摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
前言 | 第8-17页 |
1 猪瘟病毒抗体分离纯化的意义 | 第8-10页 |
·猪瘟及其危害 | 第8页 |
·应用于治疗性抗体的制备 | 第8-9页 |
·应用于交叉反应的研究 | 第9-10页 |
2 抗体纯化方法的研究现状 | 第10-12页 |
·沉淀技术 | 第10页 |
·色谱技术 | 第10-12页 |
3 色谱法在分离纯化蛋白质中的应用 | 第12-15页 |
·亲和层析技术 | 第12-14页 |
·离子交换层析技术 | 第14-15页 |
4 本课题的研究意义 | 第15-17页 |
第一章 免疫亲和层析法快速纯化猪瘟病毒抗体 | 第17-31页 |
1 材料 | 第17-20页 |
·细胞株、病毒、猪血清 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·试剂配制 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-24页 |
·细胞株的培养 | 第20页 |
·病毒的培养和纯化 | 第20-21页 |
·BCA 法测定病毒蛋白浓度 | 第21-22页 |
·载体 Sepharose-4B 的活化 | 第22页 |
·纯化的猪瘟病毒抗原与活化载体的偶联 | 第22页 |
·亲和层析操作 | 第22页 |
·SDS-PAGE 检测 | 第22-24页 |
·间接 ELISA 方法的建及 ELISA 检测猪瘟抗体活性 | 第24页 |
3 实验结果与分析 | 第24-29页 |
·Sephadex G-75 分子排阻层析柱纯化病毒 | 第24-26页 |
·病毒的浓度 | 第26页 |
·亲和层析的偶联率及纯化图谱 | 第26-27页 |
·SDS-PAGE 检测纯化抗体 | 第27-28页 |
·ELISA 检测纯化抗体 | 第28-29页 |
4 小结与讨论 | 第29-31页 |
第二章 Q Sepharose~(TM)–XL 强阴离子交换色谱快速纯化猪瘟病毒抗体 | 第31-42页 |
1 材料 | 第31-33页 |
·猪瘟病毒、新西兰大白兔 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31-32页 |
·试剂配制 | 第32-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-36页 |
·动物免疫与血清收集 | 第33-34页 |
·抗体效价的测定 | 第34页 |
·Q Sepharose~(TM)–XL 强阴离子交换层析操作及 SDS-PAGE 检测 | 第34页 |
·间接 ELISA 方法检测纯化抗体(IgG)活性 | 第34-36页 |
3 实验结果与分析 | 第36-40页 |
·免疫新西兰大白兔的抗血清效价 | 第36页 |
·免疫兔血清多克隆抗体的纯化结果 | 第36-38页 |
·ELISA 检测纯化抗体 | 第38-39页 |
·纯化抗体的含量 | 第39-40页 |
4 小结与讨论 | 第40-42页 |
第三章 猪瘟病毒抗体对猪伪狂犬病毒的结合作用 | 第42-50页 |
1 材料 | 第42-43页 |
·病毒、血清及抗体 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·试剂配制 | 第42-43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-44页 |
·猪血清样品与二种病毒作用的 ELISA 测定 | 第43页 |
·兔血清样品与二种病毒作用的 ELISA 测定 | 第43-44页 |
·纯化的猪血清抗体与二种病毒作用的 ELISA 测定 | 第44页 |
·纯化的兔血清抗体与二种病毒作用的 ELISA 测定 | 第44页 |
3 实验结果与分析 | 第44-48页 |
·猪血清与猪瘟病毒/猪伪狂犬病毒作用的 ELISA 结果 | 第44-45页 |
·兔血清与猪瘟病毒/猪伪狂犬病毒作用的 ELISA 结果 | 第45-46页 |
·猪血清抗体与猪瘟病毒/猪伪狂犬病毒作用的 ELISA 结果 | 第46-47页 |
·兔血清抗体与猪瘟病毒/猪伪狂犬病毒作用的 ELISA 结果 | 第47-48页 |
4 小结和讨论 | 第48-50页 |
结论与展望 | 第50-52页 |
1 结论和创新点 | 第50-51页 |
2 展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |