| 第1章 引言 | 第1-23页 |
| ·课题背景及意义 | 第8-22页 |
| ·骨质的形成与调控 | 第9-12页 |
| ·QM 基因及QM 蛋白 | 第12-13页 |
| ·RNAi 技术的发展及应用 | 第13-22页 |
| ·论文各部分的主要内容 | 第22-23页 |
| 第2章 实验材料与实验方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-38页 |
| ·RNA 干扰的目的序列选取 | 第24-25页 |
| ·插入载体的序列设计及合成 | 第25-26页 |
| ·载体的处理 | 第26页 |
| ·胶回收 | 第26-27页 |
| ·引物与处理好的载体的连接 | 第27页 |
| ·氯化钙法制备感受态细菌 | 第27-28页 |
| ·小鼠成骨样细胞MC3T3-E1 的培养 | 第28页 |
| ·细胞的转染 | 第28-29页 |
| ·总RNA 的提取 | 第29-31页 |
| ·RT-PCR | 第31页 |
| ·胶回收 | 第31页 |
| ·质粒DNA 提取(碱裂解法) | 第31-32页 |
| ·DNA 序列分析 | 第32-33页 |
| ·pcDNA3.1/myc-His A/QM 融合基因表达载体的构建与鉴定 | 第33-35页 |
| ·QM 基因稳定表达的小鼠成骨细胞MC3T3-E1 细胞株的建立 | 第35页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第35-36页 |
| ·BCA 法测定蛋白质含量 | 第36页 |
| ·细胞周期分布分析(PI 染色法) | 第36-37页 |
| ·成骨细胞碱性磷酸酶活性的测定 | 第37页 |
| ·茜素红染色法测矿化结节 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 第3章 MC3T3-E1 细胞中QM 蛋白对成骨活性的影响 | 第38-52页 |
| ·利用RNAi 技术对小鼠成骨细胞MC3T3-E1 中QM 基因的功能研究.. | 第38-43页 |
| ·RNAi 质粒的构建 | 第38-43页 |
| ·稳定过表达QM 蛋白的MC3T3-E1 细胞系的建立 | 第43-47页 |
| ·PCR 扩增QM 基因结果 | 第43-44页 |
| ·PCR 产物法鉴定T/A 克隆 | 第44页 |
| ·pcDNA/QM 的重组鉴定 | 第44-45页 |
| ·Western Blot 检测MC3T3-E1 细胞中转染QM 蛋白表达状况 | 第45-46页 |
| ·稳定过表达QM 细胞系的筛选 | 第46-47页 |
| ·过表达QM 对MC3T3-E1 的影响 | 第47-52页 |
| ·过表达QM 蛋白对细胞周期的影响 | 第47页 |
| ·过表达QM 蛋白对细胞ALP 的影响 | 第47-48页 |
| ·过表达QM 蛋白对细胞形成矿化结节的影响 | 第48-49页 |
| ·过表达QM 蛋白对成骨细胞标志基因mRNA 表达水平的分析 | 第49-52页 |
| 第4章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
| 声明 | 第58-59页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第59页 |
