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异三聚体G蛋白和ROS在细胞外ATP调控拟南芥气孔运动中的作用

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第8-9页
目录第9-12页
引言第12-13页
一 文献综述第13-33页
 1 ATP信号研究进展第13-21页
   ·动物细胞外ATP的生理功能和信号转导机制第13-14页
   ·植物细胞外ATP的生理作用及其信号转导第14-21页
 2 气孔运动中的信号研究进展第21-25页
   ·保卫细胞中异三聚体G蛋白介导的信号转导途径第22-23页
   ·气孔运动中的ROS信号第23页
   ·钙信使在气孔运动中的作用第23-25页
 3 植物异三聚体G蛋白研究进展第25-28页
   ·G蛋白的种类第25页
   ·异三聚体G蛋白的结构及活化机制第25-26页
   ·植物异三聚体G蛋白信号组分第26页
   ·异三聚体G蛋白各信号组分在植物细胞信号转导中的作用第26-28页
 4 活性氧信号研究进展第28-33页
   ·活性氧的种类和特性第28-29页
   ·植物体内活性氧的产生第29-30页
   ·植物体内活性氧的清除第30-31页
   ·植物体内活性氧信号转导及其调控第31-33页
二 材料和方法第33-41页
 1 实验材料第33页
 2 试剂第33页
 3 实验方法第33-41页
   ·拟南芥种植方法第33-34页
   ·表皮条生物分析第34页
   ·拟南芥保卫细胞胞内钙离子浓度变化的测定第34-35页
   ·激光共聚焦显微技术(CLSM)测定保卫细胞内ROS的变化第35页
   ·RNA的提取及半定量检测基因转录本的表达第35-37页
   ·引物合成第37页
   ·转aequorin基因全过程第37-41页
三 结果与分析第41-63页
 1 实验所用突变体材料的遗传背景鉴定第41-42页
   ·wGα、cGα的RT-PCR鉴定第41页
   ·gpα1-1、gpα1-2突变体的PCR鉴定第41页
   ·atrbohD/F突变体的PCR鉴定第41-42页
 2 细胞外ATP在气孔运动过程中的作用第42-48页
   ·细胞外ATP对拟南芥气孔运动的影响第42-44页
   ·细胞外ATP对不同生态型拟南芥气孔运动的影响第44-45页
   ·不同形式eATP对气孔运动的影响第45页
   ·ATP结构类似物对气孔运动的影响第45-46页
   ·腺苷三磷酸结构完整性及不同结构核苷磷酸分子对气孔开度的影响第46-47页
   ·内源eATP在气孔运动中的作用第47-48页
 3 异三聚体G蛋白α亚基介导细胞外ATP诱导气孔开放的过程第48-49页
 4 ROS对气孔运动的影响第49-54页
   ·不同浓度ROS(氯化铜+抗坏血酸)对气孔运动的影响第49页
   ·ROS在细胞外ATP诱导气孔开放过程中的作用第49-51页
   ·DPI和DTT在细胞外ATP诱导气孔开放中的作用第51-52页
   ·AtrbohD、AtrbohF参与eATP诱导气孔开放的过程第52-53页
   ·细胞外ATP促进保卫细胞ROS升高第53页
   ·NADPH氧化酶参与细胞外ATP诱导保卫细胞ROS产生的过程第53-54页
 5 异三聚体G蛋白α亚基对eATP诱导保卫细胞内ROS升高过程影响第54-56页
 6 aequorin基因的克隆及其在拟南芥中的转化第56-59页
   ·拟南芥aequorin基因PCR结果第56-57页
   ·拟南芥aequorin基因的克隆和序列分析第57页
   ·拟南芥aequorin基因植物表达载体的构建第57-58页
   ·拟南芥转基因植株的获得第58页
   ·转基因植株的PCR鉴定第58-59页
 7 细胞外ATP对拟南芥叶片细胞内钙离子浓度的影响第59-63页
   ·eATP对拟南芥Col叶片细胞内钙离子浓度的影响第59-61页
   ·eATP异三聚体G蛋白相关突变体叶片细胞内钙离子浓度的影响第61-63页
四 讨论与结论第63-68页
 1 细胞外ATP诱导拟南芥气孔开放第63-64页
 2 Gα参与细胞外ATP诱导气孔开放的过程第64页
 3 ROS参与eATP诱导气孔开放的过程第64-65页
 4 Gα可能参与细胞外ATP诱导胞内ROS升高的过程第65-66页
 5 eATP对细胞内Ca~(2+)浓度的影响第66-68页
参考文献第68-78页
致谢第78-79页
攻读学位期间论文及论著发表第79页

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