目录 | 第1-11页 |
致谢 | 第11-12页 |
摘要 | 第12-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
缩略语表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-26页 |
引言 | 第16页 |
1 生长素信号途径 | 第16-21页 |
·生长素信号途径中的泛素蛋白酶系统 | 第17-19页 |
·泛素蛋白酶途径概述 | 第17-18页 |
·SCF~(TIR)复合体调控Aux/IAA蛋白的降解 | 第18-19页 |
·Aux/IAA和ARF的互作 | 第19-20页 |
·生长素信号的其他成员 | 第20-21页 |
·水稻中生长素信号的研究 | 第21页 |
2. 生长素信号对侧根发生的影响 | 第21-24页 |
·侧根发生机制的研究进展 | 第21-22页 |
·生长素信号对侧根发生的影响 | 第22-23页 |
·水稻中的相关研究 | 第23-24页 |
3 生长素对花粉发育的影响 | 第24-25页 |
·花粉发育过程 | 第24页 |
·生长素对花粉发育的影响 | 第24页 |
·水稻中的相关研究 | 第24-25页 |
4 亲环素家族的研究进展 | 第25页 |
5 本研究目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 Oscyp2突变体的筛选,基因定位及互补验证 | 第26-37页 |
1. 材料和方法 | 第26-32页 |
·材料 | 第26页 |
·方法 | 第26-32页 |
·突变体筛选和生长条件 | 第26-27页 |
·水稻营养液的配制 | 第27页 |
·表型分析 | 第27-28页 |
·照片拍摄 | 第27页 |
·生长素处理后的根部表型 | 第27页 |
·穗部表型及结实率测定 | 第27-28页 |
·突变体Oscyp2的基因定位与克隆 | 第28-29页 |
·候选基因的确定与分析 | 第28-29页 |
·基因测序分析 | 第28-29页 |
·RT-PCR和Western分析 | 第29页 |
·转基因互补验证 | 第29-32页 |
·互补载体35S::OsCYP2的构建 | 第29-31页 |
·互补载体35S::OsCYP2转化纯合突变体 | 第31页 |
·转基因阳性植株的鉴定和获得 | 第31-32页 |
2. 结果和分析 | 第32-36页 |
·突变体筛选及初步表型分析 | 第32-34页 |
·突变体OsCYP2的基因定位与克隆 | 第34-36页 |
·候选基因的确定与分析 | 第34-35页 |
·基因测序分析 | 第34页 |
·RT-PCR和Western分析 | 第34-35页 |
·转基因互补验证分析 | 第35-36页 |
3. 小结和讨论 | 第36-37页 |
第三章 基因表达分析 | 第37-46页 |
1. 材料和方法 | 第37-43页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-43页 |
·35S::OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位 | 第37-38页 |
·35S::OsCYP2::sGFP融合载体的构建 | 第37-38页 |
·OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位分析 | 第38页 |
·OsCYP2基因的RT-PCR表达分析 | 第38-39页 |
·OsCYP2蛋白在水稻中的组织定位 | 第39-43页 |
·启动子接GUS表达分析 | 第39-41页 |
·OsCYP2启动子融合GUS载体的构建和转基因. | 第39-40页 |
·GUS染色及显微观察 | 第40-41页 |
·自身启动子接自身基因融合GFP的表达分析 | 第41-43页 |
·OsCYP2::sGFP融合基因载体的构建和转基因. | 第41-42页 |
·GFP的显微观察 | 第42-43页 |
2. 结果和分析 | 第43-45页 |
·OsCYP2::sGFP融合基因在水稻原生质体内的亚细胞定位分析 | 第43页 |
·OsCYP2基因的RT-PCR表达分析 | 第43-44页 |
·OsCYP2启动子融合GUS在转基因植株中的表达分析 | 第44-45页 |
·OsCYP2::sGFP融合基因在转基因植株中的表达分析 | 第45页 |
3. 小结和讨论 | 第45-46页 |
第四章 Oscyp2突变体侧根细胞结构分析 | 第46-49页 |
1. 材料与方法 | 第46-47页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-47页 |
·OsCYCB1;1::GUS载体的构建和转基因 | 第46-47页 |
·侧根树脂切片分析 | 第47页 |
2. 结果与分析 | 第47-48页 |
·侧根树脂切片分析 | 第47-48页 |
3. 小结与讨论 | 第48-49页 |
第五章 Oscyp2突变体花粉发育分析 | 第49-53页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
·材料 | 第49页 |
·方法 | 第49-50页 |
·花药观察 | 第49页 |
·花粉活性检测 | 第49页 |
·花粉形态扫描电镜观察 | 第49-50页 |
2 结果与分析 | 第50-52页 |
·花药观察 | 第50页 |
·花粉活性检测 | 第50-51页 |
·花粉形态扫描电镜观察 | 第51-52页 |
3 小结与讨论 | 第52-53页 |
第六章 Oscyp2生长素信号途径分析 | 第53-58页 |
1. 材料和方法 | 第53-55页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53-55页 |
·生长素响应基因的RT-PCR表达分析 | 第53-54页 |
·35S::OsIAA11::GFP载体的构建 | 第54-55页 |
·OsIAA11降解试验 | 第55页 |
2. 结果和分析 | 第55-57页 |
·生长素响应基因的RT-PCR表达分析 | 第55-56页 |
·OsIAA11降解试验 | 第56-57页 |
3. 小结和讨论 | 第57-58页 |
第七章 OsCYP2互作蛋白的筛选 | 第58-67页 |
1. 材料和方法 | 第58-63页 |
·材料 | 第58页 |
·方法 | 第58-63页 |
·酵母双杂筛库 | 第58-60页 |
·GST pull-down实验 | 第60-61页 |
·荧光素酶互补实验 | 第61-63页 |
2. 结果和分析 | 第63-66页 |
·酵母双杂筛库结果 | 第63-64页 |
·GST pull-down实验 | 第64-65页 |
·荧光素酶互补实验 | 第65-66页 |
3. 小结和讨论 | 第66-67页 |
第八章 结论和展望 | 第67-70页 |
1. 结论 | 第67-68页 |
2. 展望 | 第68-70页 |
附录 试验方法 | 第70-85页 |
参考文献 | 第85-90页 |