摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 引言 | 第11-24页 |
·心脏早期发育研究简述 | 第11-12页 |
·调控脊椎动物心脏发育的基因 | 第12-17页 |
·GATA | 第12-13页 |
·Nkx2.5 | 第13-14页 |
·MEF-2家族 | 第14-15页 |
·HAND基因 | 第15页 |
·BMP家族 | 第15-17页 |
·小鼠心脏的形态建成 | 第17-21页 |
·本课题的研究意义 | 第21-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-49页 |
·材料 | 第24-28页 |
·生物信息学软件 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·细胞、菌株和质粒 | 第26-28页 |
·主要实验仪器和耗材 | 第28页 |
·方法 | 第28-49页 |
·AHNAKβ全长序列的计算机分析 | 第28页 |
·用PCR反应从小鼠心脏cDNA文库中分离AHNAKβ. | 第28-32页 |
·重组质粒的构建 | 第32-34页 |
·原核细胞诱导蛋白质表达及纯化 | 第34-35页 |
·多克隆抗体的制备与纯化 | 第35-37页 |
·胚胎各组织蛋白的提取与检测 | 第37-38页 |
·酵母双杂交 | 第38-42页 |
·免疫共沉淀 | 第42页 |
·常规细胞培养及转染 | 第42-43页 |
·小鼠整胚原位杂交 | 第43-44页 |
·胚胎原位杂交预处理 | 第44页 |
·小鼠胚胎的预杂交和杂交 | 第44页 |
·胚胎杂交后的处理 | 第44-45页 |
·抗体反应后漂洗和杂交信号的免疫检测 | 第45-46页 |
·小鼠心肌细胞分离方法 | 第46-47页 |
·免疫组化 | 第47-49页 |
第三章 实验结果及其分析 | 第49-62页 |
·人类AHNAKβ基因的生物信息学分析 | 第49-53页 |
·AHNAKβ克隆和序列分析 | 第49-51页 |
·AHNAKβ与AHNAKα的剪切方式比较 | 第51-53页 |
·小鼠AHNAKβ基因的克隆 | 第53-54页 |
·AHNAKβC蛋白表达及抗体制备 | 第54-56页 |
·原核蛋白表达质粒构建 | 第54页 |
·蛋白表达及纯化 | 第54-55页 |
·AHNAKβ多克隆抗体制备 | 第55-56页 |
·AHNAKβ基因在小鼠成体中的表达 | 第56-57页 |
·AHNAKβ小鼠整体胚胎原位杂交结果 | 第57-59页 |
·AHNAKβ小鼠整体胚胎免疫组化结果 | 第59页 |
·小鼠原代培养细胞AHNAKβ的免疫荧光 | 第59页 |
·免疫电镜实验结果 | 第59-60页 |
·AHNAKβ酵母双杂交 | 第60页 |
·用免疫共沉淀分析AHNAKβ与TNNI3的相互作用 | 第60-62页 |
第四章 讨论 | 第62-64页 |
·相互作用的探讨 | 第62-63页 |
·TNNI3的功能 | 第63-64页 |
总结 | 第64页 |
展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |