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小麦T型细胞质雄性不育相关蛋白的表达及育性恢复基因Rf3的分子标记的研究

1 引言第1-46页
   ·植物细胞质的雄性不育第16-28页
     ·CMS的获得途径第17页
     ·CMS的细胞质决定因子第17-18页
     ·CMS基因的分子特征第18-19页
     ·CMS的生理学效应第19-20页
     ·CMS的可能机制第20-22页
     ·CMS与线粒体的关系第22-26页
     ·CMS与叶绿体的关系第26-28页
   ·育性恢复的分子机制第28-34页
     ·育性恢复的可能机制第28-31页
     ·恢复基因调控线粒体CMS基因的表达第31-34页
   ·发育遗传学分析的必要性第34-35页
   ·蛋白质组学及其分析手段第35-38页
     ·蛋白质组学第35-37页
     ·蛋白质组研究技术及其进展第37-38页
   ·分子标记技术第38-41页
     ·分子标记技术的种类第38-40页
     ·分子标记技术在植物研究中的应用第40-41页
   ·近等基因系的利用第41-42页
   ·可行性分析第42-43页
   ·实验设计第43-44页
   ·立题依据、目的与意义第44-46页
2 材料与方法第46-67页
   ·实验材料第46-47页
     ·菌株和克隆载体第46页
     ·植物材料第46页
     ·试剂及酶第46页
     ·主要仪器第46-47页
   ·实验方法第47-67页
     ·小麦实验品系的获得第47-49页
     ·蛋白质样品的提取第49页
     ·蛋白质浓度的测定第49-50页
     ·蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)第50-53页
     ·基因组DNA的提取第53页
     ·基因组DNA的纯化第53-54页
     ·AFLP扩增第54-55页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第55-56页
     ·差异条带回收及再扩增第56-57页
     ·Southern杂交第57-60页
     ·阳性条带的T载体连接(pGEM-T Easy Vector Systems)第60页
     ·感受态细胞制备第60页
     ·转化第60页
     ·质粒小量制备第60-61页
     ·质粒的酶切第61页
     ·序列测定第61页
     ·附:实验所用的溶液第61-66页
     ·AFLP引物的设计与合成第66-67页
3 实验结果第67-79页
   ·植物材料体系的建立第67页
   ·蛋白质双向电泳结果第67-73页
     ·蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质浓度的测定第67-68页
     ·IEF(等电聚焦电泳)胶条长度与pl的线性关系分析第68-70页
     ·蛋白质分子量的确定第70-71页
     ·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验结果第71-72页
     ·2D-PAGE(蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分析结果第72-73页
   ·分子标记研究结果第73-79页
     ·基因组DNA的提取及纯化第73-74页
     ·AFLP扩增第74-75页
     ·聚丙烯酰胺凝胶染色第75页
     ·差异条带回收及丙扩增第75页
     ·Southern杂交第75-76页
     ·差异条带的克隆、测序与序列分析第76-79页
4 讨论第79-88页
   ·实验品系的建立和选材的重要性第79-80页
     ·建立发育遗传学研究的实验品系第79页
     ·近等基因系的利用第79-80页
   ·研究技术方法第80-82页
     ·基因组DNA的制备第80-81页
     ·基因组DNA的酶切及接头的连接第81页
     ·引物的选择第81页
     ·扩增反应第81页
     ·扩增反应的凝胶电泳分析第81-82页
     ·差异条带回收及再扩增第82页
   ·研究结果分析第82-84页
     ·SDS-PAGE的结果分析第82页
     ·IEF-SDS PAGE的结果分析第82-83页
     ·NEPHGE-SDS PAGE的结果分析第83页
     ·关于NEPHGE-SDS PAGE实验体系的建立第83-84页
     ·测序结果分析第84页
   ·发育遗传学机理的初步探讨第84-85页
   ·实验操作的不利因素第85-88页
     ·实验材料自身特点给研究带来的不利第85页
     ·分析手段本身的局限性第85-86页
     ·表达调控本身的复杂性第86-88页
5 结论第88-92页
   ·研究结论第88-89页
     ·建立实验材料体系第88页
     ·不同发育时期电泳图谱的研究第88页
     ·分子标记的研究第88-89页
   ·本研究的创新点第89页
   ·本研究方向进行研究工作的展望与设想第89-92页
     ·关于发育遗传学的研究策略第89-90页
     ·关于双向电泳分析技术的继续研究策略第90页
     ·关于分子标记研究的设想与研究策略第90-92页
参考文献第92-106页
附    录第106-114页
 pGEM-T Easy 质粒图谱第106-107页
 图版说明第107-113页
 攻读学位期间的培训情况第113-114页
攻读博士学位期间发表的学术论文第114-115页
致    谢第115-116页
图    版第116-137页

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