| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第19-23页 |
| 1 引言 | 第23-47页 |
| ·光合作用的光抑制与光破坏 | 第23-28页 |
| ·光抑制的特征及其与光破坏的关系 | 第23-24页 |
| ·环境胁迫加重了光抑制 | 第24页 |
| ·低温条件下PSI 的光抑制 | 第24-26页 |
| ·低温条件下 PSII 的光抑制 | 第26-28页 |
| ·光抑制和光破坏的防御机制 | 第28-34页 |
| ·通过状态转换向PSI 分配较多的光能 | 第28页 |
| ·减少光吸收,增加光能利用能力 | 第28-29页 |
| ·依赖于叶黄素循环的热耗散 | 第29-31页 |
| ·活性氧清除系统 | 第31-32页 |
| ·D_1 蛋白的周转 | 第32-34页 |
| ·高等植物体内的叶黄素循环 | 第34-38页 |
| ·叶黄素循环的组成 | 第34-35页 |
| ·叶黄素循环的主要功能 | 第35-37页 |
| ·热耗散 | 第35-36页 |
| ·稳定类囊体膜结构 | 第36页 |
| ·防止膜脂过氧化 | 第36-37页 |
| ·对蓝光的响应 | 第37页 |
| ·调节ABA合成 | 第37页 |
| ·叶黄素循环能量耗散的分子机理 | 第37-38页 |
| ·紫黄质脱环氧化酶(VDE) | 第38-45页 |
| ·紫黄质脱环氧化酶的特性 | 第38-43页 |
| ·分子特性 | 第39页 |
| ·VDE成熟蛋白的比较 | 第39-40页 |
| ·VDE基因转运肽特征的比较 | 第40-42页 |
| ·VDE的二级结构预测 | 第42-43页 |
| ·紫黄质脱环氧化酶的调节 | 第43-44页 |
| ·pH值 | 第43页 |
| ·膜脂 | 第43页 |
| ·抗坏血酸（Vc） | 第43-44页 |
| ·巯基化合物和o-菲啶 | 第44页 |
| ·温度 | 第44页 |
| ·UV-B | 第44页 |
| ·紫黄质脱环氧化酶基因的研究 | 第44-45页 |
| ·VDE基因结构的比较 | 第44页 |
| ·VDE 基因的拷贝数 | 第44页 |
| ·VDE 基因 mRNA 的器官特异性表达 | 第44-45页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第45-47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-70页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·材料处理 | 第47页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·酶及生化试剂 | 第47-48页 |
| ·PCR 引物 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-70页 |
| ·总RNA 的提取 | 第48-49页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第49-50页 |
| ·cDNA 纯化 | 第50页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾 | 第50页 |
| ·番茄紫黄质脱环氧化酶基因全长的克隆 | 第50-53页 |
| ·中间片段的获得 | 第51页 |
| ·通过5’RACE获得5’端序列 | 第51-52页 |
| ·通过3’ RACE获得3’端序列 | 第52-53页 |
| ·番茄紫黄质脱环氧化酶基因全长的克隆 | 第53页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第53-56页 |
| ·总RNA 的提取 | 第53-54页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第54页 |
| ·转膜 | 第54-55页 |
| ·预杂交 | 第55页 |
| ·探针的制备 | 第55-56页 |
| ·杂交 | 第56页 |
| ·洗膜 | 第56页 |
| ·放射自显影 | 第56页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第56-58页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第56-57页 |
| ·基因组DNA 的限制性内切酶消化 | 第57页 |
| ·转膜及烘膜 | 第57页 |
| ·探针合成 | 第57页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第57-58页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第58-62页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第58页 |
| ·连接 | 第58页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第58-59页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第59页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第59-60页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第60页 |
| ·回收 | 第60页 |
| ·DNA 序列测定 | 第60-61页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第61页 |
| ·利用农杆菌介导转化番茄 | 第61-62页 |
| ·转基因番茄植株的PCR 检测 | 第62-64页 |
| ·CTAB 法微量法提取基因组DNA | 第62-63页 |
| ·转基因植株的PCR 筛选 | 第63-64页 |
| ·紫黄质脱环氧化酶的原核表达及Western杂交 | 第64-68页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第64页 |
| ·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第64页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第64-65页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第65-66页 |
| ·抗体制备 | 第66页 |
| ·抗血清效价的测定(试管微量沉淀法) | 第66-68页 |
| ·转基因番茄生理指标的测定 | 第68-70页 |
| ·光合气体交换参数的测定 | 第68-69页 |
| ·荧光参数测定 | 第69页 |
| ·P700的820 nm光吸收 | 第69页 |
| ·叶黄素循环色素组分分析 | 第69页 |
| ·O_2~(-|-) 和H_2O_2的测定 | 第69页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第69-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-99页 |
| ·番茄紫黄质脱环氧化酶基因的分离及表达分析 | 第70-81页 |
| ·LeVDE基因的分离 | 第70-71页 |
| ·LeVDE基因的序列分析 | 第71-75页 |
| ·LeVDE 基因编码蛋白的生化特性分析 | 第75-76页 |
| ·基因编码蛋白的疏水性分析 | 第75-76页 |
| ·LeVDE基因表达产物跨膜特性分析 | 第76页 |
| ·LeVDE基因在番茄中的表达分析 | 第76-78页 |
| ·LeVDE在番茄不同器官中的表达 | 第76-77页 |
| ·低温弱光和强光处理下LeVDE基因在番茄中的表达 | 第77-78页 |
| ·LeVDE基因在大肠杆菌中的表达 | 第78-81页 |
| ·原核表达载体pET-LeVDE的构建 | 第78-79页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第79-80页 |
| ·低温弱光和强光下LeVDE在蛋白水平的表达特征 | 第80-81页 |
| ·LeVDE 基因在番茄中的遗传转化 | 第81-86页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第81-82页 |
| ·正、反义表达载体的鉴定 | 第82-83页 |
| ·转正、反义LeVDE基因植株的鉴定 | 第83-85页 |
| ·番茄LeVDE基因Southern杂交分析 | 第85-86页 |
| ·LeVDE的过量表达减轻了番茄PSII和PSI光抑制的敏感性 | 第86-93页 |
| ·转正义番茄叶黄素循环组分的变化 | 第86-87页 |
| ·LeVDE 的过量表达对强光胁迫下番茄叶片光抑制的影响 | 第87-89页 |
| ·LeVDE的过量表达对强光胁迫下NPQ的影响 | 第87页 |
| ·LeVDE的过量表达对叶黄素循环脱环氧化状态的影响 | 第87页 |
| ·LeVDE的过量表达对强光胁迫下净光合速率的影响 | 第87-89页 |
| ·LeVDE的过量表达减轻了强光胁迫下PSII光抑制的敏感性 | 第89页 |
| ·LeVDE 的过量表达对低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制的影响 | 第89-93页 |
| ·LeVDE的过量表达对低温弱光胁迫下NPQ的影响 | 第89页 |
| ·LeVDE的过量表达对低温弱光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响 | 第89-91页 |
| ·LeVDE的过量表达对低温胁迫下PSI光抑制的影响 | 第91页 |
| ·LeVDE的过量表达减轻了低温弱光胁迫下PSII光抑制的敏感性 | 第91页 |
| ·LeVDE的过量表达对低温弱光胁迫下O_2~(-|-)和H_2O_2含量的影响 | 第91页 |
| ·LeVDE的过量表达对低温弱光胁迫下番茄叶片MDA含量的影响 | 第91-93页 |
| ·抑制 LeVDE 的表达加重了番茄的低温光抑制 | 第93-99页 |
| ·转反义番茄叶黄素循环组分的变化 | 第93页 |
| ·抑制LeVDE的表达对强光胁迫下番茄叶片光抑制的影响 | 第93-95页 |
| ·抑制LeVDE的表达对强光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响 | 第93-94页 |
| ·抑制LeVDE的表达对强光胁迫下NPQ及PSII光抑制的影响 | 第94-95页 |
| ·抑制LeVDE 的表达对低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制的影响 | 第95-99页 |
| ·抑制LeVDE 的表达对低温弱光胁迫下叶黄素循环脱环氧化状态的影响 | 第95页 |
| ·抑制LeVDE的表达加重了低温弱光胁迫下PSII的光抑制 | 第95-97页 |
| ·抑制LeVDE的表达对低温弱光胁迫下O_2~(-|-)和番茄叶片MDA含量的影响 | 第97-99页 |
| 4 讨论 | 第99-104页 |
| ·LeVDE 编码一种紫黄质脱环氧化酶 | 第99-100页 |
| ·过量表达LeVDE减轻了强光和低温弱光下PSII和PSI光抑制的敏感性 | 第100-102页 |
| ·依赖于ΔpH的qE是由叶黄素循环库的脱环氧化状态决定的 | 第102页 |
| ·反义介导的LeVDE的下调加重了低温弱光胁迫下番茄叶片光抑制 | 第102-104页 |
| 5 结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-122页 |
| 攻读学位期间撰写的论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
