| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-39页 |
| ·新城疫病毒的一般特征及致病的分子基础 | 第16-25页 |
| ·NDV的分类地位 | 第16页 |
| ·NDV的形态、化学组成及基因组特征 | 第16-17页 |
| ·NDV的生物学活性 | 第17页 |
| ·NDV的结构蛋白特征 | 第17-22页 |
| ·NDV致病性及其致病的分子基础 | 第22-24页 |
| ·NDV的基因型 | 第24-25页 |
| ·抗新城疫病毒感染的免疫应答及疫苗应用现状 | 第25-30页 |
| ·鸡抗新城疫病毒免疫应答 | 第25-29页 |
| ·疫苗免疫现状 | 第29-30页 |
| ·抗原表位研究进展 | 第30-39页 |
| ·抗原表位概述 | 第30-31页 |
| ·B细胞抗原表位 | 第31-35页 |
| ·T细胞表位 | 第35-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-49页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·病毒 | 第39页 |
| ·鸡胚和鸡 | 第39页 |
| ·菌种与质粒 | 第39页 |
| ·CD4、CD8分子单克隆抗体及FITC标记的兔抗鼠IgG | 第39页 |
| ·鼠抗NDV La Sota、V4株多克隆抗体 | 第39页 |
| ·辣根过氧化物酶(HRP)标记的IgG抗体 | 第39页 |
| ·ELISA试验用抗原及血清 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-49页 |
| ·NDV La Sota与V4株免疫鸡CD4+T、CD8+T细胞亚群动态变化比较 | 第40-41页 |
| ·NDV La Sota、V4株F蛋白B细胞与T细胞抗原优势表位预测 | 第41-42页 |
| ·NDV RNA的提取 | 第42页 |
| ·NDV La Sota株F基因的RT-PCR扩增、克隆与序列测定 | 第42-44页 |
| ·La Sota株与V4株F蛋白抗原优势表位cDNA片段的克隆、筛选与鉴定 | 第44-45页 |
| ·小分子多肽SDS-PAGE电泳方法的建立 | 第45-46页 |
| ·NDV La Sota、V4株F蛋白预测的抗原优势表位的表达 | 第46页 |
| ·表达多肽的溶解性试验 | 第46页 |
| ·Ni-NTA胶纯化表达的多肽 | 第46-47页 |
| ·Western Blot检测多肽的B细胞表位活性 | 第47页 |
| ·纯化多肽的免疫原性及T细胞表位活性检测 | 第47-49页 |
| 3 试验结果 | 第49-76页 |
| ·NDV LA SOTA与V4株免疫及免疫攻毒鸡CD4+T、CD8+T细胞亚群动态变化比较 | 第49-55页 |
| ·SPF鸡外周血和脾脏中CD4~-T、CD8~-T细胞动态变化 | 第49-50页 |
| ·La Sota、V4免疫及攻毒鸡外周血中CD4+T细胞数量变化 | 第50页 |
| ·La Sota、V4免疫及攻毒鸡脾脏中CD4+T细胞数量变化 | 第50页 |
| ·La Sota、V4免疫及攻毒鸡外周血中CD8+T细胞的变化 | 第50页 |
| ·La Sota、V4免疫及攻毒鸡脾脏中CD8+T细胞数量变化 | 第50-55页 |
| ·新城疫LA SOTA与V4株F蛋白B细胞抗原表位、T细胞抗原表位预测分析 | 第55-60页 |
| ·NDV LA SOTA株F基因的RT-PCR扩增与克隆 | 第60页 |
| ·NDV LA SOTA株与V4株F蛋白预测抗原表位cDNA的克隆与筛选 | 第60-70页 |
| ·小分子多肽SDS-PAGE电泳分析方法的建立 | 第70-71页 |
| ·胶配制方法及电泳缓冲体系的确立 | 第70-71页 |
| ·电泳上样量确立 | 第71页 |
| ·电泳条件的确立 | 第71页 |
| ·染色条件的确定 | 第71页 |
| ·NDV LA SOTA、V4株F蛋白预测的抗原优势表位的表达 | 第71页 |
| ·表达多肽的溶解性试验 | 第71页 |
| ·NI-NTA胶对表达多肽的纯化结果 | 第71-73页 |
| ·多肽的B细胞表位活性检测结果 | 第73-74页 |
| ·纯化多肽免疫原性的检测 | 第74页 |
| 3-11 IFN-ΓMRNA表达量的检测 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-83页 |
| ·NDV LA SOTA与V4株免疫及免疫攻毒鸡CD4+T、CD8+T细胞亚群动态变化比较 | 第76-77页 |
| ·新城疫LA SOTA与V4株F蛋白B细胞抗原表位、T细胞抗原表位的预测分析 | 第77-79页 |
| ·NDV LA SOTA株与V4株F蛋白抗原优势表位cDNA的克隆与筛选 | 第79页 |
| ·小分子多肽SDS-PAGE电泳分析方法的建立 | 第79-80页 |
| ·NDV LA SOTA株与V4株F蛋白抗原优势表位的表达、纯化与抗原性鉴定 | 第80-81页 |
| ·LA SOTA P5、V4 P5纯化多肽的免疫原性初步研究 | 第81-82页 |
| ·LA SOTA P5、V4 P5纯化多肽的T细胞表位活性检测 | 第82-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-97页 |
| 附录A 试验所用试剂的配制 | 第97-102页 |
| 附录B 试验用V4 F基因的核苷酸序列 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 作者简介 | 第104页 |
