| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-19页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第19-23页 |
| 1 引言 | 第23-42页 |
| ·植物生物膜的组成 | 第23-24页 |
| ·低温胁迫对植物的影响 | 第24-29页 |
| ·低温对植物生物膜的影响 | 第24-25页 |
| ·低温对植物光合作用的影响 | 第25-27页 |
| ·低温光抑制的生化保护机制 | 第27-29页 |
| ·高温胁迫对植物的影响 | 第29-32页 |
| ·高温对植物生物膜的影响 | 第29-30页 |
| ·高温对植物光合作用的影响 | 第30-31页 |
| ·高温光抑制的生化保护机制 | 第31-32页 |
| ·多不饱和脂肪酸的合成 | 第32-36页 |
| ·多不饱和脂肪酸的种类 | 第32-33页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物合成 | 第33-36页 |
| ·C20-22 PUFAs 的生物合成 | 第33页 |
| ·C16-18 PUFAs 的生物合成 | 第33-36页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的研究 | 第36-41页 |
| ·除ω-3 脂肪酸去饱和酶外的脂肪酸去饱和酶的研究 | 第36-37页 |
| ·ALA 合成过程中关键酶ω-3 脂肪酸去饱和酶的研究 | 第37-41页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶的种类、分布和性质 | 第37-38页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因及其调控 | 第38-39页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶的生理功能 | 第39-41页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第41-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-70页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·材料处理 | 第42页 |
| ·菌株与质粒 | 第42页 |
| ·酶及生化试剂 | 第42页 |
| ·PCR 引物 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-70页 |
| ·总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第44-45页 |
| ·cDNA 纯化 | 第45页 |
| ·对cDNA 进行末端加尾 | 第45-46页 |
| ·番茄ω-3去饱和酶基因全长的克隆 | 第46-49页 |
| ·中间片段的获得 | 第46-47页 |
| ·通过5’RACE获得5’端序列 | 第47-48页 |
| ·通过3’RACE获得3’端序列 | 第48页 |
| ·番茄ω-3去饱和酶基因全长的克隆 | 第48-49页 |
| ·Northern杂交分析 | 第49-52页 |
| ·总RNA的提取 | 第49页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第49-51页 |
| ·转膜 | 第51页 |
| ·预杂交 | 第51-52页 |
| ·探针的制备 | 第52页 |
| ·杂交 | 第52页 |
| ·洗膜 | 第52页 |
| ·放射自显影 | 第52页 |
| ·Southern杂交 | 第52-54页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第52-53页 |
| ·基因组DNA的限制性内切酶消化 | 第53页 |
| ·转膜及烘膜 | 第53-54页 |
| ·探针合成 | 第54页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第54页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第54-59页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·连接 | 第55页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第55页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第55-56页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第56-57页 |
| ·质粒DNA的酶切鉴定 | 第57页 |
| ·回收 | 第57页 |
| ·DNA序列测定 | 第57页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第57-58页 |
| ·利用农杆菌介导转化番茄 | 第58-59页 |
| ·转基因番茄植株的PCR检测 | 第59-61页 |
| ·CTAB法微量法提取基因组DNA | 第59-60页 |
| ·转基因植株的PCR筛选 | 第60-61页 |
| ·ω-3脂肪酸去饱和酶的原核表达及Western杂交 | 第61-66页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第61页 |
| ·E.coli BL21原核表达的诱导 | 第61页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第61-62页 |
| ·抗体的制备 | 第62-63页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第63页 |
| ·Western 杂交 | 第63-66页 |
| ·转基因番茄生理指标的测定 | 第66-70页 |
| ·转基因番茄叶片膜脂含量的测定 | 第66-67页 |
| ·转基因番茄根系和叶片脂肪酸含量的测定 | 第67页 |
| ·相对电导率的测定 | 第67页 |
| ·呼吸速率的测定 | 第67-68页 |
| ·放氧活性的测定 | 第68页 |
| ·叶绿素荧光参数测定 | 第68页 |
| ·O_2~(-|-) 和H_2O_2的测定 | 第68页 |
| ·活性氧清除酶的活性测定 | 第68-69页 |
| ·SOD酶活性的测定 | 第68页 |
| ·APX酶活性的测定 | 第68页 |
| ·丙二醛（MDA）含量的测定 | 第68-69页 |
| ·扫描电镜样品的制作与观察 | 第69-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-100页 |
| ·番茄内质网ω-3去饱和酶基因的分离及表达分析 | 第70-80页 |
| ·LeFAD3基因的分离 | 第70-71页 |
| ·LeFAD3基因的序列分析 | 第71-75页 |
| ·LeFAD3基因在番茄中的表达分析 | 第75-77页 |
| ·LeFAD3基因Southern杂交分析 | 第75-76页 |
| ·LeFAD3基因在番茄不同器官中的表达 | 第76页 |
| ·不同时间和不同温度下LeFAD3基因在番茄中的表达 | 第76-77页 |
| ·LeFAD3基因在大肠杆菌中的表达 | 第77-80页 |
| ·原核表达载体pET-LeFAD3的构建 | 第77-78页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第78-80页 |
| ·LeFAD3 基因在番茄中的遗传转化 | 第80-83页 |
| ·正、反义表达载体的构建 | 第80-81页 |
| ·转正、反义LeFAD3基因植株的鉴定 | 第81-83页 |
| ·LeFAD3基因的过量表达提高了番茄的抗冷能力 | 第83-92页 |
| ·LeFAD3基因过表达改变膜脂脂肪酸的组成 | 第83-86页 |
| ·LeFAD3基因过表达增加低温胁迫下植株的生长量 | 第86-87页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下呼吸速率的影响 | 第87页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下相对电导率的影响 | 第87页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下光合作用的影响 | 第87-89页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下根系和叶片细胞超微结构的影响 | 第89-90页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下叶片活性氧含量及抗氧化酶活性的影响 | 第90-91页 |
| ·LeFAD3基因过表达对低温胁迫下叶片MDA含量的影响 | 第91-92页 |
| ·抑制 LeFAD3 基因表达提高番茄的抗高温能力 | 第92-100页 |
| ·抑制LeFAD3基因表达改变膜脂脂肪酸的组成 | 第92-94页 |
| ·抑制LeFAD3基因表达对高温胁迫下植株的生长量的影响 | 第94页 |
| ·抑制 LeFAD3 基因表达对高温胁迫下相对电导率的影响 | 第94-96页 |
| ·抑制 LeFAD3 基因表达对高温胁迫下呼吸速率的影响 | 第96页 |
| ·抑制LeFAD3基因表达对高温胁迫下光合作用的影响 | 第96页 |
| ·抑制LeFAD3基因表达对高温胁迫下根系和叶片细胞超微结构的影响 | 第96-98页 |
| ·抑制 LeFAD3 基因表达对高温胁迫下叶片活性氧含量及抗氧化酶活性的影响 | 第98-99页 |
| ·抑制LeFAD3基因表达对高温胁迫下叶片MDA含量的影响 | 第99-100页 |
| 4 讨论 | 第100-104页 |
| ·LeFAD3基因序列特征分析 | 第100页 |
| ·过量表达LeFAD3显著提高番茄的耐冷性 | 第100-102页 |
| ·抑制LeFAD3的表达显著提高番茄的耐热性 | 第102-104页 |
| 5 结论 | 第104-105页 |
| 6 参考文献 | 第105-122页 |
| 攻读学位期间撰写的论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
