中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 综述 | 第9-15页 |
·GSTs 和 MT 的生物学性质 | 第10-12页 |
·GSTs 和 MT 的分类 | 第10-11页 |
·GSTs 和 MT 的分子结构 | 第11-12页 |
·GSTs 和 MT 的生物学功能 | 第12-13页 |
·GSTs 和 MT 的研究进展 | 第13-14页 |
·研究的目的与意义 | 第14-15页 |
第二章 近江牡蛎 GSTs 和 MT 的编码区 cDNA 克隆 | 第15-31页 |
·实验材料、仪器及试剂 | 第15-16页 |
·材料 | 第15页 |
·仪器 | 第15-16页 |
·试剂 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-18页 |
·实验取样 | 第16页 |
·实验用品的前处理 | 第16-17页 |
·RNA 的提取 | 第17页 |
·近江牡蛎 cDNA 的合成 | 第17-18页 |
·近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 编码区 cDNA 克隆 | 第18-24页 |
·引物设计 | 第18页 |
·近江牡蛎 GST-μ编码区 cDNA 克隆 | 第18-19页 |
·近江牡蛎 GST-σ编码区 cDNA 克隆 | 第19页 |
·近江牡蛎 MT 编码区 cDNA 克隆 | 第19-20页 |
·PCR 产物胶回收 | 第20-21页 |
·胶回收产物加 A 步骤 | 第21页 |
·加 A 产物与载体连接 | 第21页 |
·感受态细胞 DH5α的制备及连接产物的转化 | 第21-22页 |
·单菌落的阳性克隆检测 | 第22-24页 |
·结果 | 第24-29页 |
·RNA 提取 | 第24页 |
·GST-μ编码区 cDNA 的克隆 | 第24-25页 |
·GST-σ编码区 cDNA 的克隆 | 第25页 |
·MT 编码区 cDNA 的克隆 | 第25-26页 |
·GST-μ编码区 cDNA 及氨基酸序列比对分析 | 第26-27页 |
·GST-σ编码区 cDNA 及氨基酸序列比对分析 | 第27-28页 |
·MT 编码区 cDNA 及氨基酸序列比对分析 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
·GST-μ和 GST-σ编码区 cDNA 基因克隆 | 第29页 |
·MT 编码区 cDNA 基因克隆 | 第29-31页 |
第三章 近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 的原核表达 | 第31-55页 |
·实验材料、仪器及试剂 | 第31-34页 |
·材料 | 第31页 |
·仪器 | 第31-32页 |
·试剂 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32-34页 |
·实验方法 | 第34-42页 |
·重组质粒 pQE30/GST-μ、pQE30/ GST-σ和 pGEX-4T-1/MT 的构建 | 第34-38页 |
·pQE30/GST-μ、pQE30/ GST-σ和 pGEX-4T-1/MT 重组质粒在大肠杆菌 M15中的诱导表达 | 第38-41页 |
·GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白在不同诱导温度下的表达 | 第41页 |
·GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白在不同诱导时间下的表达 | 第41页 |
·原核表达 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白可溶性 | 第41-42页 |
·重组 GST-μ、GST-σ和 MT 蛋白 Western blotting | 第42页 |
·结果 | 第42-52页 |
·原核表达载体 pQE30/GST-μ、pQE30/ GST-σ和 pGEX-4T-1/MT 的构建 | 第42-44页 |
·近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白在大肠杆菌 M15 中的表达 | 第44-45页 |
·近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白在不同诱导温度下的表达 | 第45-47页 |
·近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白在不同诱导时间内的表达 | 第47-49页 |
·GST-μ、GST-σ和 MT 蛋白原核表达的可溶性 | 第49-50页 |
·Western blotting 分析 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白 | 第50-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
·表达载体和工程菌的选择 | 第52-53页 |
·诱导温度对近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
·诱导时间对近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白表达的影响 | 第54页 |
·IPTG 浓度对近江牡蛎 GST-μ、GST-σ和 MT 重组蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
全文总结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
研究生期间发表论文清单 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |