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农药多簇人工抗原的免疫特异性及多残留免疫金技术

目录第1-10页
致谢第10-11页
术语和缩略语表第11-13页
摘要第13-15页
ABSTRACT第15-17页
第1章 绪论第17-47页
 1 开展农药多残留快速测定技术研究的必要性第17-23页
   ·影响食品质量安全的主要因素第17页
   ·目前我国食品质量安全的严峻形势第17-19页
   ·食品质量安全问题已经引起了国际社会和我国政府的高度重视第19-21页
   ·我国食品安全中的科技"瓶颈"制约第21-23页
   ·开展农药多残留快速测定技术研究的意义第23页
 2 农药多残留测定技术及其发展趋势第23-45页
   ·农药多残留仪器测定技术及其研究进展第24-33页
     ·样品前处理方法第25-30页
     ·检测技术第30-33页
   ·活体生物测定法在农药多残留检测中的应用研究及其进展第33-34页
     ·用家蝇检测蔬菜中的残留农药第33页
     ·用大型水蚤为试验材料监测蔬菜中农药的残留第33页
     ·用发光细菌检测农药残留第33-34页
   ·酶抑制测定方法第34-36页
     ·胆碱酯酶(ChE)抑制法第34-35页
     ·植物酯酶(Phytoesterase)抑制法第35-36页
     ·有机磷水解(Organophosphate hydrolase,OPH)法第36页
   ·农药多残留免疫快速测定技术及其研究进展第36-45页
     ·半抗原结构设计与合成第38-40页
     ·人工抗原的制备第40-41页
     ·抗体的制备及应用第41-42页
     ·免疫分析方法第42-45页
 3 选题依据第45-47页
   ·本课题得到了国家自然科学基金的资助第45-46页
   ·开展农药多残留免疫快速测定技术研究,本研究所具有扎实的研究基础第46-47页
第2章 多簇抗原的制备及其宽谱抗体的免疫应答第47-84页
 1 材料与方法第47-65页
   ·实验材料第47-51页
     ·试剂与药品第47-49页
     ·缓冲液第49-50页
     ·仪器与材料第50-51页
     ·实验动物的选择第51页
   ·实验方法第51-65页
     ·半抗原合成第51-54页
     ·多簇人工抗原(免疫原)的制备与鉴定第54-56页
     ·半抗原-载体蛋白偶连物(单簇人工抗原)的合成与鉴定第56-57页
     ·混合单簇人工抗原的制备第57页
     ·宽谱特异性多兑隆抗体的制备第57-60页
     ·宽谱特异性单克隆抗体的制备第60-62页
     ·高特异性单克隆抗体的制备第62-63页
     ·碳二亚胺法合成酶标半抗原第63页
     ·ELISA方法的建立第63-65页
 2 结果第65-77页
   ·半抗原分子的结构鉴定第65-66页
     ·毒死蜱半抗原(CHBu)的结构鉴定第65页
     ·三唑磷半抗原(THBu& THHe)的结构鉴定第65-66页
     ·克百威半抗原(BFNB)的结构鉴定第66页
     ·甲基对硫磷半抗原(MP5)的结构鉴定第66页
   ·多簇人工抗原(免疫原)结合比测定第66-67页
     ·BSA多簇抗原的结合比测定第66页
     ·HSA多簇抗原的结合比测定第66页
     ·KLH多簇抗原的结合比测定第66-67页
   ·人工抗原的合成与鉴定第67页
   ·宽谱多克隆抗血清效价测定第67-70页
   ·宽谱单克隆抗体的制备第70页
   ·四种高特异性单克隆抗体的制备第70页
   ·抗原-宽谱多抗最适工作浓度的筛选第70页
   ·宽谱多抗亲和性及检测灵敏度第70-74页
     ·直接竞争法第70-71页
     ·间接竞争法第71-74页
   ·四种单抗的亲和性和检测灵敏度第74-75页
   ·宽谱多克隆抗体的特异性第75-77页
 3 小结与讨论第77-84页
   ·小结第77-78页
   ·讨论第78-84页
第3章 农药多残留检测金标试纸条研制第84-117页
 1 材料与方法第84-95页
   ·试剂与仪器第84-85页
   ·实验方法第85-95页
     ·胶体金的制备第85页
     ·金探针的制备第85-88页
     ·金标试纸条的组装和制备材料的选择与处理第88-91页
     ·多残留检测金标试纸条的研制第91-92页
     ·金标试纸条检测结果的判断第92-93页
     ·金标试级条灵敏度测试第93页
     ·溶液pH值对试纸条检测的影响测试第93-94页
     ·总离子浓度对试纸条检测的影响测试第94页
     ·添加样品实验第94-95页
 2 结果第95-113页
   ·胶体金的制备与鉴定第95-96页
   ·胶体金标记蛋白最适pH值的确定第96页
   ·最适蛋白结合量测定第96-101页
   ·金探针溶液稳定剂配方筛选第101-103页
   ·浓缩液配方筛选结果第103页
   ·金标试纸条制备材料的选择和处理第103-107页
     ·NC膜的选择第103-104页
     ·结合垫的处理第104页
     ·工作浓度的优化第104-106页
     ·NC膜的封闭配方筛选第106-107页
   ·多残留检测金标试纸条的研制第107-110页
     ·单个农药品种试纸的开发第107-108页
     ·多条检测线试纸条的开发第108-109页
     ·利用宽谱多克隆抗体开发多残留检测金标试纸条第109-110页
   ·溶液pH值对试纸条检测的影响测试第110-111页
   ·总离子浓度对试纸条检测的影响测试第111-112页
   ·样品检测第112-113页
 3 小结与讨论第113-117页
   ·小结第113-114页
   ·讨论第114-117页
     ·胶体金溶液的制备第114-115页
     ·胶体金标记抗体第115页
     ·试纸条保护剂筛选第115-117页
第4章 农药多残留免疫速测技术研究思路之比较第117-124页
 1 几种研究思路之比较第117-122页
   ·共性结构半抗原设计思路第117-119页
   ·多簇人工抗原设计思路第119-120页
   ·抗体制备技术思路第120-122页
   ·标记模式与信号检测思路第122页
 2 不足与展望第122-124页
参考文献第124-139页
附录第139页

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