.3 反转录cDNA第一链 | 第29页 |
2.1.4 在Genbank中检索COMT和F5H的同源基因 | 第29页 |
2.1.5 RT-PCR分离克隆COMT和F5H基因片段 | 第29-32页 |
2.2 结果与分析 | 第32-40页 |
2.2.1 COMT基因片段的比对与分析 | 第32-38页 |
2.2.2 F5H基因片段的比对与分析 | 第38-40页 |
第三章 甘蓝型油菜COMT和F5H基因的原核表达 | 第40-47页 |
3.1 材料与方法 | 第40-44页 |
3.1.1 实验材料 | 第40页 |
3.1.2 原核表达载体的构建 | 第40-42页 |
3.1.3 基因的诱导表达 | 第42页 |
3.1.4 杂种蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第42-44页 |
3.2 结果与分析 | 第44-47页 |
3.2.1 COMT基因的原核表达 | 第44-45页 |
3.2.2 F5H基因的原核表达 | 第45-47页 |
第四章 反义F5H在烟草中的表达 | 第47-55页 |
4.1 材料与方法 | 第47-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第47页 |
4.1.2 植物表达载体的构建 | 第47页 |
4.1.3 阳性重组质粒转化农杆菌 | 第47-48页 |
4.1.4 农杆菌叶盘法转化烟草 | 第48-49页 |
4.1.5 转基因烟草的PCR鉴定 | 第49-50页 |
4.1.6 转基因烟草的性状分析 | 第50页 |
4.2 结果与分析 | 第50-55页 |
4.2.1 植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
4.2.2 转基因烟草的获得 | 第51-52页 |
4.2.3 转反义F5H基因烟草的生长发育及性状分析 | 第52-55页 |
第五章 反义F5H在甘蓝型油菜中的转化 | 第55-59页 |
5.1 材料与方法 | 第55-57页 |
5.1.1 实验材料 | 第55页 |
5.1.2 农杆菌介导甘蓝型油菜子叶柄的遗传转化 | 第55-57页 |
5.1.3 转基因油菜的PCR鉴定 | 第57页 |
5.2 结果与分析 | 第57-59页 |
5.2.1 Kan抗性油菜的获得及繁育 | 第57页 |
5.2.2 转反义F5H基因油菜的分子鉴定 | 第57-59页 |
第六章 讨论与总结 | 第59-64页 |
6.1 讨论 | 第59-62页 |
6.1.1 关于同源序列法克隆基因 | 第59-60页 |
6.1.2 关于反义RNA抑制基因表达 | 第60-61页 |
6.1.3 关于油菜的遗传转化 | 第61-62页 |
6.2 总结 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73页 |