| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 一 文献综述 | 第13-33页 |
| 1 ATP信号研究进展 | 第13-21页 |
| ·动物细胞外ATP的生理功能和信号转导机制 | 第13-14页 |
| ·植物细胞外ATP的生理作用及其信号转导 | 第14-21页 |
| 2 气孔运动中的信号研究进展 | 第21-25页 |
| ·保卫细胞中异三聚体G蛋白介导的信号转导途径 | 第22-23页 |
| ·气孔运动中的ROS信号 | 第23页 |
| ·钙信使在气孔运动中的作用 | 第23-25页 |
| 3 植物异三聚体G蛋白研究进展 | 第25-28页 |
| ·G蛋白的种类 | 第25页 |
| ·异三聚体G蛋白的结构及活化机制 | 第25-26页 |
| ·植物异三聚体G蛋白信号组分 | 第26页 |
| ·异三聚体G蛋白各信号组分在植物细胞信号转导中的作用 | 第26-28页 |
| 4 活性氧信号研究进展 | 第28-33页 |
| ·活性氧的种类和特性 | 第28-29页 |
| ·植物体内活性氧的产生 | 第29-30页 |
| ·植物体内活性氧的清除 | 第30-31页 |
| ·植物体内活性氧信号转导及其调控 | 第31-33页 |
| 二 材料和方法 | 第33-41页 |
| 1 实验材料 | 第33页 |
| 2 试剂 | 第33页 |
| 3 实验方法 | 第33-41页 |
| ·拟南芥种植方法 | 第33-34页 |
| ·表皮条生物分析 | 第34页 |
| ·拟南芥保卫细胞胞内钙离子浓度变化的测定 | 第34-35页 |
| ·激光共聚焦显微技术(CLSM)测定保卫细胞内ROS的变化 | 第35页 |
| ·RNA的提取及半定量检测基因转录本的表达 | 第35-37页 |
| ·引物合成 | 第37页 |
| ·转aequorin基因全过程 | 第37-41页 |
| 三 结果与分析 | 第41-63页 |
| 1 实验所用突变体材料的遗传背景鉴定 | 第41-42页 |
| ·wGα、cGα的RT-PCR鉴定 | 第41页 |
| ·gpα1-1、gpα1-2突变体的PCR鉴定 | 第41页 |
| ·atrbohD/F突变体的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 2 细胞外ATP在气孔运动过程中的作用 | 第42-48页 |
| ·细胞外ATP对拟南芥气孔运动的影响 | 第42-44页 |
| ·细胞外ATP对不同生态型拟南芥气孔运动的影响 | 第44-45页 |
| ·不同形式eATP对气孔运动的影响 | 第45页 |
| ·ATP结构类似物对气孔运动的影响 | 第45-46页 |
| ·腺苷三磷酸结构完整性及不同结构核苷磷酸分子对气孔开度的影响 | 第46-47页 |
| ·内源eATP在气孔运动中的作用 | 第47-48页 |
| 3 异三聚体G蛋白α亚基介导细胞外ATP诱导气孔开放的过程 | 第48-49页 |
| 4 ROS对气孔运动的影响 | 第49-54页 |
| ·不同浓度ROS(氯化铜+抗坏血酸)对气孔运动的影响 | 第49页 |
| ·ROS在细胞外ATP诱导气孔开放过程中的作用 | 第49-51页 |
| ·DPI和DTT在细胞外ATP诱导气孔开放中的作用 | 第51-52页 |
| ·AtrbohD、AtrbohF参与eATP诱导气孔开放的过程 | 第52-53页 |
| ·细胞外ATP促进保卫细胞ROS升高 | 第53页 |
| ·NADPH氧化酶参与细胞外ATP诱导保卫细胞ROS产生的过程 | 第53-54页 |
| 5 异三聚体G蛋白α亚基对eATP诱导保卫细胞内ROS升高过程影响 | 第54-56页 |
| 6 aequorin基因的克隆及其在拟南芥中的转化 | 第56-59页 |
| ·拟南芥aequorin基因PCR结果 | 第56-57页 |
| ·拟南芥aequorin基因的克隆和序列分析 | 第57页 |
| ·拟南芥aequorin基因植物表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·拟南芥转基因植株的获得 | 第58页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第58-59页 |
| 7 细胞外ATP对拟南芥叶片细胞内钙离子浓度的影响 | 第59-63页 |
| ·eATP对拟南芥Col叶片细胞内钙离子浓度的影响 | 第59-61页 |
| ·eATP异三聚体G蛋白相关突变体叶片细胞内钙离子浓度的影响 | 第61-63页 |
| 四 讨论与结论 | 第63-68页 |
| 1 细胞外ATP诱导拟南芥气孔开放 | 第63-64页 |
| 2 Gα参与细胞外ATP诱导气孔开放的过程 | 第64页 |
| 3 ROS参与eATP诱导气孔开放的过程 | 第64-65页 |
| 4 Gα可能参与细胞外ATP诱导胞内ROS升高的过程 | 第65-66页 |
| 5 eATP对细胞内Ca~(2+)浓度的影响 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间论文及论著发表 | 第79页 |