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鲆鲽鱼类变态时期相关基因的克隆与分析

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-28页
 第一节 鲆鲽鱼类的变态及相关机制第13-22页
  1.动物变态类型概况第13-15页
  2.鲆鲽鱼类的变态第15-18页
     ·形态学第15-18页
       ·眼睛的偏转第15页
       ·冠状幼鳍的消长第15-16页
       ·体色的左右不对称第16页
       ·颅脑的扭转第16-17页
       ·血红细胞的变化第17页
       ·骨骼肌的变化第17-18页
       ·胃的变化第18页
     ·生态习性的变化第18页
  3.鲆鲽鱼类变态时期的划分第18-19页
  4.鲆鲽鱼类的变态机制第19-22页
     ·甲状腺激素在鲆鲽鱼类变态中的作用第19-20页
     ·甲状腺激素作用机制第20页
     ·其他激素对鲆鲽鱼类变态的影响第20-21页
     ·外源因子对鲆鲽鱼类变态的影响第21页
     ·鲆鲽鱼类变态的分子机制第21-22页
 第二节 鲆鲽杂交第22-24页
 第三节 基因筛选方法第24-28页
  1.差异显示技术第24-25页
  2.cDNA代表性差异分析第25-28页
第二章 筛选牙鲆×石鲽(Paralichthys olivaceus×Kareius bicoloratus)杂交种中与变态相关的基因第28-54页
 0.前言第28页
 1.材料第28-29页
     ·实验材料第28-29页
     ·工具酶、试剂盒和引物第29页
 2.实验方法第29-42页
   ·总RNA提取(Trizol法)第29-30页
     ·总RNA中DNA的消除第30-31页
     ·DD-RT-PCR第31-33页
     ·cDNA-RDA第33-37页
     ·目的片段的克隆,测序第37-38页
     ·Northern杂交检测片段第38-40页
     ·Northern点杂交第40页
     ·差异片段的RT-PCR验证第40-42页
 3.结果第42-51页
   ·DDRT-PCR第42-44页
   ·cDNA-RDA第44-51页
     ·RDA结果第44-45页
     ·WAVE系统检测杂交产物第45-46页
     ·差减库片段的回收与测序第46-47页
     ·Northern点杂交第47-48页
     ·Northern杂交结果第48-51页
 4.讨论第51-54页
第三章 肌酸激酶(creastinekinase,CK)的克隆与牙鲆变态时期的表达研究第54-72页
 1.材料第54-55页
 2.方法第55-62页
     ·RNA提取第55页
   ·cDNA的合成第55页
   ·RDA第55-56页
   ·特异片段的克隆第56-57页
   ·基因全长cDNA序列的获得第57-58页
     ·整体原位杂交第58-60页
     ·实时定量PCR(Real-time PCR)第60-62页
 3.结果第62-69页
     ·RDA分离得到的CK-M1序列第62页
     ·牙鲆CK-M1全序列的克隆第62-64页
     ·整体原位杂交第64-67页
     ·实时定量PCR第67-69页
 4.讨论第69-72页
第四章 牙鲆胰蛋白酶原前体2 Trypsinogen 2 precursor(TR2P)的克隆与表达初步分析第72-87页
 1.材料第73-74页
 2.实验方法第74-76页
     ·RNA提取第74页
     ·cDNA的合成第74页
     ·RDA第74页
     ·特异片段的克隆第74-75页
     ·基因全长cDNA序列的获得第75页
     ·实时定量PCR(Real-time PCR)第75-76页
 3.结果第76-85页
     ·RDA筛选得到的TR2P序列第76-77页
     ·TR2P在牙鲆和石鲽中的全长扩增第77-81页
     ·牙鲆TR2P在各个组织和变态期间的实时定量PCR第81-83页
     ·牙鲆、石鲽与杂交子代TR2P之间的比较第83-85页
 4.讨论第85-87页
参考文献第87-97页
致谢第97-99页
个人简历第99-100页
发表及待发表的学术论文第100页

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