| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 胚胎早期发育 | 第10-11页 |
| 1.2 胚胎干细胞 | 第11-12页 |
| 1.3 胚胎干细胞的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.4 LIF/STAT3信号通路 | 第15-17页 |
| 1.5 蛋白酪氨酸磷酸酶家族(ProteinTyrosine Phosphatase,PTP家族) | 第17页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-38页 |
| 2.1 材料 | 第19-24页 |
| 2.1.1 实验所需仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2 实验所需试剂 | 第20-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 小鼠胚胎干细胞和上胚层干细胞的培养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 质粒构建 | 第25-29页 |
| 2.2.3 过表达质粒导入细胞 | 第29页 |
| 2.2.4 293FT细胞的培养 | 第29-30页 |
| 2.2.5 病毒转染质粒的敲低方法 | 第30页 |
| 2.2.6 小鼠胚胎干细胞碱性磷酸酶(AP)活性的检测 | 第30-31页 |
| 2.2.7 蛋白质印迹(免疫印迹实验,Western bloting) | 第31-33页 |
| 2.2.8 免疫共沉淀(CO-IP) | 第33-34页 |
| 2.2.9 免疫萤光染色 | 第34页 |
| 2.2.10 定量RT-PCR(qRT-PCR) | 第34-35页 |
| 2.2.11 小鼠胚胎干细胞的冻存 | 第35-36页 |
| 2.2.12 小鼠胚胎干细胞的复苏 | 第36页 |
| 2.2.13 质粒的转化 | 第36-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-53页 |
| 3.1. 小鼠胚胎干细胞mESCs中STAT3相互作用蛋白的鉴定 | 第38-41页 |
| 3.1.1 PTPN2被筛选出可能与STAT3存在相互作用 | 第38-40页 |
| 3.1.2 PTPN2与STAT3蛋白间互相作用的验证 | 第40-41页 |
| 3.2 过表达的PTPN2是通过降低STAT3pY705来促进mESC的分化 | 第41-46页 |
| 3.2.1 过表达PTPN2对小鼠胚胎干细胞多能性基因的影响 | 第41-43页 |
| 3.2.2 PTPN2的过表达对STAT3磷酸化的影响 | 第43-45页 |
| 3.2.3 PTPN2与STAT3蛋白的结合主要发生在在细胞核 | 第45-46页 |
| 3.3 降低PTPN2的表达能够延迟小鼠胚胎干细胞的分化 | 第46-50页 |
| 3.3.1 敲低PTPN2的表达对小鼠胚胎干细胞的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.2 敲除PTPN2的表达对小鼠胚胎干细胞的影响 | 第47-50页 |
| 3.4 在过表达STAT3的上胚层干细胞中抑制PTPN2基因的表达可以促进上胚层干细胞的重编程 | 第50-53页 |
| 3.4.1 在小鼠上胚层干细胞中降低PTPN2的含量对STAT3介导的重编程能力的影响 | 第50-52页 |
| 3.4.2 在小鼠上胚层干细胞中过表达PTPN2的含量对STAT3介导的重编程能力的影响 | 第52-53页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第53-57页 |
| 4.1 讨论 | 第53-54页 |
| 4.2 展望 | 第54-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附图 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第69页 |
