| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第7-15页 |
| ·副猪嗜血杆菌的研究进展 | 第7-11页 |
| ·病原特征 | 第7-8页 |
| ·致病性和毒力 | 第8-9页 |
| ·预防与免疫 | 第9-11页 |
| ·突变转座技术的研究进展 | 第11-13页 |
| ·转座子的结构和类型 | 第11-12页 |
| ·转座子在生物学研究中的应用 | 第12-13页 |
| ·构建细菌突变株的技术 | 第13-15页 |
| 第2章 研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第3章 材料与方法 | 第16-26页 |
| ·材料 | 第16-19页 |
| ·菌株 | 第16页 |
| ·转座试剂盒 | 第16-17页 |
| ·酶及主要试剂 | 第17页 |
| ·主要培养基和抗生素 | 第17-18页 |
| ·缓冲液 | 第18-19页 |
| ·细菌基因组DNA提取试剂 | 第19页 |
| ·其它溶液 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·本研究中所用的寡核苷酸引物 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-26页 |
| ·细菌活化 | 第19-20页 |
| ·细菌(Hps)基因组DNA提取 | 第20页 |
| ·转座 | 第20-22页 |
| ·副猪嗜血杆菌电转化感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·副猪嗜血杆菌电转化 | 第22-23页 |
| ·突变菌株的快速鉴定 | 第23-24页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
| ·20个突变株对小白鼠致病力检测 | 第25页 |
| ·小鼠半数致死量(LD_(50))的测定(寇氏(Korbor)法) | 第25页 |
| ·弱毒突变菌株对昆明鼠的免疫源性实验 | 第25页 |
| ·菌种的保存 | 第25-26页 |
| 第4章 结果与分析 | 第26-31页 |
| ·突变菌株的鉴定 | 第26-27页 |
| ·突变菌株的抗性(Kan~r)筛选 | 第26页 |
| ·PCR扩增转座插入序列 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增16S rRNA | 第27页 |
| ·毒力减弱突变菌株的初步筛选 | 第27-29页 |
| ·突变菌株(173#)的LD_(50)的测定 | 第29页 |
| ·突变菌株(173#)SDS-PAGE结果 | 第29-30页 |
| ·突变株对昆明小鼠的免疫原性试验 | 第30-31页 |
| 第5章 讨论 | 第31-34页 |
| ·关于突变株构建的目的 | 第31页 |
| ·构建突变株的策略 | 第31-32页 |
| ·影响转座突变的因素 | 第32页 |
| ·关于突变菌株的生物学特性 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE的实验结果 | 第33页 |
| ·下一步设想 | 第33-34页 |
| 第6章 小结 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 略词表(Abbreviation) | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43页 |