摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
第一节 鲆鲽鱼类的变态及相关机制 | 第13-22页 |
1.动物变态类型概况 | 第13-15页 |
2.鲆鲽鱼类的变态 | 第15-18页 |
·形态学 | 第15-18页 |
·眼睛的偏转 | 第15页 |
·冠状幼鳍的消长 | 第15-16页 |
·体色的左右不对称 | 第16页 |
·颅脑的扭转 | 第16-17页 |
·血红细胞的变化 | 第17页 |
·骨骼肌的变化 | 第17-18页 |
·胃的变化 | 第18页 |
·生态习性的变化 | 第18页 |
3.鲆鲽鱼类变态时期的划分 | 第18-19页 |
4.鲆鲽鱼类的变态机制 | 第19-22页 |
·甲状腺激素在鲆鲽鱼类变态中的作用 | 第19-20页 |
·甲状腺激素作用机制 | 第20页 |
·其他激素对鲆鲽鱼类变态的影响 | 第20-21页 |
·外源因子对鲆鲽鱼类变态的影响 | 第21页 |
·鲆鲽鱼类变态的分子机制 | 第21-22页 |
第二节 鲆鲽杂交 | 第22-24页 |
第三节 基因筛选方法 | 第24-28页 |
1.差异显示技术 | 第24-25页 |
2.cDNA代表性差异分析 | 第25-28页 |
第二章 筛选牙鲆×石鲽(Paralichthys olivaceus×Kareius bicoloratus)杂交种中与变态相关的基因 | 第28-54页 |
0.前言 | 第28页 |
1.材料 | 第28-29页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·工具酶、试剂盒和引物 | 第29页 |
2.实验方法 | 第29-42页 |
·总RNA提取(Trizol法) | 第29-30页 |
·总RNA中DNA的消除 | 第30-31页 |
·DD-RT-PCR | 第31-33页 |
·cDNA-RDA | 第33-37页 |
·目的片段的克隆,测序 | 第37-38页 |
·Northern杂交检测片段 | 第38-40页 |
·Northern点杂交 | 第40页 |
·差异片段的RT-PCR验证 | 第40-42页 |
3.结果 | 第42-51页 |
·DDRT-PCR | 第42-44页 |
·cDNA-RDA | 第44-51页 |
·RDA结果 | 第44-45页 |
·WAVE系统检测杂交产物 | 第45-46页 |
·差减库片段的回收与测序 | 第46-47页 |
·Northern点杂交 | 第47-48页 |
·Northern杂交结果 | 第48-51页 |
4.讨论 | 第51-54页 |
第三章 肌酸激酶(creastinekinase,CK)的克隆与牙鲆变态时期的表达研究 | 第54-72页 |
1.材料 | 第54-55页 |
2.方法 | 第55-62页 |
·RNA提取 | 第55页 |
·cDNA的合成 | 第55页 |
·RDA | 第55-56页 |
·特异片段的克隆 | 第56-57页 |
·基因全长cDNA序列的获得 | 第57-58页 |
·整体原位杂交 | 第58-60页 |
·实时定量PCR(Real-time PCR) | 第60-62页 |
3.结果 | 第62-69页 |
·RDA分离得到的CK-M1序列 | 第62页 |
·牙鲆CK-M1全序列的克隆 | 第62-64页 |
·整体原位杂交 | 第64-67页 |
·实时定量PCR | 第67-69页 |
4.讨论 | 第69-72页 |
第四章 牙鲆胰蛋白酶原前体2 Trypsinogen 2 precursor(TR2P)的克隆与表达初步分析 | 第72-87页 |
1.材料 | 第73-74页 |
2.实验方法 | 第74-76页 |
·RNA提取 | 第74页 |
·cDNA的合成 | 第74页 |
·RDA | 第74页 |
·特异片段的克隆 | 第74-75页 |
·基因全长cDNA序列的获得 | 第75页 |
·实时定量PCR(Real-time PCR) | 第75-76页 |
3.结果 | 第76-85页 |
·RDA筛选得到的TR2P序列 | 第76-77页 |
·TR2P在牙鲆和石鲽中的全长扩增 | 第77-81页 |
·牙鲆TR2P在各个组织和变态期间的实时定量PCR | 第81-83页 |
·牙鲆、石鲽与杂交子代TR2P之间的比较 | 第83-85页 |
4.讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
个人简历 | 第99-100页 |
发表及待发表的学术论文 | 第100页 |