| 致谢 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分 实验研究 | 第15-58页 |
| 1、 大鼠下丘脑、垂体和卵巢中Leptin长型受体mRNA的表达及其定位 | 第15-25页 |
| 1．1 材料与方法 | 第15-16页 |
| 1．1．1 实验动物 | 第15页 |
| 1．1．2 组织取材、固定和切片 | 第15页 |
| 1．1．3 探针的制备 | 第15-16页 |
| 1．1．4 原位杂交程序 | 第16页 |
| 1．1．5 图象处理 | 第16页 |
| 1．2 结果 | 第16-22页 |
| 1．2．1 大鼠下丘脑中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第16-19页 |
| 1．2．2 大鼠垂体中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第19-20页 |
| 1．2．3 大鼠卵巢中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第20-22页 |
| 1．3 讨论 | 第22-25页 |
| 1．3．1 大鼠下丘脑中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第22页 |
| 1．3．2 大鼠垂体中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第22-23页 |
| 1．3．3 大鼠卵巢中Leptin长型受体mRNA的表达及其分布定位 | 第23-24页 |
| 1．4 结论 | 第24-25页 |
| 2、 地高辛标记核酸原位杂交结果的数量化处理方法 | 第25-34页 |
| 2．1 模型与方法 | 第25-26页 |
| 2．1．1 图片像素数的确定 | 第25页 |
| 2．1．2 特定色阶下像素数的确定 | 第25-26页 |
| 2．1．3 阳性反应色阶阈值的确定 | 第26页 |
| 2．1．4 原位杂交结果图片中阳性反应色阶的积分光密度确定 | 第26页 |
| 2．2 实例分析 | 第26-32页 |
| 2．2．1 材料与方法 | 第26-27页 |
| 2．2．2 结果与分析 | 第27-32页 |
| 2．2．2．1 大鼠下丘脑弓状核内Ob-Rb mRNA表达强度 | 第27-30页 |
| 2．2．2．2 大鼠垂体前叶内Ob-Rb mRNA表达强度 | 第30-32页 |
| 2．3 讨论 | 第32-33页 |
| 2．3．1 关于地高辛标记核酸原位杂交结果的数量化处理方法 | 第32页 |
| 2．3．2 关于各组大鼠下丘脑内Ob-Rb mRNA定量分析 | 第32页 |
| 2．3．3 关于各组大鼠垂体前叶内Ob-Rb mRNA定量分析 | 第32-33页 |
| 2．4 结论 | 第33-34页 |
| 3、 脑室注射Leptin对大鼠下丘脑POMC、NPY、GnRH、Ob-R mRNA及垂体LH和GH mRNA表达的影响 | 第34-58页 |
| 3．1 材料与方法 | 第34-38页 |
| 3．1．1 实验动物 | 第34页 |
| 3．1．2 药品与试剂 | 第34页 |
| 3．1．3 动物处理与取样 | 第34页 |
| 3．1．4 总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 3．1．5 PCR引物的设计与合成 | 第35-36页 |
| 3．1．6 RT-PCR扩增条件的建立 | 第36页 |
| 3．1．6．1 20μl反应体系 | 第36页 |
| 3．1．6．2 PCR扩增反应体系 | 第36页 |
| 3．1．6．3 PCR程序 | 第36页 |
| 2．1．7 RT-PCR产物的定量分析 | 第36-37页 |
| 3．1．8 统计学分析 | 第37-38页 |
| 3．2 结果与分析 | 第38-52页 |
| 3．2．1 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑POMC mRNA表达的影响 | 第38-41页 |
| 3．2．1．1 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑POMC、Ob-R和β-Actin基因表达水平 | 第38-39页 |
| 3．2．1．2 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑POMC、Ob-R和β-Actin基因表达的定量分析 | 第39-41页 |
| 3．2．2 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑NPY mRNA表达的影响 | 第41-44页 |
| 3．2．2．1 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑NPY、Ob-R和β-Actin基因表达水平 | 第41页 |
| 3．2．2．2 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑NPY、Ob-R和β-Actin基因表达的定量分析 | 第41-44页 |
| 3．2．3 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）mRNA表达的影响 | 第44-47页 |
| 3．2．3．1 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑GnRH、Ob-R和β-Actin基因表达水平 | 第44-45页 |
| 3．2．3．2 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑GnRH、Ob-R和β-Actin基因表达的定量分析 | 第45-47页 |
| 3．2．4 侧脑室注射Leptin对大鼠垂体促性腺激素（LH）mRNA表达的影响 | 第47-49页 |
| 3．2．4．1 侧脑室注射Leptin后大鼠垂体LH基因表达水平 | 第47页 |
| 3．2．4．2 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑LH基因表达的定量分析 | 第47-49页 |
| 3．2．5 侧脑室注射Leptin对大鼠垂体生长激素（GH）mRNA表达的影响 | 第49-52页 |
| 3．2．5．1 侧脑室注射Leptin后大鼠垂体GH基因表达水平 | 第49-50页 |
| 3．2．5．2 侧脑室注射Leptin后大鼠下丘脑GH基因表达的定量分析 | 第50-52页 |
| 3．3 讨论 | 第52-57页 |
| 3．3．1 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑POMC mRNA表达的影响 | 第52-53页 |
| 3．3．2 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑NPY mRNA表达的影响 | 第53-54页 |
| 3．3．3 侧脑室注射Leptin对大鼠下丘脑GnRH mRNA表达的影响 | 第54-55页 |
| 3．3．4 侧脑室注射Leptin对大鼠垂体促性腺激素（LH）mRNA表达的影响 | 第55-56页 |
| 3．3．5 侧脑室注射Leptin对大鼠垂体生长激素（GH）mRNA表达的影响 | 第56-57页 |
| 3．4 结论 | 第57-58页 |
| 第二部分 文献综述 | 第58-88页 |
| 1、 肥胖基因（Ob基因） | 第58-59页 |
| 2、 Leptin及其调控 | 第59页 |
| 3、 Leptin受体 | 第59-61页 |
| 3．1 Leptin受体的结构和功能 | 第60页 |
| 3．2 Leptin受体的信号转导途径 | 第60页 |
| 3．3 Leptin受体基因研究现状 | 第60-61页 |
| 4、 Leptin对摄食的调节 | 第61-67页 |
| 4．1 机体脂肪的储备信号与摄食的调节 | 第62-63页 |
| 4．2 与摄食有关的中枢 | 第63页 |
| 4．3 下丘脑中传递与进食有关信号的神经元 | 第63-67页 |
| 5、 Leptin对生殖功能的影响 | 第67-71页 |
| 5．1 Leptin对下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）分泌的影响 | 第68-69页 |
| 5．2 Leptin对垂体黄体生成素（LH）和卵泡生成素（FSH）释放的影响 | 第69-70页 |
| 5．3 Leptin对卵巢性和睾丸性类固醇激素的影响 | 第70-71页 |
| 6、 Leptin与下丘脑-垂体-甲状腺轴的相互作用 | 第71-73页 |
| 6．1 Leptin对HPTA的调节作用 | 第71-72页 |
| 6．2 HPTA对Leptin的调节作用 | 第72-73页 |
| 7、 Leptin对生长激素的调控 | 第73-75页 |
| 7．1 Leptin对GH合成与分泌的调控 | 第73-74页 |
| 7．2 目前存在的问题 | 第74-75页 |
| 8、 Leptin对周围组织器官的作用 | 第75-79页 |
| 8．1 对胰腺的作用 | 第75-76页 |
| 8．2 对肝脏的作用 | 第76页 |
| 8．3 对骨骼肌的作用 | 第76-77页 |
| 8．4 对骨代谢的作用 | 第77-78页 |
| 8．5 对心血管系统的作用 | 第78页 |
| 8．6 对机体应激反应的作用 | 第78-79页 |
| 8．7 对胃肠道的作用 | 第79页 |
| 9、 Leptin与胎儿生长发育 | 第79-83页 |
| 9．1 脐血Leptin水平与胎儿体重的关系 | 第79-80页 |
| 9．2 Leptin在胎儿生长发育中的作用 | 第80-81页 |
| 9．3 胎儿Leptin的来源 | 第81-82页 |
| 9．4 影响胎儿Leptin水平的因素 | 第82-83页 |
| 10、 肥胖的基因（Ob）治疗的研究进展 | 第83-86页 |
| 10．1 基因治疗的载体系统 | 第83-84页 |
| 10．2 肥胖的基因治疗后机体代谢的变化 | 第84页 |
| 10．3 基因治疗对Ob基因正常大鼠的作用 | 第84-85页 |
| 10．4 Leptin cDNA转入机体后脂肪细胞的变化 | 第85页 |
| 10．5 基因治疗和Leptin蛋白应用比较 | 第85-86页 |
| 11、 Leptin应用研究前景 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-106页 |
| 英文摘要 | 第106-110页 |
| 附录一 | 第110-112页 |
| 附录二 | 第112-124页 |
