| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 油菜抗菌核病研究进展 | 第11-13页 |
| ·油菜抗菌核病的遗传特点 | 第11页 |
| ·油菜抗菌核病机制 | 第11-12页 |
| ·油菜抗菌核病的鉴定方法 | 第12页 |
| ·油菜菌核病抗性改良的方法与策略 | 第12-13页 |
| 2 基因工程在油菜改良中的应用 | 第13-15页 |
| ·品质改良 | 第13页 |
| ·抗除草剂转基因油菜 | 第13-14页 |
| ·抗病转基因油菜 | 第14页 |
| ·抗虫转基因油菜 | 第14页 |
| ·基因工程技术在油菜杂种优势上的利用 | 第14页 |
| ·油菜作为生物反应器生产工业原料 | 第14-15页 |
| 3 植物抗真菌病害基因工程的策略及研究进展 | 第15-17页 |
| ·导入植物自身的抗病基因 | 第15页 |
| ·导入植物防卫反应基因 | 第15-16页 |
| ·“无毒基因发-抗性基因双因子”共转化策略 | 第16页 |
| ·真菌酶、毒素抑制剂基因 | 第16-17页 |
| ·harpins蛋白基因的应用 | 第17页 |
| ·草酸氧化酶和葡萄糖氧化酶 | 第17页 |
| ·抗真菌多肽 | 第17页 |
| 4 油菜抗真菌病害基因工程研究进展及存在的问题 | 第17-19页 |
| ·油菜抗真菌病害基因工程研究进展 | 第17-18页 |
| ·油菜抗真菌病害基因工程研究存在的问题 | 第18-19页 |
| 5 本研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 甘蓝型杂交油菜亲本游离小孢子的双价基因的遗传转化 | 第20-30页 |
| 1 前言 | 第20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-25页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·甘蓝型杂交油菜亲本游离小孢子培养体系的建立 | 第21页 |
| ·农杆菌的培养 | 第21页 |
| ·小孢子与农杆菌共培 | 第21页 |
| ·抗性油菜单倍体小植株的再生 | 第21-22页 |
| ·转基因油菜的分子生物学检测 | 第22-25页 |
| ·油菜基因组DNA的提取 | 第22页 |
| ·转基因油菜PCR检测 | 第22-23页 |
| ·PCR-Southern杂交分析 | 第23-25页 |
| ·探针的制备 | 第23页 |
| ·Southern真空转膜 | 第23-24页 |
| ·DNA分子杂交 | 第24页 |
| ·杂交后洗膜 | 第24页 |
| ·免疫检测 | 第24-25页 |
| ·转基因油菜单倍体植株的二倍体化 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-28页 |
| ·根癌农杆菌与游离小孢子共培养 | 第25页 |
| ·农杆菌浓度对小孢子成胚的影响 | 第25-26页 |
| ·共培养时间对小孢子成胚的影响 | 第26页 |
| ·羧苄青霉素对小孢子成胚的影响 | 第26页 |
| ·抗性单倍体植株的形成 | 第26-27页 |
| ·抗性植株的生物学检测 | 第27-28页 |
| ·转基因双单倍体植株种子的获得 | 第28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 甘蓝型杂交油菜亲本以子叶柄为受体的双价基因遗传转化及其抗菌核病的研究 | 第30-47页 |
| 1 前言 | 第30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-34页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·农杆菌和植物表达载体 | 第30-31页 |
| ·培养基及主要生化试剂 | 第31页 |
| ·农杆菌介导的甘蓝型油菜子叶柄的遗传转化 | 第31-33页 |
| ·农杆菌培养 | 第31-32页 |
| ·农杆菌悬浮培养基的比较 | 第32页 |
| ·农杆菌处理菌液浓度与其侵染 | 第32页 |
| ·外植体在农杆菌菌液中处理时间 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌Vir区基因活化物作用的比较 | 第32页 |
| ·共培养温度与农杆菌侵染 | 第32页 |
| ·不同基因型材料的遗传转化 | 第32-33页 |
| ·转基因油菜的分子生物学检测 | 第33页 |
| ·转基因植株的抗病性鉴定 | 第33-34页 |
| ·转基因油菜离体叶接种菌核病菌丝鉴定 | 第33-34页 |
| ·田间自然侵染鉴定 | 第34页 |
| ·转基因植株后代遗传分析及转基因纯合株系的获得 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-43页 |
| ·农杆菌介导的甘蓝型油菜子叶柄的遗传转化体系的建立 | 第34-37页 |
| ·农杆菌悬浮培养基的比较 | 第34页 |
| ·外植体在农杆菌菌液中浸泡时间对转化频率的影响 | 第34-35页 |
| ·不同浓度的农杆菌对转化频率的影响 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌Vir区基因活化物作用的比较 | 第36页 |
| ·共培养温度对农杆菌侵染力的影响 | 第36页 |
| ·不同基因型对转化率的影响 | 第36-37页 |
| ·子叶柄转化Kan抗性植株的获得 | 第37页 |
| ·抗性植株的分子生物学检测 | 第37-39页 |
| ·转基因植株菌核病抗性鉴定 | 第39-41页 |
| ·转基因油菜菌核病接种试验 | 第39-40页 |
| ·转基因油菜菌核病田间自然发病鉴定 | 第40-41页 |
| ·转基因油菜后代的遗传分析及转基因纯合株系的获得 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·油菜遗传转化中存在的几个问题 | 第43-45页 |
| ·Kan喷施技术的研究 | 第45页 |
| ·转基因植株的抗病性研究 | 第45页 |
| ·转基因植物抗病性检测研究 | 第45页 |
| ·抗病策略与抗病育种 | 第45-47页 |
| 第四章 转基因油菜中几种重要防御酶活性变化规律研究 | 第47-54页 |
| 1 前言 | 第47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-50页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·菌核病菌核培养与接种 | 第47页 |
| ·取样 | 第47-48页 |
| ·试剂的配制 | 第48页 |
| ·酶活性的测定 | 第48-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-52页 |
| ·PAL活性变化 | 第50页 |
| ·POD活性变化 | 第50页 |
| ·PPO活性变化 | 第50-51页 |
| ·外切几丁质酶活性变化 | 第51页 |
| ·β-1，3-葡聚糖酶活性变化 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 总结与思考 | 第54-56页 |
| 1 本研究的主要实验结果及其意义 | 第54-55页 |
| 2 油菜抗真病害基因工程研究的几点思考 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
