1 引言 | 第1-46页 |
·植物细胞质的雄性不育 | 第16-28页 |
·CMS的获得途径 | 第17页 |
·CMS的细胞质决定因子 | 第17-18页 |
·CMS基因的分子特征 | 第18-19页 |
·CMS的生理学效应 | 第19-20页 |
·CMS的可能机制 | 第20-22页 |
·CMS与线粒体的关系 | 第22-26页 |
·CMS与叶绿体的关系 | 第26-28页 |
·育性恢复的分子机制 | 第28-34页 |
·育性恢复的可能机制 | 第28-31页 |
·恢复基因调控线粒体CMS基因的表达 | 第31-34页 |
·发育遗传学分析的必要性 | 第34-35页 |
·蛋白质组学及其分析手段 | 第35-38页 |
·蛋白质组学 | 第35-37页 |
·蛋白质组研究技术及其进展 | 第37-38页 |
·分子标记技术 | 第38-41页 |
·分子标记技术的种类 | 第38-40页 |
·分子标记技术在植物研究中的应用 | 第40-41页 |
·近等基因系的利用 | 第41-42页 |
·可行性分析 | 第42-43页 |
·实验设计 | 第43-44页 |
·立题依据、目的与意义 | 第44-46页 |
2 材料与方法 | 第46-67页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·菌株和克隆载体 | 第46页 |
·植物材料 | 第46页 |
·试剂及酶 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-67页 |
·小麦实验品系的获得 | 第47-49页 |
·蛋白质样品的提取 | 第49页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第49-50页 |
·蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE) | 第50-53页 |
·基因组DNA的提取 | 第53页 |
·基因组DNA的纯化 | 第53-54页 |
·AFLP扩增 | 第54-55页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55-56页 |
·差异条带回收及再扩增 | 第56-57页 |
·Southern杂交 | 第57-60页 |
·阳性条带的T载体连接(pGEM-T Easy Vector Systems) | 第60页 |
·感受态细胞制备 | 第60页 |
·转化 | 第60页 |
·质粒小量制备 | 第60-61页 |
·质粒的酶切 | 第61页 |
·序列测定 | 第61页 |
·附:实验所用的溶液 | 第61-66页 |
·AFLP引物的设计与合成 | 第66-67页 |
3 实验结果 | 第67-79页 |
·植物材料体系的建立 | 第67页 |
·蛋白质双向电泳结果 | 第67-73页 |
·蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质浓度的测定 | 第67-68页 |
·IEF(等电聚焦电泳)胶条长度与pl的线性关系分析 | 第68-70页 |
·蛋白质分子量的确定 | 第70-71页 |
·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验结果 | 第71-72页 |
·2D-PAGE(蛋白质双向聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分析结果 | 第72-73页 |
·分子标记研究结果 | 第73-79页 |
·基因组DNA的提取及纯化 | 第73-74页 |
·AFLP扩增 | 第74-75页 |
·聚丙烯酰胺凝胶染色 | 第75页 |
·差异条带回收及丙扩增 | 第75页 |
·Southern杂交 | 第75-76页 |
·差异条带的克隆、测序与序列分析 | 第76-79页 |
4 讨论 | 第79-88页 |
·实验品系的建立和选材的重要性 | 第79-80页 |
·建立发育遗传学研究的实验品系 | 第79页 |
·近等基因系的利用 | 第79-80页 |
·研究技术方法 | 第80-82页 |
·基因组DNA的制备 | 第80-81页 |
·基因组DNA的酶切及接头的连接 | 第81页 |
·引物的选择 | 第81页 |
·扩增反应 | 第81页 |
·扩增反应的凝胶电泳分析 | 第81-82页 |
·差异条带回收及再扩增 | 第82页 |
·研究结果分析 | 第82-84页 |
·SDS-PAGE的结果分析 | 第82页 |
·IEF-SDS PAGE的结果分析 | 第82-83页 |
·NEPHGE-SDS PAGE的结果分析 | 第83页 |
·关于NEPHGE-SDS PAGE实验体系的建立 | 第83-84页 |
·测序结果分析 | 第84页 |
·发育遗传学机理的初步探讨 | 第84-85页 |
·实验操作的不利因素 | 第85-88页 |
·实验材料自身特点给研究带来的不利 | 第85页 |
·分析手段本身的局限性 | 第85-86页 |
·表达调控本身的复杂性 | 第86-88页 |
5 结论 | 第88-92页 |
·研究结论 | 第88-89页 |
·建立实验材料体系 | 第88页 |
·不同发育时期电泳图谱的研究 | 第88页 |
·分子标记的研究 | 第88-89页 |
·本研究的创新点 | 第89页 |
·本研究方向进行研究工作的展望与设想 | 第89-92页 |
·关于发育遗传学的研究策略 | 第89-90页 |
·关于双向电泳分析技术的继续研究策略 | 第90页 |
·关于分子标记研究的设想与研究策略 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-106页 |
附 录 | 第106-114页 |
pGEM-T Easy 质粒图谱 | 第106-107页 |
图版说明 | 第107-113页 |
攻读学位期间的培训情况 | 第113-114页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第114-115页 |
致 谢 | 第115-116页 |
图 版 | 第116-137页 |