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OsCYP2参与Aux/IAA蛋白降解并调控水稻侧根发生和花粉发育的功能研究

目录第1-11页
致谢第11-12页
摘要第12-13页
Abstract第13-15页
缩略语表第15-16页
第一章 文献综述第16-26页
 引言第16页
 1 生长素信号途径第16-21页
   ·生长素信号途径中的泛素蛋白酶系统第17-19页
     ·泛素蛋白酶途径概述第17-18页
     ·SCF~(TIR)复合体调控Aux/IAA蛋白的降解第18-19页
   ·Aux/IAA和ARF的互作第19-20页
   ·生长素信号的其他成员第20-21页
   ·水稻中生长素信号的研究第21页
 2. 生长素信号对侧根发生的影响第21-24页
   ·侧根发生机制的研究进展第21-22页
   ·生长素信号对侧根发生的影响第22-23页
   ·水稻中的相关研究第23-24页
 3 生长素对花粉发育的影响第24-25页
   ·花粉发育过程第24页
   ·生长素对花粉发育的影响第24页
   ·水稻中的相关研究第24-25页
 4 亲环素家族的研究进展第25页
 5 本研究目的和意义第25-26页
第二章 Oscyp2突变体的筛选,基因定位及互补验证第26-37页
 1. 材料和方法第26-32页
   ·材料第26页
   ·方法第26-32页
     ·突变体筛选和生长条件第26-27页
     ·水稻营养液的配制第27页
     ·表型分析第27-28页
       ·照片拍摄第27页
       ·生长素处理后的根部表型第27页
       ·穗部表型及结实率测定第27-28页
     ·突变体Oscyp2的基因定位与克隆第28-29页
       ·候选基因的确定与分析第28-29页
         ·基因测序分析第28-29页
         ·RT-PCR和Western分析第29页
     ·转基因互补验证第29-32页
       ·互补载体35S::OsCYP2的构建第29-31页
       ·互补载体35S::OsCYP2转化纯合突变体第31页
       ·转基因阳性植株的鉴定和获得第31-32页
 2. 结果和分析第32-36页
   ·突变体筛选及初步表型分析第32-34页
   ·突变体OsCYP2的基因定位与克隆第34-36页
     ·候选基因的确定与分析第34-35页
       ·基因测序分析第34页
       ·RT-PCR和Western分析第34-35页
     ·转基因互补验证分析第35-36页
 3. 小结和讨论第36-37页
第三章 基因表达分析第37-46页
 1. 材料和方法第37-43页
   ·材料第37页
   ·方法第37-43页
     ·35S::OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位第37-38页
       ·35S::OsCYP2::sGFP融合载体的构建第37-38页
       ·OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位分析第38页
     ·OsCYP2基因的RT-PCR表达分析第38-39页
     ·OsCYP2蛋白在水稻中的组织定位第39-43页
       ·启动子接GUS表达分析第39-41页
         ·OsCYP2启动子融合GUS载体的构建和转基因.第39-40页
         ·GUS染色及显微观察第40-41页
       ·自身启动子接自身基因融合GFP的表达分析第41-43页
         ·OsCYP2::sGFP融合基因载体的构建和转基因.第41-42页
         ·GFP的显微观察第42-43页
 2. 结果和分析第43-45页
   ·OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位分析第43页
   ·OsCYP2基因的RT-PCR表达分析第43-44页
   ·OsCYP2启动子融合GUS在转基因植株中的表达分析第44-45页
   ·OsCYP2::sGFP融合基因在转基因植株中的表达分析第45页
 3. 小结和讨论第45-46页
第四章 Oscyp2突变体侧根细胞结构分析第46-49页
 1. 材料与方法第46-47页
   ·材料第46页
   ·方法第46-47页
     ·OsCYCB1;1::GUS载体的构建和转基因第46-47页
     ·侧根树脂切片分析第47页
 2. 结果与分析第47-48页
   ·侧根树脂切片分析第47-48页
 3. 小结与讨论第48-49页
第五章 Oscyp2突变体花粉发育分析第49-53页
 1 材料与方法第49-50页
   ·材料第49页
   ·方法第49-50页
     ·花药观察第49页
     ·花粉活性检测第49页
     ·花粉形态扫描电镜观察第49-50页
 2 结果与分析第50-52页
   ·花药观察第50页
   ·花粉活性检测第50-51页
   ·花粉形态扫描电镜观察第51-52页
 3 小结与讨论第52-53页
第六章 Oscyp2生长素信号途径分析第53-58页
 1. 材料和方法第53-55页
   ·材料第53页
   ·方法第53-55页
     ·生长素响应基因的RT-PCR表达分析第53-54页
     ·35S::OsIAA11::GFP载体的构建第54-55页
     ·OsIAA11降解试验第55页
 2. 结果和分析第55-57页
   ·生长素响应基因的RT-PCR表达分析第55-56页
   ·OsIAA11降解试验第56-57页
 3. 小结和讨论第57-58页
第七章 OsCYP2互作蛋白的筛选第58-67页
 1. 材料和方法第58-63页
   ·材料第58页
   ·方法第58-63页
     ·酵母双杂筛库第58-60页
     ·GST pull-down实验第60-61页
     ·荧光素酶互补实验第61-63页
 2. 结果和分析第63-66页
   ·酵母双杂筛库结果第63-64页
   ·GST pull-down实验第64-65页
   ·荧光素酶互补实验第65-66页
 3. 小结和讨论第66-67页
第八章 结论和展望第67-70页
 1. 结论第67-68页
 2. 展望第68-70页
附录 试验方法第70-85页
参考文献第85-90页

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