| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 参考文献 | 第16-18页 |
| 第一部分 5-氟尿嘧啶-花生凝集素偶联物的制备 | 第18-45页 |
| 概述 | 第18-19页 |
| 实验方法和结果 | 第19-42页 |
| 一、主要试剂、设备与动物 | 第19页 |
| 1． 主要试剂 | 第19页 |
| 2． 设备 | 第19页 |
| 3． 动物 | 第19页 |
| 二、方法与结果 | 第19-41页 |
| 1． 5-氟尿嘧啶衍生物:1-N-乙酸-5-氟尿嘧啶的合成 | 第20-25页 |
| 1．1 1-N-乙酸-5-氟尿嘧啶的合成 | 第20-21页 |
| 1．2 1-N-乙酸-5-氟尿嘧啶的结构鉴定 | 第21-22页 |
| 1．2 1 UV光谱鉴定 | 第21页 |
| 1．2．2 ~1H-MR鉴定 | 第21-22页 |
| 1．3 讨论 | 第22-25页 |
| 2 PNA稳定性考察 | 第25-27页 |
| 2．1 PNA活性体外检测方法 | 第25页 |
| 2．2 PNA的温度稳定性 | 第25页 |
| 2．3 PNA的酸碱稳定性 | 第25-26页 |
| 2．4 讨论 | 第26-27页 |
| 3． 偶联物5-Fu-PNA的制备 | 第27-39页 |
| 3．1 5-Fu-PNA偶联物制备路线 | 第28页 |
| 3．2 5-Fu-PNA偶联物制备 | 第28-29页 |
| 3．3 偶联物的UV鉴定 | 第29-30页 |
| 3．4 药物结合率的测定 | 第30-38页 |
| 3．4．1 蛋白质含量的测量 | 第30-32页 |
| 3．4．1．1 Folin试剂的配制 | 第30-31页 |
| 3．4．1．2 标准曲线的建立 | 第31页 |
| 3．4．1．3 偶联物中蛋白质含量的测量 | 第31-32页 |
| 3．4．2 药物结合率测定方法(TNBS法)的建立 | 第32-36页 |
| 3．4．2．1 氨基酸和蛋白质TNP衍生物的光谱学特征 | 第32-33页 |
| 3．4．2．2 反应温度和时间的影响 | 第33-36页 |
| 3．4．3 药物结合率的测定 | 第36-38页 |
| 3．5 讨论 | 第38-39页 |
| 4． 偶联物制备条件的优化 | 第39-41页 |
| 4．1 反应物分子摩尔比的选择 | 第39-40页 |
| 4．2 连接反应时间的影响 | 第40页 |
| 4．3 D-半乳糖保护试验 | 第40-41页 |
| 4．4 讨论 | 第41页 |
| 三、小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 第二部分 偶联物性质研究 | 第45-50页 |
| 概述 | 第45页 |
| 实验方法 | 第45-49页 |
| 一、主要试剂、设备与动物 | 第45页 |
| 二、实验方法与结果 | 第45-49页 |
| 1． 偶联物垂直板 SDS-PAGE电泳 | 第45-47页 |
| 2． 不同储存条件下偶连物的活性保留情况观察 | 第47页 |
| 3 偶连物在人工肠液和人工胃液中的稳定性观察 | 第47-49页 |
| 三、讨论 | 第49页 |
| 四、结论 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第三部分 偶连物与细胞的相互作用 | 第50-71页 |
| 概述 | 第50页 |
| 实验方法与结果 | 第50-69页 |
| 一、仪器、试剂与细胞系 | 第50-52页 |
| 1． 仪器 | 第50-51页 |
| 2． 试剂 | 第51-52页 |
| 二、方法与结果 | 第52-69页 |
| 1． 5-Fu-FITC-PNA复合物的制备与药物结合率的测定 | 第52页 |
| 2 LoVo和Chang细胞培养 | 第52页 |
| 3 偶连物与结肠癌细胞LoVo和正常人肝细胞Chang的相互作用 | 第52-69页 |
| 3．1 D-半乳糖和5-Fu-F-PNA偶连物无菌溶液的配制 | 第52-53页 |
| 3．2 5-Fu-FITC-PNA结合位点的饱和分析 | 第53-61页 |
| 3．3 偶连物与结肠癌细胞LoVo结合的特异性 | 第61-64页 |
| 3．4 温度对偶连物与结肠癌细胞LoVo结合的影响 | 第64-69页 |
| 4． 讨论 | 第69页 |
| 三、结论 | 第69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第四部分 5-Fu-PNA偶连物的细胞毒作用 | 第71-93页 |
| 概述 | 第71-72页 |
| 实验方法与结果 | 第72-92页 |
| 一、仪器、试剂与细胞系 | 第72-73页 |
| 1． 仪器 | 第72页 |
| 2． 试剂 | 第72页 |
| 3． 细胞系 | 第72-73页 |
| 二、方法与结果 | 第73-92页 |
| 1． LoVo生长曲线的测定 | 第73-76页 |
| 1．1 LoVo细胞培养 | 第73页 |
| 1．2 不同接种量LoVo细胞生长曲线的测定 | 第73页 |
| 1．3 测定方法 | 第73-74页 |
| 1．4 LoVo细胞生长曲线测定结果结果 | 第74-76页 |
| 1．4．1 不同接种量LoVo细胞生长曲线测定结果 | 第74-75页 |
| 1．4．2 与OD值呈线性相关的细胞接种范围 | 第75-76页 |
| 1．5 讨论 | 第76页 |
| 2． 5-Fu和5-Fu-PNA对结肠癌细胞LoVo的细胞毒作用 | 第76-85页 |
| 2．1 5-Fu和活性5-Fu-PNA偶连物无菌溶液的配制 | 第77页 |
| 2．2 固定培养时间时5-Fu和5-Fu-PNA抑制结肠癌细胞LoVo的量-效关系 | 第77-80页 |
| 2．3 固定给药浓度时二者抑制结肠癌细胞LoVo生长的时-效关系 | 第80-81页 |
| 2．4 系列浓度连续培养时，二者对LoVo的细胞毒作用 | 第81-84页 |
| 2．5 讨论 | 第84-85页 |
| 3 5-Fu-PNA对LoVo细胞毒作用的特异性 | 第85-88页 |
| 3．1 PNA、无活性偶连物和活性偶连物的无菌溶液配制 | 第85页 |
| 3．2 活性偶连物5-Fu-PNA对LoVo细胞毒作用的特异性 | 第85-86页 |
| 3．3 无活性偶连物和活性偶连物对LoVo细胞毒作用的时-效关系 | 第86-88页 |
| 3．4 讨论 | 第88页 |
| 4． 5-Fu-PNA细胞毒作用的选择性 | 第88-92页 |
| 4．1 5-Fu-PNA的选择性细胞毒作用 | 第88-91页 |
| 4．2 讨论 | 第91-92页 |
| 三、结论 | 第92页 |
| 参考文献 | 第92-93页 |
| 全文结论 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 植物凝集素的应用研究进展 | 第96-111页 |
| 参考文献 | 第107-111页 |
| 简历 | 第111-112页 |
| 声明 | 第112页 |
