| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-11页 |
| ABSTRACT | 第11-17页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 目次 | 第18-23页 |
| 绪论 | 第23-27页 |
| 1 第一章 人胚胎干细胞的阶段性分化通过分泌胚胎肌腱基质和分化因子促进肌腱再生 | 第27-65页 |
| ·引言 | 第27-29页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第29-32页 |
| ·材料和试剂(如无特殊说明均为invitrogen产品) | 第29页 |
| ·实验仪器及材料 | 第29-30页 |
| ·相关溶液的配制 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-47页 |
| ·MEF饲养层处理: | 第32页 |
| ·hESC-MSC细胞培养 | 第32-33页 |
| ·hESC-MSC鉴定 | 第33-36页 |
| ·组织工程肌腱的制备 | 第36页 |
| ·体外静态力学刺激 | 第36-37页 |
| ·体内异位种植模型 | 第37页 |
| ·体内实验预染细胞-Dil | 第37页 |
| ·损伤肌腱模型 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR(real time PCR) | 第38-39页 |
| ·力学测试 | 第39页 |
| ·组织学检测 | 第39-41页 |
| ·透射电镜检测组织工程肌腱的胶原纤维微观结构 | 第41页 |
| ·提取RNA | 第41-42页 |
| ·逆转录合成cDNA | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42-45页 |
| ·胶原含量测定 | 第45-46页 |
| ·统计学分析 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-60页 |
| ·分离和鉴定人胚胎干细胞来源的间充质干细胞(hESC-MSCs) | 第47-49页 |
| ·hESC-MSCs在体内外构建肌腱样组织 | 第49-51页 |
| ·hESC-MSCs在原位促进髌腱的再生 | 第51-55页 |
| ·hESC-MSCs在促进髌腱的再生的机理研究 | 第55-60页 |
| ·讨论 | 第60-65页 |
| 2 第二章 转录因子SCLERAXIS与力学刺激协同调控干细胞腱系分化机理和效应研究 | 第65-101页 |
| ·引言 | 第65-68页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第68-69页 |
| ·材料(无特殊说明均购自invitrogen公司) | 第68页 |
| ·质粒、载体及菌株 | 第68页 |
| ·试剂配制 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-78页 |
| ·Scleraxis,scleraxis-GFP,Lacz及GFP慢病毒载体构建 | 第69-73页 |
| ·力学刺激诱导hESC-MSC分化 | 第73-74页 |
| ·力学刺激构建组织工程肌腱 | 第74页 |
| ·体内异位组织工程肌腱构建 | 第74页 |
| ·体内原位肌腱修复实验 | 第74-75页 |
| ·免疫荧光 | 第75-76页 |
| ·Western-blot | 第76-77页 |
| ·LacZ-Xgal染色 | 第77页 |
| ·其余方法同第一章 | 第77-78页 |
| ·实验结果 | 第78-95页 |
| ·SCX稳定转染hESC-MSC | 第78-79页 |
| ·SCX在平面培养条件下的诱导分化的作用 | 第79-81页 |
| ·SCX在三维培养条件下的协同力学刺激的诱导分化的作用 | 第81-87页 |
| ·力学刺激协同SCX诱导肌腱分化的机制研究 | 第87-89页 |
| ·力学刺激协同SCX体内异位诱导肌腱分化及胶原成熟 | 第89-91页 |
| ·力学刺激协同SCX体内原位修复肌腱损伤 | 第91-94页 |
| ·SCX协同力学刺激诱导肌腱分化模式 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-101页 |
| 3 第三章 网状蚕丝-胶原海绵复合支架促肌腱再生研究 | 第101-125页 |
| ·引言 | 第101-103页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第103页 |
| ·材料和试剂 | 第103页 |
| ·实验仪器及材料 | 第103页 |
| ·实验动物 | 第103页 |
| ·其余试剂仪器 | 第103页 |
| ·实验方法 | 第103-110页 |
| ·蚕丝胶原海绵复合支架制作 | 第103-104页 |
| ·电镜扫描(SEM) | 第104页 |
| ·支架生物相容性、体内降解实验 | 第104-105页 |
| ·骨髓间充质干细胞分离、培养、传代、冻存 | 第105页 |
| ·蚕丝、胶原膜制备及细胞毒性反应性检测 | 第105-106页 |
| ·半定量PCR | 第106页 |
| ·兔内侧副韧带修复实验 | 第106-109页 |
| ·其余方法同第一、二章 | 第109-110页 |
| ·实验结果 | 第110-121页 |
| ·支架形态学鉴定 | 第110-111页 |
| ·骨髓间充质干细胞在胶原和蚕丝膜上的反应 | 第111-112页 |
| ·支架体内降解和细胞毒性 | 第112-113页 |
| ·内侧副韧带(MCL)修复结果 | 第113-121页 |
| ·讨论 | 第121-125页 |
| 4 第四章 工程化HESC-MSC与蚕丝-胶原海绵复合支架构建组织工程肌腱研究 | 第125-140页 |
| ·引言 | 第125-126页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第126页 |
| ·实验方法 | 第126-129页 |
| ·体外力学刺激 | 第126-127页 |
| ·动物模型 | 第127-128页 |
| ·其余方法 | 第128-129页 |
| ·实验结果 | 第129-137页 |
| ·体外hESC-MSC组织工程肌腱构建 | 第129-131页 |
| ·体内异位hESC-MSC/SCX-hESC-MSC构建组织工程肌腱 | 第131-133页 |
| ·组织工程肌腱修复肌腱原位损伤 | 第133-137页 |
| ·讨论 | 第137-140页 |
| 5 总结 | 第140-142页 |
| ·肌腱种子细胞选择 | 第140页 |
| ·肌腱细胞诱导分化条件 | 第140-141页 |
| ·肌腱细胞诱导分化机制研究 | 第141页 |
| ·网状蚕丝-胶原海绵复合支架用于肌腱修复研究 | 第141页 |
| ·力学刺激，胚胎干细胞复合支架构建组织工程肌腱研究 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-151页 |
| 综述 | 第151-186页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第186-188页 |
