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基于功能化材料的磷酸化与糖基化蛋白质高效富集及鉴定新方法研究

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
第一章 绪论第14-48页
   ·蛋白质组学研究概述第14-21页
     ·引言第14-15页
     ·蛋白质组学分离技术简介第15-17页
     ·翻译后修饰蛋白质组学第17-18页
     ·生物质谱技术简介第18-21页
   ·磷酸化蛋白质组学第21-25页
     ·磷酸化蛋白质组学概述第21页
     ·磷酸化蛋白质/肽段分离富集的主要技术方法第21-24页
     ·生物质谱解析蛋白质磷酸化第24-25页
   ·糖基化蛋白质组学第25-33页
     ·糖基化蛋白质组学概述第25页
     ·糖基化蛋白的结构与类型第25-26页
     ·糖基化蛋白质的分离分析技术第26-31页
     ·生物质谱技术解析蛋白质糖基化第31-33页
   ·功能化材料在蛋白质组学中的应用第33-35页
     ·概述第33-34页
     ·功能化材料用于固定酶反应器第34页
     ·功能化材料用于低丰度蛋白/肽段的富集第34页
     ·功能化材料用于翻译后修饰蛋白质组学研究第34-35页
   ·本论文选题的意义第35页
 参考文献第35-48页
第二章 多孔二氧化钛微球的制备及其在磷酸化肽富集中的应用第48-82页
   ·引言第48-49页
   ·实验部分第49-52页
     ·原料和试剂第49页
     ·光滑和多孔TiO_2微球的制备第49-50页
     ·光滑和多孔TiO_2微球的表征第50页
     ·样品制备第50-51页
     ·TiO_2材料用于磷酸化肽段的选择性富集第51页
     ·MALDI-TOF-MS检测第51页
     ·自动化nano-RPLC-ESI-MS/MS/MS检测和质谱数据分析第51-52页
   ·结果与讨论第52-61页
     ·光滑和多孔TiO_2材料的表征第52-54页
     ·TiO_2微球用于磷酸化肽富集的条件优化第54-57页
     ·光滑和多孔TiO_2微球富集标准蛋白酶解产物中的磷酸化肽段第57-59页
     ·光滑TiO_2微球、多孔TiO_2微球和商品化TiO_2纳米材料用于富集鼠脑提取蛋白trypsin酶解液中的磷酸化肽段第59-61页
   ·本章小结第61页
 参考文献第61-68页
 附表2.1第68-78页
 附表2.2第78-82页
第三章 基于巯基苯硼酸修饰的纳米金球的糖基化肽段靶上富集研究第82-101页
   ·引言第82-83页
   ·实验部分第83-85页
     ·原料和试剂第83页
     ·纳米金颗粒的制备和表征第83-84页
     ·制备纳米金修饰的MALDI靶板第84页
     ·在纳米金靶点上修饰4-巯基苯硼酸第84页
     ·样品制备第84-85页
     ·糖肽靶上富集第85页
     ·MALDI-QIT-TOF MS分析第85页
   ·结果与讨论第85-96页
     ·MALDI靶板上修饰硼酸第85-86页
     ·糖基化肽段的靶上富集第86-94页
     ·功能化MALDI靶板的重复利用和快速富集第94-96页
   ·本章小结第96页
 参考文献第96-101页
第四章 表面固定Con A的硼酸纳米磁球在糖蛋白富集中的应用第101-132页
   ·引言第101-103页
   ·实验部分第103-106页
     ·原料和试剂第103页
     ·氨基硼酸酸磁性纳米材料的合成第103-104页
     ·表面固定Con A的硼酸磁球的制备第104页
     ·细胞培养和蛋白提取第104页
     ·Con A纳米磁球和商品化Con A磁球用于糖蛋白富集第104-105页
     ·胶上酶解第105页
     ·自动化nano-RPLC-ESI-MS/MS分析第105页
     ·数据库搜索和质谱数据分析第105-106页
   ·结果与讨论第106-115页
     ·在纳米磁球上固定Con A第106-107页
     ·Con A纳米磁球用于标准糖蛋白的选择性富集第107-108页
     ·HCC细胞株7703中糖蛋白的富集和质谱数据分析第108-111页
     ·富集方法评价第111-115页
   ·本章小结第115页
 参考文献第115-121页
 附表4.1第121-129页
 附表4.2第129-132页
攻读学位期间文章发表情况第132-133页
致谢第133-134页

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