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CDV、CPV、CAV三联DNA疫苗的制备及实验免疫研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-30页
   ·犬瘟热研究进展第11-16页
     ·附着或血凝(H)蛋白及其基因第12-13页
     ·CD 的疫苗研制第13-16页
   ·犬细小病毒的研究进展第16-23页
     ·CPV 的起源及进化第17-18页
     ·CPV 流行情况第18-19页
     ·CPV 和 FPV 核酸序列、蛋白氨基酸序列的比较第19-21页
     ·CPV 疫苗的研究现状第21-23页
   ·犬腺病毒研究进展第23-30页
     ·CAV 免疫研究进展第23-27页
     ·纤突结构研究进展第27-30页
2 材料与方法第30-43页
   ·材料第30-34页
     ·毒株和质粒第30页
     ·实验动物及细胞第30页
     ·主要试剂第30页
     ·工具酶第30页
     ·仪器设备第30-31页
     ·实验耗材第31页
     ·试剂配制第31-34页
   ·技术路线第34-35页
   ·方法第35-43页
     ·病毒扩增第35页
     ·引物设计第35页
     ·CPV DNA 的制备第35-36页
     ·CAV-2 病毒 DNA 的制备第36页
     ·CDV 总 RNA 的抽提第36-37页
     ·PCR 扩增 CPV VP1 基因第37页
     ·PCR 扩增 CAV-2 F 基因第37-38页
     ·RT-PCR 扩增 CDV H 基因第38页
     ·PCR 产物的回收第38页
     ·连接第38-39页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第39页
     ·连接产物的转化第39页
     ·转化菌落的快速鉴定第39-40页
     ·重组质粒DNA 的小量制备第40页
     ·重组质粒的酶切鉴定第40页
     ·插入片段的序列测定第40页
     ·免疫质粒的构建和序列测定第40-41页
     ·免疫质粒的纯化第41-42页
     ·免疫第42页
     ·抗体分析第42-43页
     ·攻毒第43页
3 结果第43-55页
   ·免疫质粒的构建第43-45页
     ·CDV H 基因免疫质粒的构建第43-44页
     ·CPV VP1 片段的 PCR 扩增、克隆及重组质粒的酶切鉴定第44页
     ·CAV 纤突基因的 PCR 扩增、克隆及重组质粒的酶切鉴定第44-45页
   ·片段的序列测定及比较第45-52页
     ·CDV H 基因的序列及分析第45-48页
     ·CPV VP1 基因的序列及分析第48-50页
     ·CAV F 基因的序列及分析第50-52页
   ·抗体效价的测定第52-53页
     ·CDV 中和抗体效价的测定第52页
     ·CPV 血凝抑制效价测定第52-53页
     ·CAV 中和抗体效价的测定第53页
   ·攻毒实验第53-55页
4 讨论第55-59页
   ·免疫质粒的纯化第55页
   ·免疫佐剂的选择第55-56页
   ·接种方法及剂量的选择第56-57页
   ·载体选择第57页
   ·基因疫苗的优缺点第57-59页
   ·抗体效价第59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-69页
个人简历第69-70页
在读期间发表的文章第70-72页
致谢第72页

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