中文摘要 | 第1-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-31页 |
■1 生物被膜的概念及结构 | 第10-11页 |
·生物被膜的概念及分布 | 第10页 |
·生物被膜的结构 | 第10-11页 |
■2 临床常见的生物被膜感染 | 第11-12页 |
■3 细菌生物被膜感染的机制 | 第12-14页 |
·对抗免疫清除作用 | 第12页 |
·对抗生素的抗性增强 | 第12-14页 |
■4 生物被膜的形成机制 | 第14-20页 |
·环境信号的作用 | 第15页 |
·生物被膜形成的早期 | 第15-17页 |
·生物被膜的成熟期 | 第17-20页 |
■5 细菌鞭毛运动和菌毛运动相关基因的研究 | 第20-25页 |
·鞭毛的结构和功能 | 第20-21页 |
·鞭毛运动的调节 | 第21页 |
·Ⅳ型菌毛的结构及组装 | 第21-22页 |
·Ⅳ型菌毛的运动机理 | 第22-23页 |
·细菌蹭行运动的调节 | 第23-25页 |
■6 铜绿假单胞菌基因组信息 | 第25-28页 |
·P.aeruginosa具有多个趋化作用系统 | 第25-27页 |
·P.aeruginosa有多个菌毛蛋白类似物(pilin-like)基因 | 第27-28页 |
■7 Mu转座酶复合物技术 | 第28-29页 |
■8 生物被膜形成相关基因的研究意义及本文的目的 | 第29-31页 |
·研究意义 | 第29-30页 |
·本文的目的 | 第30-31页 |
第二章 铜绿假单胞菌Mu转座突变文库的构建 | 第31-46页 |
■1 材料与方法 | 第31-36页 |
·实验材料,酶和试剂及主要仪器 | 第31-32页 |
·菌株PA68 16S rDNA的克隆及测序 | 第32-34页 |
·PA68电转化条件的优化 | 第34-35页 |
·PA68转座突变文库的构建 | 第35-36页 |
■2 结果 | 第36-44页 |
·菌株鉴定 | 第36-38页 |
·P.aeruginosa质粒电转化的最佳条件 | 第38-42页 |
·Mu转座酶复合物转化P.aeruginosa的研究 | 第42-44页 |
■3 讨论 | 第44-46页 |
第三章 铜绿假单胞菌鞭毛和Ⅳ型菌毛运动相关基因的研究 | 第46-62页 |
■1 材料与方法 | 第46-51页 |
·实验材料、酶和试剂及主要分析软件 | 第46页 |
·鞭毛运动或Ⅳ型菌毛运动缺陷型突变子的筛选 | 第46-47页 |
·转座子插入位点侧翼序列的克隆及测序 | 第47-49页 |
·Southern杂交 | 第49-51页 |
■2 结果 | 第51-59页 |
·P.aeruginosa运动能力的检测结果 | 第51-53页 |
·人工Mu转座子插入位置两侧序列的克隆 | 第53页 |
·人工Mu转座子插入基因组中的遗传位置定位 | 第53页 |
·Mu转座子单点插入的确认 | 第53-59页 |
■3 讨论 | 第59-62页 |
第四章 PA0171和PA1822基因功能的研究 | 第62-90页 |
■1 材料与方法 | 第62-67页 |
·实验材料、酶和试剂及主要仪器和分析软件 | 第62-63页 |
·引物的设计与合成 | 第63-64页 |
·PCR扩增 | 第64页 |
·质粒的构建 | 第64-66页 |
·电转化 | 第66页 |
·鞭毛和Ⅳ型菌毛的电镜观察 | 第66-67页 |
■2 结果 | 第67-87页 |
·PA68的PA0171和PA1822基因的测序结果及序列比对 | 第67-70页 |
·遗传互补实验 | 第70-75页 |
·同源重组实验 | 第75-86页 |
·鞭毛和Ⅳ型菌毛的电镜观察 | 第86-87页 |
■3 讨论 | 第87-90页 |
小结 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-104页 |
附录1 缩略词表 | 第104-105页 |
附录2 pUC18和pDN18的质粒图谱 | 第105-106页 |
附录3 在学期间发表的论文 | 第106-107页 |
致谢 | 第107页 |