摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 研究背景、研究意义及研究内容 | 第7-17页 |
1.1 抗病毒先天免疫 | 第7-12页 |
1.1.1 先天免疫简介 | 第7页 |
1.1.2 先天免疫受体对病毒的识别 | 第7-8页 |
1.1.3 TLRs介导的抗病毒免疫应答 | 第8-10页 |
1.1.4 RLRs介导的抗病毒免疫应答 | 第10-12页 |
1.2 VISA的结构及功能调控 | 第12-14页 |
1.2.1 VISA的简介 | 第12页 |
1.2.2 VISA的结构和定位 | 第12-13页 |
1.2.3 VISA表达及其抗病毒功能的调控水平 | 第13-14页 |
1.3 酵母双杂交系统 | 第14-15页 |
1.4 本论文的研究目的及意义 | 第15页 |
1.5 本论文研究的主要内容以及研究路线 | 第15-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料 | 第17-22页 |
2.1.1 酵母双杂交筛选主要材料及试剂 | 第17-19页 |
2.1.1.1 酵母双杂交筛选主要材料 | 第17-18页 |
2.1.1.2 酵母双杂交筛选主要试剂 | 第18页 |
2.1.1.3 酵母双杂交筛选克隆测序 | 第18页 |
2.1.1.4 酵母双杂交所用试剂制备 | 第18-19页 |
2.1.2 基因克隆主要材料及试剂 | 第19-20页 |
2.1.2.1 基因克隆主要材料 | 第19页 |
2.1.2.2 基因克隆主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 免疫共沉淀和免疫印迹主要材料及试剂 | 第20-21页 |
2.1.3.1 细胞以及转染质粒 | 第20页 |
2.1.3.2 细胞培养、转染所用耗材及试剂 | 第20-21页 |
2.1.3.3 免疫共沉淀所用耗材试剂 | 第21页 |
2.1.3.4 主要试剂制备方法 | 第21页 |
2.1.4 荧光素酶报告系统所用材料及试剂 | 第21-22页 |
2.1.4.1 细胞以及转染质粒 | 第21页 |
2.1.4.2 荧光素酶报告系统实验耗材及试剂 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 酵母菌转化以及阳性克隆挑选 | 第22-24页 |
2.2.2 制备感受态细胞DH5α | 第24-25页 |
2.2.3 候选基因全长克隆到哺乳动物细胞表达载体pRK5-Flag上 | 第25-27页 |
2.2.4 免疫共沉淀以及免疫印迹实验 | 第27-28页 |
2.2.4.1 免疫共沉淀实验 | 第27页 |
2.2.4.2 免疫印迹实验 | 第27-28页 |
2.2.5 双荧光素酶报告实验 | 第28-29页 |
第三章 实验结果 | 第29-35页 |
3.1 酵母双杂交筛选结果 | 第29-31页 |
3.2 候选基因克隆 | 第31-32页 |
3.2.1 Sec13L1全长PCR引物 | 第31页 |
3.2.2 Sec13L1全长克隆 | 第31-32页 |
3.3 免疫共沉淀验证蛋白间的相互作用 | 第32-33页 |
3.4 Sec13L1过表达增强VISA对IFNβ启动子的激活 | 第33-35页 |
第四章 讨论 | 第35-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
致谢 | 第42页 |