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苦瓜提取物中降糖物质的分离鉴定及其降糖机理的初步探讨

第一章 综述第1-22页
 1.1 糖尿病的义第8-9页
 1.2 糖尿病的不同类型与特征第9-11页
  1.2. 1 1型糖尿病第9-10页
  1.2. 2 2型糖尿病第10-11页
  1.2.3 其它特殊型糖尿病第11页
  1.2.4 妊娠期糖尿病第11页
 1.3 糖尿病流行病学研究进展第11-12页
 1.4 糖尿病的预防第12-13页
 1.5 糖尿病的常用药物第13-17页
  1.5.1 胰岛素分泌促进剂第13-14页
   1.5.1.1 磺酰脲类第13页
   1.5.1.2 非磺酰脲类第13-14页
   1.5.1.3 胰高血糖样肽-第14页
  1.5.2 胰岛素增敏剂第14-15页
   1.5.2.1 噻唑烷二酮类第14页
   1.5.2.2 双胍类第14-15页
   1.5.2.3 β3-肾上腺素受体激动剂第15页
   1.5.2.4 胰高血糖素受体拮抗剂第15页
   1.5.2.5 脂肪酸代谢干扰剂第15页
  1.5.3 减少碳水化合物吸收的药物第15-16页
   1.5.3.1 α-葡萄糖苷酶抑制剂第15-16页
   1.5.3.2 淀粉不溶素(pramlintide第16页
  1.5.4 醛糖还原酶抑制剂第16页
  1.5.5 胰岛素类似物及其制剂第16-17页
   1.5.5.1 速效胰岛素第16页
   1.5.5.2 长效胰岛素第16-17页
  1.5.6 其他第17页
 1.6 苦瓜的本草学考证第17-18页
 1.7 苦瓜降糖成分研究进展第18-19页
  1.7.1 萜类和甾体类物质第18页
  1.7.2 多肽类物质第18-19页
  1.7.3 生物碱类物质第19页
 1.8 苦瓜降糖机理的研究进展第19-21页
  1.8.1 类胰岛素作用第20页
  1.8.2 刺激活性β细胞分泌胰岛素第20页
  1.8.3 促进受损β细胞修复的作用第20-21页
 1.9 选题的目的与意义第21-22页
第二章 材料与方法第22-42页
 2.1 实验方案第22-23页
 2.2 实验流程第23-24页
 2.3 苦瓜提取物的理化性质鉴定第24-31页
  2.3.1 苦瓜提取物的制备第24页
  2.3.2 蛋白质含量分析(Folin-酚法第24-26页
  2.3.3 糖含量分析(苯酚-硫酸法第26-27页
  2.3.4 单糖种类分析第27-28页
  2.3.5 氨基酸组成分析第28页
  2.3.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第28-29页
  2.3.7 紫外、可见光全波长扫描分析第29页
  2.3.8 红外光谱分析第29-30页
  2.3.9 毛细管液相色谱分析纯度(CLC第30页
  2.3.10 MALDI-TOF-MS分析第30-31页
 2.4 液相色谱法分离纯化苦瓜提取物降糖活性组分第31-35页
  2.4.1 常压凝胶过滤色谱法第31-32页
  2.4.2 高效液相凝胶过滤色谱法第32-33页
  2.4.3 高效离子交换色谱第33-34页
  2.4.4 高效反相液相色谱第34-35页
 2.5 苦瓜提取物分离组分的生物活性表征第35-41页
  2.5.1 HIT-T15细胞的体外培养第35-37页
  2.5.2 苦瓜提取物分离组分对胰岛β细胞分泌胰岛素的影响第37-38页
  2.5.3 苦瓜提取物对胰岛β细胞损伤的修复活性(MTT法第38-39页
  2.5.4 苦瓜提取物对胰岛β细胞损伤的保护活性(MTT法第39-40页
  2.5.5 苦瓜提取物分离组分对超氧化物歧化酶活性的影响第40-41页
  2.5.6 苦瓜提取物对自发性糖尿病大鼠血糖的影响第41页
  2.5.7 苦瓜提取物急性和长期毒性实验第41页
 2.6 实验数据的处理第41-42页
第三章 结果与讨论第42-72页
 3.1 苦瓜提取物成分分析第42-55页
  3.1.1 苦瓜提取物蛋白质和总糖含量分析第42-43页
  3.1.2 苦瓜提取物氨基酸组成分析第43-45页
  3.1.3 苦瓜提取物单糖种类分析第45-46页
  3.1.4 苦瓜提取物全波长扫描第46页
  3.1.5 苦瓜提取物电泳分析第46-47页
  3.1.6 凝胶过滤色谱法测定苦瓜提取物相对分子量第47-50页
   3.1.6.1 TSKgel-G3000SW色谱测定苦瓜提取物相对分子量第47-49页
   3.1.6.2 SuperdexPeptide10/300GL色谱测定苦瓜提取物分子量第49-50页
  3.1.7 苦瓜提取物细胞活性实验第50-54页
   3.1.7.1 苦瓜提取物促β细胞分泌胰岛素实验第51-52页
   3.1.7.2 苦瓜提取物对受损β细胞修复实验第52-53页
   3.1.7.3 苦瓜提取物对β细胞破坏的保护实验第53-54页
  3.1.8 苦瓜提取物对正常和自发性糖尿病大鼠血糖的影响第54页
  3.1.9 苦瓜提取物急性和长期毒性实验第54-55页
 3.2 苦瓜提取物的分离纯化与降糖活性实验第55-69页
  3.2.1 常压凝胶过滤色谱分离苦瓜提取物的尝试第55-56页
  3.2.2 苦瓜提取物透析袋初筛降糖活性部位第56-60页
   3.2.2.1 透析袋内、袋外样品的TSKgelG3000SW色谱第56-57页
   3.2.2.2 苦瓜提取物透析袋内、袋外样品促正常β细胞分泌胰岛素实验第57-58页
   3.2.2.3 苦瓜提取物透析袋内、袋外样品对受损β细胞修复实验第58-60页
  3.2.3 MCE-L组分阳离子交换色谱及降糖活性实验第60-64页
   3.2.3.1 MCE-L组分在SP-650M离子交换柱上的色谱表现第60-61页
   3.2.3.2 SP分离样品在20mmol/L破坏剂浓度下的β细胞修复实验第61-63页
   3.2.3.3 SP分离样品中超氧化物歧化酶(SOD)活性实验第63-64页
  3.2.4 SP-Peak7组分在C18反相柱上的分离及其降糖活性第64-69页
   3.2.4.1 苦瓜提取物C18-Peak7组分在C18高效反相柱上的色谱表现第64-65页
   3.2.4.2 C18反相色谱分离样品β细胞活性实验第65-67页
   3.2.4.3 C18分离样品中超氧化物歧化酶(SOD)活性实验第67-68页
   3.2.4.4 C18-Peak2样品浓度对β细胞活性的影响第68-69页
 3.3 C18反相色谱分离Peak2的理化性质鉴定第69-72页
  3.3.1 毛细管液相色谱测定Peak2的纯度第69页
  3.3.2 高效凝胶过滤色谱测算Peak2的表观分子量第69-70页
  3.3.3 MALDI-TOF-MS测定细胞修复因子的精确分子量第70-71页
  3.3.4 苦瓜提取物β细胞修复因子的红外光谱分析第71-72页
第四章 总结与展望第72-74页
 4.1 总结第72-73页
 4.2 展望第73-74页
参考文献第74-79页
致谢第79-80页
个人简历第80页

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